[發(fā)明專(zhuān)利]用于制備羊支原體肺炎疫苗的組合菌株、羊支原體肺炎三價(jià)滅活疫苗及其制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010444611.0
• 申請(qǐng)日: 2020-05-23
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN111690554B
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-11-23
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 戴伶俐;趙世華;張?jiān)旅?/a>;宋越;王娜;張帆;達(dá)來(lái)寶力格;劉威;楊斌;周蕾;柴春霞;白帆;陳偉;宋愛(ài)軍
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)牧業(yè)科學(xué)院
• 主分類(lèi)號(hào): C12N1/20
• 分類(lèi)號(hào): C12N1/20;A61K39/116;A61K39/02;A61P31/04;C12R1/35
• 代理公司: 北京高沃律師事務(wù)所 11569
• 代理人: 董大媛

1.用于制備羊支原體肺炎疫苗的組合菌株，其特征在于，包括綿羊肺炎支原體菌株MO_NM01、綿羊肺炎支原體菌株MO_NM02和綿羊肺炎支原體菌株MO_NM03；所述綿羊肺炎支原體菌株MO_NM01的保藏編號(hào)為CGMCC No.19698；所述綿羊肺炎支原體菌株MO_NM02的保藏編號(hào)為CGMCC No.19699；所述綿羊肺炎支原體菌株MO_NM02的保藏編號(hào)為CGMCC No.19700。

2.一種用于制備羊支原體肺炎疫苗的菌液制劑，其特征在于，包括獨(dú)立存在的綿羊肺炎支原體菌株MO_NM01菌液、綿羊肺炎支原體菌株MO_NM02菌液和綿羊肺炎支原體菌株MO_NM03菌液；

所述綿羊肺炎支原體菌株MO_NM01菌液、綿羊肺炎支原體菌株MO_NM02菌液和綿羊肺炎支原體菌株MO_NM03菌液的菌濃度分別≥5×1E8CCU/ml。

3.一種羊支原體肺炎三價(jià)滅活疫苗，其特征在于，包括滅活的權(quán)利要求2所述的菌液制劑和佐劑。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的羊支原體肺炎三價(jià)滅活疫苗，其特征在于，所述滅活的菌液制劑和佐劑的質(zhì)量比為(0.8～1.2):(0.8～1.2)。

5.根據(jù)權(quán)利要求3或4所述的羊支原體肺炎三價(jià)滅活疫苗，其特征在于，所述佐劑為水包油包水礦物油。

6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的羊支原體肺炎三價(jià)滅活疫苗，其特征在于，所述滅活的菌液制劑中綿羊肺炎支原體菌株MO_NM01菌液、綿羊肺炎支原體菌株MO_NM02菌液和綿羊肺炎支原體菌株MO_NM03菌液的體積比為(0.8～1.2)：(0.8～1.2)：(0.8～1.2)。

7.權(quán)利要求3～6任意一項(xiàng)所述的羊支原體肺炎三價(jià)滅活疫苗的制備方法，包括以下步驟：

1)分別培養(yǎng)綿羊肺炎支原體菌株MO_NM01、綿羊肺炎支原體菌株MO_NM02和綿羊肺炎支原體菌株MO_NM03獲得綿羊肺炎支原體菌株MO_NM01菌液、綿羊肺炎支原體菌株MO_NM02菌液和綿羊肺炎支原體菌株MO_NM03菌液；

2)分別將所述綿羊肺炎支原體菌株MO_NM01菌液、綿羊肺炎支原體菌株MO_NM02菌液和綿羊肺炎支原體菌株MO_NM03菌液滅活后混合獲得滅活的菌液制劑；

3)將滅活的菌液制劑和佐劑混合乳化獲得羊支原體肺炎三價(jià)滅活疫苗。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的制備方法，其特征在于，步驟2)中所述的滅活的方法為將所述綿羊肺炎支原體菌株MO_NM01菌液、綿羊肺炎支原體菌株MO_NM02菌液和綿羊肺炎支原體菌株MO_NM03菌液分別與β丙內(nèi)酯混合，3～5℃作用45～55h，然后35～40℃振蕩1～3h。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的制備方法，其特征在于，所述β丙內(nèi)酯的體積為所述綿羊肺炎支原體菌株MO_NM01菌液、綿羊肺炎支原體菌株MO_NM02菌液或綿羊肺炎支原體菌株MO_NM03菌液體積的0.1％～0.3％；所述振蕩的轉(zhuǎn)速為120～180rpm。

10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的制備方法，其特征在于，所述混合乳化的溫度為30～32℃，所述混合乳化的時(shí)間為25～35min，所述混合乳化的轉(zhuǎn)速為250～350rpm。