[發(fā)明專利]重組新型冠狀病毒及其制備方法和應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010439738.3
• 申請(qǐng)日: 2020-05-22
• 公開（公告）號(hào): CN111560354B
• 公開（公告）日: 2022-07-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 楊鵬輝;王希良;程晉霞;王歡;孫芳
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國人民解放軍總醫(yī)院第五醫(yī)學(xué)中心;北京麥迪理邦生物科技有限公司
• 主分類號(hào): C12N7/01
• 分類號(hào): C12N7/01;C12N15/50;C07K14/165;A61K39/295;A61K39/215;A61K39/145;A61P31/14;A61P31/16;C12R1/93
• 代理公司: 北京紀(jì)凱知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 關(guān)暢

1.一種重組病毒，所述重組病毒按照包括如下步驟的方法制備：將含有流感病毒的PB2基因的重組質(zhì)粒、含有流感病毒的PB1基因的重組質(zhì)粒、含有流感病毒的PA基因的重組質(zhì)粒、含有流感病毒的NP基因的重組質(zhì)粒、含有流感病毒的M基因的重組質(zhì)粒和含有流感病毒的NS基因的重組質(zhì)粒，以及含有流感病毒的HA基因的重組質(zhì)粒和含有流感病毒的NA基因的重組質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞，培養(yǎng)得到重組病毒；其特征在于：

所述流感病毒的NS基因替換為名稱為S-RBD+E+M-NS基因的重組DNA分子；

所述S-RBD+E+M-NS基因是在所述流感病毒的NS基因的開放讀碼框的自5′末端起第375位至第376位核苷酸之間插入S-RBD+E+M基因，所述流感病毒的NS基因的開放讀碼框的自5′末端起第375位核苷酸與所述S-RBD+E+M基因通過5′-TAATG-3′進(jìn)行連接，所述S-RBD+E+M基因與所述流感病毒的NS基因的開放讀碼框的自5′末端起第376位核苷酸連接，并保持所述流感病毒的NS基因的其它核苷酸不變得到的重組DNA分子；

所述S-RBD+E+M基因是編碼SARS-CoV-2 S蛋白的受體結(jié)合區(qū)基因以及E蛋白基因和M蛋白基因連接而成的DNA分子；

所述S-RBD+E+M-NS基因的核苷酸序列是SEQ ID NO.5第12-2604位或SEQ ID NO.8第12-2605位；

所述流感病毒的PB2、流感病毒的PB1、流感病毒的PA、流感病毒的NP、流感病毒的M、流感病毒的NS中的流感病毒為冷適應(yīng)、減毒流感病毒株A/AnnArbor/6/60；所述流感病毒的HA、流感病毒的NA中的流感病毒為流感病毒株A/Michigan/45/2015；

或，所述流感病毒的PB2、流感病毒的PB1、流感病毒的PA、流感病毒的NP、流感病毒的M、流感病毒的NS、流感病毒的HA、流感病毒的NA中的流感病毒為流感病毒株A/PR/8/1934。

2.權(quán)利要求1所述的重組病毒在制備預(yù)防流感病毒和/或SARS-CoV-2引起的疾病的產(chǎn)品中的應(yīng)用。

3.由權(quán)利要求1所述的重組病毒制備得到的嵌合疫苗。

4.權(quán)利要求3所述的嵌合疫苗在制備預(yù)防流感病毒和/或SARS-CoV-2引起的疾病的產(chǎn)品中的應(yīng)用。