[發明專利]一種基于重組腺相關病毒8型的microRNA-212-3P海綿的構建及其應用有效
| 申請號： | 202010432475.3 | 申請日： | 2020-05-20 |
| 公開（公告）號： | CN111471716B | 公開（公告）日： | 2021-10-15 |
| 發明（設計）人： | 楊文卓;劉瑞麟;孫波 | 申請（專利權）人： | 上海市同濟醫院 |
| 主分類號： | C12N15/864 | 分類號： | C12N15/864;C12N15/113;C12N7/01;A61K31/7088;A61P1/16 |
| 代理公司： | 上海卓陽知識產權代理事務所(普通合伙) 31262 | 代理人： | 巫蓓麗 |
| 地址： | 200065 *** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 基于 重組 相關 病毒 microrna 212 海綿 構建 及其 應用 | ||
1.一種miRNA-212-3P海綿表達載體，其特征在于，構建方法為：在基本載體pHBAAV-U6-MCS-CMV-EGFP的多克隆位點連入序列如SEQ ID NO:3的第442-569bp所示的序列。
2.根據權利要求1所述的miRNA-212-3P海綿表達載體，其特征在于，所述miRNA-212-3P海綿表達載體的序列如SEQ ID NO:3所示。
3.權利要求1或2所述的miRNA-212-3P海綿表達載體在制備預防或治療非酒精性脂肪性肝病的藥物中的應用。
4.權利要求1或2所述的miRNA-212-3P海綿表達載體的制備方法，其特征在于，在基本載體pHBAAV-U6-MCS-CMV-EGFP的多克隆位點連入序列如SEQ ID NO:3的第442-569bp所示的序列，所述miRNA-212-3P海綿表達載體的序列如SEQ ID NO:3所示。
5.一種腺相關病毒，其特征在于，制備所述腺相關病毒采用的穿梭質粒是權利要求1或2所述的miRNA-212-3P海綿表達載體。
6.根據權利要求5所述的腺相關病毒，其特征在于，制備所述腺相關病毒采用的編碼rep和cap蛋白編碼基因的pAAV-RC為8型AAV。
7.根據權利要求6所述的腺相關病毒，其特征在于，所述腺相關病毒的制備方法包含以下步驟：將權利要求1或2的miRNA-212-3P海綿表達載體，與pAAV-RC質粒和pHelper質粒共轉染AAV-293細胞。
8.權利要求5-7任一所述的腺相關病毒在制備預防或治療非酒精性脂肪性肝病的藥物中的應用。
9.權利要求5-7任一所述的腺相關病毒的制備方法，其特征在于，將權利要求1或2的miRNA-212-3P海綿表達載體，與pAAV-RC質粒和pHelper質粒共轉染AAV-293細胞。
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