[發明專利]一種痛風性關節炎診斷試劑盒及其應用

有效

• 申請號: 202010425589.5
• 申請日: 2020-05-19
• 公開（公告）號: CN111751457B
• 公開（公告）日: 2023-05-12
• 發明（設計）人: 李長貴;王燦;劉振;楊中舟
• 申請（專利權）人: 青島大學附屬醫院
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/72
• 代理公司: 北京思格頌知識產權代理有限公司 11635
• 代理人: 蔡進進;李中奎

本發明涉及一種痛風性關節炎診斷試劑盒。該試劑盒包括有脂質提取液、流動相A和流動相B，其中，所述脂質提取液為甲基叔丁基醚:甲醇＝3:1的混合液1mL；所述流動相A為乙腈：水＝3：2的溶液2.5mL，該溶液含0.1％甲酸和10mmol/L的甲酸銨；所述流動相B為乙腈：異丙醇＝1：9的溶液3.5mL，該溶液含0.1％甲酸和10mmol/L的甲酸銨。使用該試劑盒，可以實現對痛風性關節炎的輔助診斷。

技術領域

本發明涉及一種痛風性關節炎診斷試劑盒及其應用。

背景技術

血清中尿酸的檢測，是輔助臨床痛風診斷的有效方式。然而，由于其無法有效的區分高尿酸與痛風人群，無法直接應用在痛風的診斷。所以，臨床上需要開發有效的檢測技術。痛風發病期間，體內的脂質發生大規模的紊亂，而脂質為機體的第二高含量的物質。因此，系統性地檢測體內脂質的含量并確定生物標志物，成為潛在的診斷手段。

急性痛風性關節炎是一種由關節組織與關節內的單鈉鹽尿酸鹽晶體引起的急性無菌性炎癥，并導致殘疾和生活質量嚴重下降。痛風的現代治療正在向疾病早期的積極治療轉變。目前痛風的診斷主要根據臨床表現，且血清學檢測限于SUA的測定。盡管高尿酸血癥是痛風的一個特征，但在痛風發作期間，SUA可能會降至正常水平。實際上，高尿酸血癥患者中只有10％發生痛風。診斷痛風的金標準是使用偏光顯微鏡在關節液中發現MSU晶體，但因為該操作為有創性檢查，且對診斷不清的感染性關節炎執行此操作時會導致感染擴散，限制了臨床的應用。同時，由于痛風不僅會引起關節炎癥，長期的痛風還可成為高血壓、高血脂、心血管疾病及腦血管疾病的重要危險因素，因此對痛風具有高度特異性的診斷方法，早期診斷、早期干預是臨床迫切需要的。

發明內容

本發明的目的在于提供用于鑒定痛風性關節炎生物標記物的試劑盒及其應用。

為至少部分地實現本發明的目的，本發明提供如下技術方案。

作為本發明實施例的一個方面，涉及痛風性關節炎生物標記物，所述生物標記物為血清經過高效液相色譜/質譜聯用，測定的甘油三酯、神經酰胺、磷脂酰乙醇胺與花生四烯酸代謝物的相對含量。

作為本發明實施例的一個方面，涉及痛風性關節炎診斷試劑盒，所述試劑盒包括有脂質提取液、流動相A和流動相B，其中，所述脂質提取液為甲基叔丁基醚：甲醇=3:1的混合液1mL；所述流動相A為乙腈：水=3：2的溶液2.5ml，該溶液含0.1%甲酸和10?mmol/L的甲酸銨；所述流動相B為乙腈：異丙醇=1：9的溶液3.5ml，該溶液含0.1%甲酸和10?mmol/L的甲酸銨。

本發明實施例還涉及上述試劑盒在血清中甘油三酯、神經酰胺、磷脂酰乙醇胺和/或花生四烯酸相對含量測定中的應用，以及上述試劑盒在制備痛風診斷試劑中的應用。

作為本發明實施例的一個方面，涉及一種痛風性關節炎診斷試劑盒，所述試劑盒包括按3:1比例配置的甲基叔丁基醚和甲醇；按4:9:2的比例配置的乙腈、異丙醇和水，以及適量甲酸和適量甲酸銨。

本發明實施例還涉及上述試劑盒在血清中甘油三酯、神經酰胺、磷脂酰乙醇胺和/或花生四烯酸相對含量測定中的應用，以及上述試劑盒在制備痛風診斷試劑中的應用。

作為本發明實施例的一個方面，涉及使用上述試劑盒測定血清中甘油三酯、神經酰胺、磷脂酰乙醇胺和/或花生四烯酸相對含量的方法，包括如下步驟：

(1)血液樣本渦旋混勻10s左右，4℃，3000rpm離心5min；

(2)取血清50uL加入到離心管中，加入1mL脂質提取液；

(3)渦旋2min，20-40KHz超聲5min,加入500uL水；

(4)渦旋1min，12000rpm，4℃條件下離心10min；

(5)吸取上清液500uL，4℃濃縮；