[發(fā)明專利]丁酸梭菌固體菌劑及其制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010430087.1
• 申請日: 2020-05-20
• 公開（公告）號: CN113699054B
• 公開（公告）日: 2023-08-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 盧宗梅;劉利利;張德國;周勇;佟毅;邴狄祥;李義;郭世堂
• 申請（專利權(quán)）人: 中糧生物科技股份有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N11/02;C12N11/10;C12N11/14;C12R1/145
• 代理公司: 北京潤平知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11283
• 代理人: 喬雪微;劉依云

1.一種丁酸梭菌固體菌劑的制備方法，其特征在于，該方法包括：將丁酸梭菌菌體在載體存在的情況下使用流化床制備丁酸梭菌固體菌劑；

其中，所述丁酸梭菌菌體以菌泥的形式提供；所述丁酸梭菌菌泥與所述載體的重量比為1：3-4；

其中，所述載體包含生物質(zhì)材料和粘土；所述生物質(zhì)材料選自淀粉、豆粕粉和菊粉中的至少一種；所述粘土為硅藻土；

其中，所述載體中生物質(zhì)材料和粘土的重量比為1：0.4-0.6；

其中，所述流化床的工作條件包括：進(jìn)口溫度70-100℃，出口溫度30-50℃，干燥時(shí)間10-40min；

其中，所述丁酸梭菌菌體的制備方法包括：將丁酸梭菌菌種依次進(jìn)行活化、擴(kuò)培、發(fā)酵和可選的固液分離，得到丁酸梭菌菌體；

其中，所述發(fā)酵在發(fā)酵培養(yǎng)基中進(jìn)行，所述發(fā)酵培養(yǎng)基包含可溶性淀粉、酵母浸粉、硫酸銨、氯化鈉、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、硫酸錳和碳酸鈣；

其中，以所述發(fā)酵培養(yǎng)基的總重量為基準(zhǔn)，所述可溶性淀粉的含量為1-4重量%，所述酵母浸粉的含量為0.5-1.5重量%，所述硫酸銨的含量為2-4重量%，所述氯化鈉的含量為1-3重量%，所述磷酸二氫鉀的含量為1-2重量%，所述硫酸鎂的含量為0.01-0.04重量%，所述硫酸錳的含量為0.01-0.04重量%，所述碳酸鈣的含量為0.2-0.4重量%；

其中，所述活化和擴(kuò)培各自獨(dú)立地在種子培養(yǎng)基中進(jìn)行，所述種子培養(yǎng)基包含酵母浸粉、牛肉浸膏、胰蛋白胨、葡萄糖、可溶性淀粉、氯化鈉、三水合乙酸鈉和L-半胱氨酸鹽酸鹽；

其中，以所述種子培養(yǎng)基的總重量為基準(zhǔn)，所述酵母浸粉的含量為0.2-0.4重量%，所述牛肉浸膏的含量為0.5-1.5重量%，所述胰蛋白胨的含量為0.5-1.5重量%，所述葡萄糖的含量為0.3-0.8重量%，所述可溶性淀粉的含量為0.02-0.2重量%，所述氯化鈉的含量為0.3-0.8重量%，所述三水合乙酸鈉的含量為0.1-0.5重量%，所述L-半胱氨酸鹽酸鹽的含量為0.01-0.02重量%；

其中，所述種子培養(yǎng)基的pH為6-7；

其中，所述流化床的工作條件使得所得丁酸梭菌固體菌劑中水分含量≤10%。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述活化的條件包括：溫度為34-38℃，厭氧培養(yǎng)。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述擴(kuò)培的條件包括：溫度為34-38℃，厭氧培養(yǎng)。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述發(fā)酵的條件包括：溫度為35-39℃，厭氧培養(yǎng)。

5.根據(jù)權(quán)利要求1-4中任意一項(xiàng)所述的方法制備得到的丁酸梭菌固體菌劑。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的丁酸梭菌固體菌劑，其中，所述丁酸梭菌固體菌劑的參數(shù)包括：水分含量≤10%，活菌數(shù)≥1*10¹¹cfu/g丁酸梭菌固體菌劑，芽孢率≥95%。