[發明專利]一種磷脂酶D1(PLD1)基因及其抑制劑在治療非酒精性脂肪肝病中的應用

在審

• 申請號: 202010425923.7
• 申請日: 2020-05-19
• 公開（公告）號: CN113679840A
• 公開（公告）日: 2021-11-23
• 發明（設計）人: 楊文卓;劉瑞麟;楊丹;蔣杰
• 申請（專利權）人: 上海市同濟醫院
• 主分類號: A61K45/00
• 分類號: A61K45/00;A61P1/16
• 代理公司: 上海卓陽知識產權代理事務所(普通合伙) 31262
• 代理人: 曹翠娟

本發明涉及磷脂酶D1(PLD1)基因及其抑制劑在治療非酒精性脂肪肝病中的應用。本發明首次發現PLD1基因可作為NAFLD治療靶點，PLD1特異性抑制劑可通過多種機制改善NAFLD。研究結果表明：PLD1抑制劑可改善肝功能和抑制血清學血脂水平，抑制肝細胞脂滴形成指標SREBP1表達和脂肪酸β氧化指標FASN表達，抑制肝細胞炎癥反應指標IL?1β和TNF?α表達，同時也改善了NASH的病理組織學。本發明首次發現了磷脂酶D1可作為非酒精性脂肪肝的治療靶點，PLD1抑制劑可作為治療NAFLD，特別是NASH的新藥進行研發，解決臨床缺乏NASH治療藥物的現狀，有望很好地應用于臨床，研發及應用前景好。

技術領域

本發明涉及基因功能與應用技術領域，具體地說，是一種磷脂酶D1(PLD1)基因及其抑制劑在治療非酒精性脂肪肝病中的應用。

背景技術

隨著肥胖及其相關代謝綜合征全球化的流行趨勢，非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fattyliverdisease,NAFLD)的發病率也不斷升高，本病在西方國家較為常見，成人患病率為10％～30％，在肥胖人群中發病率高達57％～74％。但近些年來我國的患病率已與歐美國家相接近，明顯有超過病毒性肝炎及酒精性肝病的趨勢。綜合國內外的流行病學研究數據，NAFLD已經成為全球范圍內的公共健康問題。NAFLD是一種以彌漫性肝細胞大泡性脂肪變性為病理特征的臨床綜合征，并且無過量飲酒史和其它明確的損肝因素，是代謝綜合征在肝臟主要表現形式，可由單純性脂肪肝發展為脂肪性肝炎，以及相關的肝硬化、肝細胞癌等。除此之外，NAFLD還可以影響其他慢性肝病的進展，是高血壓、糖尿病、心腦血管疾病的高危因素之一，嚴重危害了人類健康，同時該病已成為嚴重影響我國人民身心健康和國民經濟的主要疾病之一。過去數十年，人類對非酒精性脂肪性肝病的認識已經有了很大提高，但仍然以生活方式干預為主要防治手段，在藥物治療，特別是NASH藥物治療方面沒有突破性進展，因此尋找有效的治療手段仍然是迫切需要的工作。

磷脂不僅是生物膜的骨架成分，而且能通過水解后產生的產物來參與多種生理過程以及環境刺激引起的細胞反應。磷脂酶(Phospholipase)是催化磷脂水解的關鍵酶，可以分為5類，即磷脂酶A1(PLA1)、磷脂酶A2(PLA2)、磷脂酶B(PLB)、磷脂酶C(PLC)和磷脂酶D(PLD)。磷脂酶D(PLD)，即磷脂酰膽堿磷脂水解酶，屬催化磷酸二酯鍵水解和堿基交換的一類酶的總稱，是一類重要的細胞信號轉導酶類，PLD催化水解的底物是細胞信號轉導過程中重要的第二信使分子，參與多種生理和環境刺激引起的細胞反應，調控細胞的生長、增殖和運動等；同時PLD可調節細胞脂質代謝、囊泡運輸、細胞骨架蛋白重排、細胞遷移、及膠原合成，并參與細胞衰老的調控。

生理生化學等基礎研究已證實PLD的生理功能是參與脂質代謝與糖代謝調控，PLD作為胰島素的下游信號分子參與細胞對胰島素的應答。有研究表明，PLD1激活可促進葡萄糖轉運體4(Glut4)的轉運與葡萄糖的攝取，通過siRNA干擾選擇性沉默PLD1表達可導致胰島素抵抗的發生，而肝細胞的胰島素抵抗可造成血脂異常，并增加動脈粥樣硬化與代謝綜合征的風險。另外亦有研究表明，糖基化磷脂酰肌醇特異性磷脂酶D(GPI-PLD)表達水平與血清膽固醇、甘油三酯及載脂蛋白A-I水平變化呈正相關，被認為在糖尿病和胰島素抵抗時對甘油三酯的代謝起到直接調控作用。Hughes等的研究表明高血糖與胰島素均可使GPI-PLD的表達或其活性升高。具有胰島功能亢進和胰島素抵抗表現的ob/ob小鼠，其胰島GPI-PLD表達也顯著升高。PLD在哺乳動物組織細胞廣泛分布，而PLD1是已經克隆出的一個PLD亞型。但目前為止，尚沒有其它研究團隊闡明PLD1與非酒精性脂肪肝(NAFL)和非酒精性脂肪性肝炎(NASH)關系。

針對臨床上尚無治療NAFLD，特別是NASH的有效藥物，本發明旨在明確PLD1基因表達與NAFLD肝臟脂肪沉積、炎癥和纖維化間的關系，揭示PLD1可作為NAFLD治療靶點，PLD1特異性抑制劑有改善NAFLD作用。

關于本發明一種磷脂酶D1(PLD1)基因及其抑制劑在治療非酒精性脂肪肝病中的應用目前還未見報道。

發明內容