[發明專利]一種小麥粒長相關SNP標記及其應用有效
| 申請號： | 202010428817.4 | 申請日： | 2020-05-18 |
| 公開（公告）號： | CN111518933B | 公開（公告）日： | 2022-03-11 |
| 發明（設計）人： | 曹佳佳;張海萍;徐康樂;常成;盧杰;馬傳喜 | 申請（專利權）人： | 安徽農業大學 |
| 主分類號： | C12Q1/689 | 分類號： | C12Q1/689;C12N15/11 |
| 代理公司： | 安徽匯樸律師事務所 34116 | 代理人： | 劉海涵 |
| 地址： | 230036 *** | 國省代碼： | 安徽;34 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 麥粒 相關 snp 標記 及其 應用 | ||
1.一種與小麥粒長相關的SNP標記，其特征在于，所述SNP標記位于參考基因組IWGSCRefSeq v2.0版本的小麥7A染色體450729566bp處，且這一SNP標記的核苷酸為G/C。
2.一種鑒定小麥粒長的方法，其特征在于，該方法包括以下步驟：
步驟1、提取待測小麥基因組DNA
步驟2、設計跨權利要求1所述SNP標記的PCR引物對SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3，利用SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所述的序列對步驟1獲得的小麥基因組DNA進行PCR擴增，獲得擴增產物；
步驟3、利用限制性內切酶RsaI對所述擴增產物進行酶切，獲得酶切產物；
步驟4、當步驟2獲得的擴增產物可被酶切時，其對應的小麥為長粒小麥，若步驟2獲得的擴增產物不可被酶切時，其對應的小麥為短粒小麥。
3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，步驟2的PCR擴增體系配置：1μL 2.5mMdNTP，0.25μL 10μM引物，1μL 10×EasyTaq Buffer，0.5U EasyTaq，100ng DNA模板，用雙蒸餾水補齊到10μL；
PCR擴增程序：94℃預變性5min；94℃變性30s；62℃開始每循環降落0.3℃退火30；72℃延伸30s，40個循環；72℃延伸8min。
4.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，步驟3中酶切體系為：5μL PCR產物，1μL10×CutSmart Buffer，0.5U RsaI，用雙蒸餾水補齊到10μL。
5.根據權利要求2-4任一所述的方法，其特征在于，所述小麥品種具體為京411或紅芒春21。
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