[發明專利]一種以亞甲基藍為指示劑高靈敏檢測鉛離子的電化學適配體傳感器的構建與應用

在審

• 申請號: 202010428050.5
• 申請日: 2020-05-20
• 公開（公告）號: CN111562298A
• 公開（公告）日: 2020-08-21
• 發明（設計）人: 孫偉;謝慧;牛燕燕;張曉萍;陳碧嬌;程輝;邵波;閆麗君
• 申請（專利權）人: 海南師范大學
• 主分類號: G01N27/327
• 分類號: G01N27/327;G01N27/48;G01N21/78;G01N27/447;G01N27/38
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1.一種以亞甲基藍為指示劑高靈敏檢測鉛離子的電化學適配體傳感器的構建與應用方法，其特征在于，首先在基底電極（CILE）表面采用涂布法修飾一層鉑負載碳納米纖維復合材料（Pt@CNF），再采用電沉積法修飾金納米顆粒（AuNPs），利用Au-S鍵將捕獲探針（Capture Probe）自組裝在電極表面，以硫代乙醇酸（TGA）作為未結合活性位點的封閉劑，進一步通過DNA雙鏈雜交形式固定適配體探針（Aptamer Probe），并以亞甲基藍（MB）作為電化學指示劑制備了用于高靈敏檢測鉛離子的電化學適配體傳感器（AP/CP/Au/Pt@CNF/CILE），通過檢測適配體傳感器在不同濃度鉛離子溶液中孵化前后引起的MB電信號變化情況來制定工作曲線，實現對鉛離子樣品的定量分析。

2.根據權利要求1所述的一種以亞甲基藍為指示劑高靈敏檢測鉛離子的電化學適配體傳感器的構建與應用方法，其特征在于，所使用的捕獲探針序列為5’-CAC CCA CCC AC-C₆SH-3’，濃度為1.0 μmol/L，自組裝時間為12 h，溫度條件為4 °C。

3.根據權利要求1所述的一種以亞甲基藍為指示劑高靈敏檢測鉛離子的電化學適配體傳感器的構建與應用方法，其特征在于，所使用的硫代乙醇酸濃度為1.0 mmol/L，反應時間為30 min，溫度條件為室溫25 °C。

4.根據權利要求1所述的一種以亞甲基藍為指示劑高靈敏檢測鉛離子的電化學適配體傳感器的構建與應用方法，其特征在于，所使用的適配體探針序列為5’-GGG TGG GTG GGTGGG T-3’，濃度為1.0 μmol/L，雜交時間為1 h，溫度條件為室溫25 °C。

5.根據權利要求1所述的一種以亞甲基藍為指示劑高靈敏檢測鉛離子的電化學適配體傳感器的構建與應用方法，其特征在于，所選用的亞甲基藍濃度為0.2 mmol/L，浸泡時間為15 min，溫度條件為室溫25 °C。

6.根據權利要求1所述的一種以亞甲基藍為指示劑高靈敏檢測鉛離子的電化學適配體傳感器的構建與應用方法，其特征在于，電化學適配體傳感器在不同濃度鉛離子溶液中的孵化時間為40 min，溫度條件為室溫25 °C。

7.根據權利要求1所述的一種以亞甲基藍為指示劑高靈敏檢測鉛離子的電化學適配體傳感器的構建與應用方法，其特征在于，所選用的緩沖液為Tris-HCl，pH條件為7.8，濃度為0.1 mol/L。

8.根據權利要求1所述的一種以亞甲基藍為指示劑高靈敏檢測鉛離子的電化學適配體傳感器的構建與應用方法，其特征在于，通過示差脈沖伏安法以亞甲基藍為電化學指示劑對鉛離子進行定量檢測。