[發明專利]基于雞胚絨毛膜尿膜囊的腫瘤適時藥物精確治療模型

在審

• 申請號: 202010430358.3
• 申請日: 2020-05-20
• 公開（公告）號: CN111593018A
• 公開（公告）日: 2020-08-28
• 發明（設計）人: 任宏政;樊琳蕊;王金勝;張灝
• 申請（專利權）人: 任宏政
• 主分類號: C12N5/073
• 分類號: C12N5/073;C12N5/09;C12Q1/02
• 代理公司: 北京盛凡智榮知識產權代理有限公司 11616
• 代理人: 李青

本發明公開基于雞胚絨毛膜尿膜囊的腫瘤適時藥物精確治療模型，包括雞胚PDX模型建立與腫瘤移植藥物檢測，及適時藥物精確治療分析；雞胚PDX模型建立與腫瘤移植藥物檢測包括以下步驟：受精蛋備孵育、受精蛋恒溫孵育，胚胎孵育；具生物活性組織/細胞種植于CAM表面，表面加目標檢測藥物；觀察、進行HE、IHC及分子病理檢測。適時藥物精確治療分析包括以下步驟：患者手術標本初步處理，包括新鮮組織處理或組織庫凍存、常規病理檢查或分子病理基因分析后給出靶向藥物及常規化療藥物建議；雞胚PDX模型組織接種，得出藥物模擬治療建議；綜合分析，個體化精確治療；療效監測，分析。本發明應用CAM PDX模型，可適時監測化療藥物腫瘤治療的療效及副作用。

技術領域

本發明涉及生物技術領域，具體為基于雞胚絨毛膜尿膜囊的腫瘤適時藥物精確治療模型及其建立方法。

背景技術

近年來，隨著腫瘤治療手段的增多，但是其效果一直未能得到有效的提高，但是其副作用卻一直困擾著患者和醫務工作者。所以，如何進行腫瘤的適時有效的精確個體化治療是科學家研究的重點。

PDX模型用于癌癥研究實驗模型，近年來越來越流行。它們可用于研究的腫瘤標志物和生物學途徑，藥物療效等個性化癌癥治療的建立。目前應用較多的是免疫缺陷鼠，但是其缺點是腫瘤不直觀，觀察周期長。腫瘤細胞原代培養，不易操作且周期較長。近一個世紀以來，很多研究發現雞胚絨毛尿囊系統用于腫瘤研究是非常有價值的，雞胚可以有效地支持接種的異種腫瘤細胞的生長，在細胞移植后幾天內保持快速的腫瘤形成。該CAM的致密毛細血管網絡可以并進入宿主脈管系統，從而制造提供了一個獨特的實驗模型，可用來研究敏感藥物的篩選。另外，它價格低廉，易操作，易觀察，但缺點是可觀察的時間只有8-10天。

如果通過雞胚CAM模型總結出有效的腫瘤藥物敏感、耐藥及副作用的監測平臺，有可能為患者的個體化治療提供依據。

發明內容

為解決以上現有問題，本發明提供基于雞胚絨毛膜尿膜囊的腫瘤適時藥物精確治療模型及其建立方法。本發明通過以下技術方案實現。

基于雞胚絨毛膜尿膜囊的腫瘤適時藥物精確治療模型，包括雞胚PDX模型建立與腫瘤移植藥物檢測，以及適時藥物精確治療分析；

所述雞胚PDX模型建立與腫瘤移植藥物檢測包括以下步驟：

S1.受精雞蛋備孵育、受精蛋恒溫孵育，胚胎孵育；

S2.具生物活性組織/細胞于雞胚第8-10天種植于CAM表面，于第11，13，15天在移植腫瘤表面滴加/表面血管內顯微注射目標檢測藥物；

S3.第17天用超聲觀察移植腫瘤周圍血管供應情況；于第18天收獲移植腫瘤組織進行HE、IHC及分子病理檢測；

所述適時藥物精確治療分析包括以下步驟：

SS1.患者手術標本進行初步處理，包括以下幾種方式：

新鮮組織離體20分鐘內種植或組織庫凍存，以備后用；

常規病理檢查或分子病理基因分析進而給出靶向藥物及常規化療藥物建議；

雞胚PDX模型組織接種，進而得出藥物模擬治療建議或療效及副作用監測建議；

SS2.綜合分析，個體化精確治療；

SS3.療效監測，分析；

SS4.當療效不佳，復發或轉移時，將體液標本中游離腫瘤細胞或外周血液CTC進行雞胚PDX模型細胞接種，得出藥物模擬治療或療效及副作用檢測，進而對相關數據綜合分析，指導個體化精確治療；

SS5.繼續對療效監測，分析；

SS6.藥物適時選擇分析，總結。