[發明專利]半枝蓮聚糖、提取方法及在制備抗SARS-CoV-2藥物中的應用

有效

• 申請號: 202010427257.0
• 申請日: 2020-05-19
• 公開（公告）號: CN111560080B
• 公開（公告）日: 2022-03-22
• 發明（設計）人: 丁侃;陳霞;孫成新;姚曉東;王秋雨;張艷麗
• 申請（專利權）人: 愛禮康生物醫藥（蘇州）有限公司
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00;A61K31/715;A61P31/14;A61P11/00
• 代理公司: 重慶強大凱創專利代理事務所(普通合伙) 50217
• 代理人: 萬國松

本方案公開了醫藥技術領域的半枝蓮聚糖、提取方法及在制備抗SARS?CoV?2藥物中的應用。制備半枝蓮聚糖時，包括以下步驟：一、將干燥的半枝蓮植株粉碎得到半枝蓮粉末；二、向半枝蓮粉末中加入去離子水，調節其pH值至4.6～4.8得到混合液，混合液加熱至50～60℃，然后加入纖維素酶、果膠酶和木瓜蛋白酶酶解35～45min，得到酶解溶液；三、將酶解溶液加熱至100℃～110℃并保持1～1.2h，然后冷卻過濾得到過濾液；四、將過濾液加熱濃縮得到濃縮液，然后通過流動水對濃縮液透析處理2～3d得到透析液；五、將透析液加熱濃縮，離心，去除沉淀后，加入上清液5～6倍體積的95％乙醇，靜置過夜醇沉得到醇沉液；六、對醇沉液進行離心處理得到沉淀，沉淀用無水乙醇和丙酮交替洗滌3～5次得到半枝蓮聚糖。

技術領域

本發明屬于醫藥技術領域，特別涉及半枝蓮聚糖、提取方法及在制備抗SARS-CoV-2藥物中的應用。

背景技術

2019新型冠狀病毒，又稱SARS-CoV-2。人體感染SARS-CoV-2后的常見體征有呼吸道癥狀、發熱、咳嗽、氣促和呼吸困難等。在較嚴重病例中，感染可導致肺炎、嚴重急性呼吸綜合征、腎衰竭，甚至死亡。目前對于新型冠狀病毒所致疾病沒有特異治療方法。

本次新冠肺炎病毒SARS-Cov-2屬于典型的冠狀病毒2-5，病毒粒子直徑約60～220nm。病毒粒子外包著脂肪膜，膜表面有三種糖蛋白：刺突糖蛋白(S，Spike Protein)、小包膜糖蛋白(E，Envelope Protein)和膜糖蛋白(M，Membrane Protein)。其中，Spike蛋白是與靶細胞受體結合的位點，與靶細胞膜上的ACE2蛋白結合，具有結合細胞作用，是主要的抗原位點6-8。

S蛋白含有S1亞基和S2亞基，S1主要包含有受體結合區(receptor bindingdomain，RBD)，負責識別細胞的受體。S2含有膜融合過程所需的基本元件，包括一個內在的膜融合肽(fusion peptide)，兩個7肽重復序列(heptad repeat，HR)，一個富含芳香族氨基酸的膜臨近區域(membrane proximal external region，MPER)，以及跨膜區(transmembrane，TM)。

半枝蓮，又名并頭草、韓信草、牙刷草等，是唇形科黃芩屬多年生草本植物。半枝蓮全草入藥，具有清熱解毒、活血祛瘀、消腫止痛、抗癌等功能。性寒味酸，全草含多糖、甾族化合物、鞣質、維生素、微量元素及氨基酸等成分；有涼血解毒，散瘀止痛，消腫和清熱利濕之功效。但當前未見任何關于半枝蓮聚糖可用于抗SARS-CoV-2的報道。

發明內容

本發明意在提供半枝蓮聚糖、提取方法及在制備抗SARS-CoV-2藥物中的應用，以擴充抗SARS-CoV-2藥物的來源。

本方案中的半枝蓮聚糖的提取方法，包括以下步驟：

步驟一、將干燥的半枝蓮植株粉碎得到半枝蓮粉末；

步驟二、向半枝蓮粉末中加入其12～15倍質量的去離子水，調節其pH值至4.6～4.8得到混合液，混合液加熱至50～60℃，然后分別加入纖維素酶、果膠酶和木瓜蛋白酶酶解35～45min，得到酶解溶液；其中，纖維素酶、果膠酶和木瓜蛋白酶的添加量分別為半枝蓮粉末質量的0.5％～0.8％、0.5％～1％、0.4％～0.7％；

步驟三、將酶解溶液加熱至100℃～110℃并保持1～1.2h，然后冷卻過濾得到過濾液；

步驟四、將過濾液加熱濃縮得到濃縮液，然后通過流動水對濃縮液透析處理2～3d得到透析液；

步驟五、將透析液加熱濃縮，離心，去除沉淀后，加入上清液5～6倍體積的95％乙醇，靜置過夜醇沉得到醇沉液；

步驟六、對醇沉液進行離心處理得到沉淀，沉淀用無水乙醇和丙酮交替洗滌3～5次，洗滌后的沉淀即為半枝蓮聚糖。