[發(fā)明專利]同時(shí)測定四黃止痢顆粒中4種有效成分的方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 202010449375.1 | 申請日： | 2020-05-25 |
| 公開（公告）號： | CN111505190B | 公開（公告）日： | 2023-01-17 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 畢海林;肖裕章;張超;袁啟峰 | 申請（專利權(quán)）人： | 重慶方通動物藥業(yè)有限公司 |
| 主分類號： | G01N30/88 | 分類號： | G01N30/88;G01N30/74 |
| 代理公司： | 北京匯澤知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11228 | 代理人： | 武君 |
| 地址： | 402460 重慶市*** | 國省代碼： | 重慶;50 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 同時(shí) 測定 四黃止痢 顆粒 有效成分 方法 | ||
1.同時(shí)測定四黃止痢顆粒中4種有效成分的方法，其特征在于，該方法采用高效液相色譜-二極管陣列檢測器（HPLC-DAD）法，包括以下步驟：
1）色譜條件
色譜柱填充劑：十八烷基硅烷鍵合硅膠；
流動相及洗脫方式：以質(zhì)量百分含量為0.1%的磷酸水溶液為流動相A，以乙腈為流動相B，按以下程序進(jìn)行梯度洗脫，
0~5min：流動相為體積比92:8的流動相A-流動相B混合液；
5~10min：流動相為體積比85:15的流動相A-流動相B混合液；
10~20min：流動相為體積比80:20的流動相A-流動相B混合液；
20~30min：流動相為體積比75:25的流動相A-流動相B混合液；
30~45min：流動相為體積比65:35的流動相A-流動相B混合液；
45~65min：流動相為體積比35:65的流動相A-流動相B混合液；
65~70min：流動相為體積比92:8的流動相A-流動相B混合液；
70~75min：流動相為體積比92:8的流動相A-流動相B混合液；
流速：0.8mL/min；
柱溫：30℃；
檢測器：DAD檢測器；
2）供試品溶液的制備
精密稱取供試品，研細(xì)，置于100 mL容量瓶中，加入質(zhì)量百分含量為75%的甲醇溶液，超聲處理20 min，冷卻至室溫，再用質(zhì)量百分含量為75%的甲醇溶液定容于100 mL，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即可；
3）對照品溶液及混合對照品溶液的制備
分別精密稱取大黃素、（R,S）-告依春、黃芩苷和甘草苷，加入質(zhì)量百分含量為75%的甲醇溶液溶解并定容，制成質(zhì)量濃度分別為0.4 mg/mL、0.03 mg/mL、0.1mg/mL、0.5mg/mL的4種對照品溶液，再分別精密量取4種對照品溶液2.0 mL置于25 mL容器中，加入質(zhì)量百分含量為75%的甲醇溶液稀釋并定容，得到混合對照品溶液；
4）測定
依次分別精密量取大黃素、（R,S）-告依春、黃芩苷和甘草苷對照品溶液，以及混合對照品溶液，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖，另精密量取供試品溶液注入液相色譜儀，同法測定，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算供試品中各有效成分的含量；大黃素、（R,S）-告依春、黃芩苷和甘草苷對照品溶液的檢測波長分別為254nm，245nm，276nm和276nm，混合對照品溶液和供試品溶液的檢測波長為245nm，254nm，276nm。
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