[發明專利]Periostin重組蛋白在維持肌腱干細胞功能中的應用

有效

• 申請號: 202010438637.4
• 申請日: 2020-05-22
• 公開（公告）號: CN111826346B
• 公開（公告）日: 2021-12-31
• 發明（設計）人: 劉燕;王禹;金姍姍;朱麗莎
• 申請（專利權）人: 北京大學口腔醫學院
• 主分類號: C12N5/0775
• 分類號: C12N5/0775;C12N5/077;A61K38/17;A61P19/04;A61P39/06
• 代理公司: 南京中律知識產權代理事務所(普通合伙) 32341
• 代理人: 沈振濤

本發明提供了Periostin重組蛋白在維持肌腱干細胞功能中的應用，包括肌腱干細胞的體外培養方法，采用含Periostin重組蛋白的培養基培養；肌腱干細胞體外培養基，所述培養基中含有Periostin重組蛋白。本發明利用Periostin重組蛋白成功建立了肌腱干細胞的體外的培養、大量擴增的方法，能夠獲得足夠數量的肌腱干細胞，經長期傳代擴增后的肌腱干細胞保持良好的增殖、自我更新能力，及肌腱向分化能力，使得肌腱干細胞應用于肌腱組織工程修復再生治療成為可能。

技術領域

本發明屬于生物醫藥領域，特別涉及Periostin重組蛋白在維持肌腱干細胞功能中的應用。

背景技術

肌腱損傷在臨床上是一種常見疾病，流行病學調查發現運動損傷當前的發病率占有10-20％，常常直接源于創傷、劇烈運動或者繼發于慢性肌腱炎癥或者腫瘤等。成年后肌腱屬于低細胞密度、低血管組織，自身修復再生能力差，而目前肌腱修復再生的傳統治療方法依然存在眾多的問題，比如結構特異性以及完整性難恢復、功能恢復程度較低、二次損傷復發率高等。近年來，隨著干細胞生物學以及組織工程技術的發展給肌腱損傷治療帶來了希望。組織工程由種子細胞、支架材料和生物活性因子三個重要的因素組成。肌腱干/祖細胞(TSPCs)作為組織工程首選的種子細胞。2007年BI等第一次從人和鼠的肌腱組織中成功分離出肌腱干細胞，并發現在體外培養這種細胞具有間充質干細胞的普遍特性，如克隆形成能力、自我更新能力以及多向分化潛能等，而植入到人體內后可以形成肌腱樣組織。

然而，肌腱干細胞在體內存在比例較低，從患者體內分離后在體外需要經過長期擴增后才能獲得足夠數量用于肌腱組織缺損修復再生。與正常成體干細胞同樣存在的問題是，長期擴增后的肌腱干細胞增殖、自我更新、分化能力下降，嚴重影響肌腱干細胞在肌腱組織工程中的運用效果。一些尚未成熟的實驗性嘗試，例如缺氧的應用、復雜的三維培養、特定的底物調控等在體外環境下被證明可以一定程度上調節干細胞功能，但是由于自身技術不穩定性、成本昂貴、體內運用困難等問題大大降低了實際臨床轉化應用的可行性。

Periostin作為一種分泌的細胞外基質蛋白，廣泛存在于全身各組織，包括骨膜、皮膚、心肌、牙周膜、韌帶等等。

目前還未有關于在體外長期擴增培養肌腱干細胞使用Periostin重組蛋白可以促進干細胞自我更新、分化能力的報道。

發明內容

技術問題：為了解決現有技術的缺陷，本發明提供了Periostin重組蛋白(rPOSTN)在維持肌腱干細胞功能中的應用。

技術方案：本發明的第一方面，提供了Periostin重組蛋白在維持肌腱干細胞功能中的應用；尤其是，Periostin重組蛋白在長期培養肌腱干細胞中維持肌腱干細胞功能中的應用。

本發明的第二方面，提供了Periostin重組蛋白在促進肌腱干細胞自我更新能力和/或增殖能力中的應用；尤其是，Periostin重組蛋白在細胞早期代數中促進肌腱干細胞自我更新能力和/或增殖能力中的應用。

本發明的第三方面，提供了Periostin重組蛋白在促進肌腱干細胞肌腱向分化能力中的應用；尤其是，Periostin重組蛋白在細胞早期代數中促進肌腱干細胞肌腱向分化能力中的應用。

本發明的第四方面，提供了Periostin重組蛋白在促進肌腱干細胞干性維持和/或抑制衰老能力中的應用；尤其是，Periostin重組蛋白在連續傳代擴增中促進肌腱干細胞干性維持和/或抑制衰老能力的應用。

本發明的第五方面，提供了Periostin重組蛋白在制備維持肌腱干細胞功能藥物中的應用；尤其是，Periostin重組蛋白(rPOSTN)在制備長期培養肌腱干細胞中維持肌腱干細胞功能藥物中的應用。