[發明專利]具有神經細胞保護活性的透骨草木脂素制備方法及其應用

在審

• 申請號: 202010428654.X
• 申請日: 2020-05-20
• 公開（公告）號: CN111671780A
• 公開（公告）日: 2020-09-18
• 發明（設計）人: 劉學貴;張立新;高品一;李丹琦;岳丹丹
• 申請（專利權）人: 沈陽化工大學
• 主分類號: A61K36/185
• 分類號: A61K36/185;A61P25/00
• 代理公司: 沈陽技聯專利代理有限公司 21205
• 代理人: 張志剛

具有神經細胞保護活性的透骨草木脂素制備方法及其應用，涉及一種天然藥物制備方法及其應用，本發明透骨草木脂素的提取、分離和純化等工藝的簡要過程：首先從干燥的透骨草全草中得到醇提浸膏，經水分散后，依次用石油醚、乙酸乙酯萃取，萃取液經減壓濃縮后得到石油醚萃取物，乙酸乙酯萃取物，水層萃取物。取乙酸乙酯萃取物，經硅膠柱色譜、MCI柱色譜、開放ODS柱色譜、凝膠柱色譜以及高效液相色譜分離純化后，收集得到4個木脂素化合物1?4。上述木脂素均具神經細胞保護活性，其中化合物2和4相比較陽性對照藥維生素E具有顯著的神經細胞保護活性。本發明為透骨草木脂素治療神經退行性疾病的藥品開發奠定了基礎。

技術領域

本發明涉及一種天然藥物制備方法及其應用，特別是涉及一種具有神經細胞保護活性的透骨草木脂素制備方法及其應用。

背景技術

透骨草（Phryma leptostachya L.）也被稱為藥曲草，蠅毒草，為透骨草科透骨草屬多年生草本植物。透骨草味道苦澀，喜陰，適應性較強，移植易成活，生長迅速，廣泛種植在我國東北、華北及長江流域各地。透骨草各個部位皆可入藥，可以殺死菜青蟲，有抗炎，殺菌作用，適用一般瘡癬腫毒。透骨草也可以治療風濕疼痛，腫毒初起，風濕性關節炎等癥狀。

透骨草木脂素是從透骨草全草中提取得到的木脂素，已經被證明具有抗氧化、抗腫瘤、抗炎的作用，而且對機體的不良反應非常小。因此，深度開發透骨草中木脂素資源，并系統研究其結構和藥理活性，對于透骨草的深加工及其在醫藥等領域的廣泛應用，具有重大的經濟和社會效益。

發明內容

本發明的目的在于提供一種具有神經細胞保護活性的透骨草木脂素制備方法及其應用，本發明采用色譜分離法對透骨草全草分離得到透骨草木脂素，并對其神經細胞保護活性進行研究，結果表明透骨草木脂素具有一定的神經細胞保護活性。

本發明的目的是通過以下技術方案實現的：

具有神經細胞保護活性的透骨草木脂素制備方法，所述方法包括以下制備過程：

取干燥的透骨草全草，用乙醇-水溶液回流提取2～6次，每次4～10 h，合并提取液減壓濃縮后得到總浸膏。所得浸膏經水分散后，依次用石油醚、乙酸乙酯萃取，萃取液經減壓濃縮后得到石油醚萃取物，乙酸乙酯萃取物，水層萃取物。取乙酸乙酯萃取物，經硅膠柱色譜、MCI柱色譜、開放ODS柱色譜、凝膠柱色譜以及高效液相色譜分離純化后，得到4個木脂素化合物1-4。

所述的具有神經細胞保護活性的透骨草木脂素制備方法，所述取乙酸乙酯萃取物，經硅膠柱色譜分離，以二氯甲烷-甲醇（100:1 - 0:1）系統梯度洗脫，得到6個流分（Fr.1- Fr.6）。

所述的具有神經細胞保護活性的透骨草木脂素制備方法，所述其中Fr.4餾分經過硅膠減壓柱色譜、MCI柱色譜、開放ODS柱色譜、凝膠柱色譜以及高效液相色譜分離和純化得到化合物1、化合物2、化合物3、化合物4。

具有神經細胞保護活性的透骨草木脂素應用，所述透骨草木脂素，使用H₂O₂誘導的SH-SY5Y細胞作為生物活性測定的模型，并使用MTT測定方法評估透骨草木脂素的神經細胞保護活性；透骨草木脂素適宜于治療神經退行性疾病的藥品開發。

所述的具有神經細胞保護活性的透骨草木脂素應用，所述神經細胞保護活性比較表明，與對照藥維生素E相比，化合物2和4具有顯著的神經細胞保護活性。

所述的具有神經細胞保護活性的透骨草木脂素應用，所述當化合物2和化合物4的濃度達到50 μmol/L時，SH-SY5Y細胞的存活率分別為81.68%和93.19%。

本發明的優點與效果是：