[發(fā)明專利]氫分子的應(yīng)用及其緩解炎癥性腸病小鼠模型的構(gòu)建方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010430080.X
• 申請(qǐng)日: 2020-05-20
• 公開（公告）號(hào): CN111700906A
• 公開（公告）日: 2020-09-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 葛麗;亓杰;阮真真;孫雪強(qiáng);劉淑曼;李鵬飛;陳浩;王詩陽;徐新榮;邵波
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 山東第一醫(yī)科大學(xué)(山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院)
• 主分類號(hào): A61K33/00
• 分類號(hào): A61K33/00;A61P1/00;A61P1/04;A61K49/00
• 代理公司: 濟(jì)南誠智商標(biāo)專利事務(wù)所有限公司 37105
• 代理人: 劉莎莎

本發(fā)明涉及外源性氫分子(Molecular hydrogen,H₂)干預(yù)改善腸道菌群及其代謝以促進(jìn)腸黏膜穩(wěn)態(tài)恢復(fù)的氫醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域。具體講，本發(fā)明提供了一種氫分子在制備促進(jìn)腸道短鏈脂肪酸生成藥物中的應(yīng)用，以及氫分子緩解炎癥性腸病小鼠模型的構(gòu)建方法，其構(gòu)建方法為：全程灌胃加腹腔注射富氫生理鹽水方式給予外源性H₂，2.5%葡聚糖酸鈉自由飲水7天至小鼠急性UC，H₂干預(yù)組增加建模前HRS預(yù)處理健康動(dòng)物10天，HRS共處理17天，建模結(jié)束。本發(fā)明通過增加對(duì)健康動(dòng)物HRS預(yù)處理，尋找到了H₂有效發(fā)揮緩解UC癥狀的時(shí)間窗；并發(fā)現(xiàn)H₂靶向腸道微生物群，通過促進(jìn)腸道SCFAs生成以維持腸道黏膜免疫穩(wěn)態(tài)的生物學(xué)效應(yīng)，以緩解急性潰瘍性結(jié)腸炎。本模型體系的建立可為今后氫醫(yī)學(xué)的臨床研究和UC新治療策略的開發(fā)提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及外源性氫分子(H₂)干預(yù)改善腸道菌群及其代謝以促進(jìn)腸黏膜穩(wěn)態(tài)恢復(fù)的氫醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域。具體講，提供了氫分子的應(yīng)用及其緩解炎癥性腸病小鼠模型的構(gòu)建方法。

背景技術(shù)

炎癥性腸病(inflammatory bowel disease, IBD)是一類以腸道黏膜潰瘍?yōu)橹饕∽兲攸c(diǎn)的腸道慢性復(fù)發(fā)性炎癥性疾病，主要包括克羅恩病(Crohn's Disease, CD)和潰瘍性結(jié)腸炎(Ulcerative Colitis, UC)，其是由遺傳因素、環(huán)境因素、腸道菌群和宿主免疫系統(tǒng)等的復(fù)雜相互作用導(dǎo)致的異常免疫反應(yīng)和慢性腸道炎癥，但確切發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明，治療困難，已嚴(yán)重影響到患者的身心健康和生活質(zhì)量。目前，民生經(jīng)濟(jì)發(fā)展與飲食西式化融入使亞洲國家IBD患者的增加趨勢(shì)明顯，IBD的臨床與基礎(chǔ)研究已成為亞洲消化病學(xué)界的研究熱點(diǎn)。對(duì)其發(fā)病機(jī)制和新型臨床輔助治療劑的研究將為改善患者生活質(zhì)量提供幫助。

已有文獻(xiàn)報(bào)道，飲用富氫水(hydrogen rich water, HRW)或腹腔注射富氫生理鹽水(hydrogen rich saline, HRS)能夠緩解IBD小鼠/大鼠腸黏膜損傷，但使H₂發(fā)揮顯著作用的動(dòng)物模型研究體系尚不完善，其緩解IBD的作用機(jī)制也不清楚。其一，上述文獻(xiàn)報(bào)道均是在建模期間或建模后進(jìn)行H₂處理，上述文獻(xiàn)認(rèn)為H₂通過其抗氧化、抗炎特性緩解UC炎癥損傷，但具體作用機(jī)制是否只是如此，并沒有更深層次的研究報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容

為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供了一種氫分子的應(yīng)用及其緩解炎癥性腸病小鼠模型的構(gòu)建方法。本發(fā)明通過增加對(duì)健康動(dòng)物HRS預(yù)處理，尋找到了H₂有效發(fā)揮緩解UC癥狀的時(shí)間窗，為開發(fā)H₂臨床輔助治療新策略提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)；本發(fā)明的第二目的是基于此模型，研究該模型下小鼠的腸道特征，構(gòu)建一種H₂醫(yī)學(xué)效應(yīng)研究體系，從而發(fā)現(xiàn)H₂作用的新機(jī)制，即H₂ 可以促進(jìn)腸道短鏈脂肪酸(short chain fatty acids, SCFAs)生成。

本發(fā)明采用的技術(shù)方案是：一種氫分子的應(yīng)用，氫分子在制備促進(jìn)腸道短鏈脂肪酸生成藥物中的應(yīng)用。

進(jìn)一步的，所述氫分子載體形式為納米氣泡富氫生理鹽水。

進(jìn)一步的，所述富氫生理鹽水的制備方法為利用多功能氫分子發(fā)生器將純H₂溶解于生理鹽水中20min，即得H₂飽和的富氫生理鹽水。

進(jìn)一步的，所述富氫生理鹽水中H₂濃度不低于3.0ppm。

一種氫分子緩解炎癥性腸病小鼠模型的構(gòu)建方法，包含有以下步驟：

（1）制備納米氣泡富氫生理鹽水；