[發(fā)明專利]用于擴增細胞群的方法、試劑盒及裝置

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010423347.2
• 申請日: 2015-04-16
• 公開（公告）號: CN111961647A
• 公開（公告）日: 2020-11-20
• 發(fā)明（設(shè)計）人: L·杰梅羅特;C·施滕貝爾
• 申請（專利權(quán)）人: 朱諾治療有限公司
• 主分類號: C12N5/0783
• 分類號: C12N5/0783;C12N5/0781;C12M3/00;C12M1/00
• 代理公司: 北京瑞恒信達知識產(chǎn)權(quán)代理事務所(普通合伙) 11382
• 代理人: 張偉

1.一種擴增細胞群的體外方法，其包括使包含細胞群的樣品與多聚化劑接觸，

其中，所述多聚化劑具有可逆固定(結(jié)合)于其上的、向細胞提供初級激活信號的第一試劑；

其中，所述多聚化劑包含至少一個結(jié)合位點Z1用于第一試劑的可逆結(jié)合，

其中，所述第一試劑包含至少一個結(jié)合配偶體C1，其中所述結(jié)合配偶體C1能夠與多聚化劑的結(jié)合位點Z1可逆結(jié)合，其中所述第一試劑通過結(jié)合配偶體C1和結(jié)合位點Z1之間形成的可逆鍵與多聚化劑相結(jié)合，以及

其中，所述第一試劑與細胞表面的受體分子結(jié)合，由此向細胞提供初級激活信號從而激活細胞。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述多聚化劑具有可逆固定(結(jié)合)于其上的、刺激細胞表面輔助分子的第二試劑，

其中，所述第二試劑包含結(jié)合配偶體C2，其中所述結(jié)合配偶體C2能夠與多聚化劑的結(jié)合位點Z2可逆結(jié)合，其中所述第二試劑通過結(jié)合配偶體C2與結(jié)合位點Z2之間形成的可逆鍵與多聚化劑相結(jié)合，

其中，所述第二試劑與細胞表面輔助分子結(jié)合，由此刺激已激活的細胞。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述細胞群是淋巴細胞群。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述淋巴細胞群是B細胞群、T細胞群、天然殺傷細胞群或其混合物。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于，所述T細胞群是抗原特異性T細胞群、輔助T細胞群、細胞毒性T細胞、記憶T細胞、調(diào)節(jié)性T細胞群或天然殺傷T細胞群。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，所述第一試劑包括MHC I:肽復合物，或者，其特征在于，所述第一試劑刺激T細胞中的TCR/CD3復合物相關(guān)信號。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，所述第一試劑是與CD3特異性結(jié)合的結(jié)合劑。

8.根據(jù)權(quán)利要求6或7所述的方法，其特征在于，所述T細胞上的輔助分子是CD28或者CD137。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于，所述與輔助分子的結(jié)合第二試劑是與CD28或CD137特異性結(jié)合的結(jié)合劑，或者，其特征在于，所述第二試劑是兩種均能與CD28或CD137特異性結(jié)合的不同結(jié)合劑的混合物。

10.根據(jù)權(quán)利要求7至9中任一項所述的方法，其特征在于，

所述與CD3特異性結(jié)合的第一試劑選自抗CD3抗體、抗CD3抗體的二價抗體片段、抗CD3抗體的單價抗體片段和具有抗體樣結(jié)合特性的蛋白質(zhì)CD3結(jié)合分子，和/或，其特征在于，

所述與CD28特異性結(jié)合的第二試劑選自抗CD28抗體、抗CD28抗體的二價抗體片段、抗CD28抗體的單價抗體片段、具有抗體樣結(jié)合特性的蛋白質(zhì)CD28結(jié)合分子、抗CD137抗體、抗CD137抗體的二價抗體片段、抗CD137抗體的單價抗體片段、具有抗體樣結(jié)合特性的蛋白質(zhì)CD137結(jié)合分子、4-1BB配體及其任意混合物。

11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的方法，其特征在于，所述二價抗體片段是(Fab)₂’片段或二價單鏈Fv片段。

12.根據(jù)權(quán)利要求10所述的方法，其特征在于，所述單價抗體片段選自Fab片段、Fv片段和單鏈Fv片段(scFv)。

13.根據(jù)權(quán)利要求10所述的方法，其特征在于，所述具有抗體樣結(jié)合特性的蛋白質(zhì)CD3、CD28或CD137結(jié)合分子選自適體、基于脂質(zhì)運載蛋白家族多肽的突變蛋白、glubody、基于錨蛋白支架的蛋白質(zhì)、基于晶體支架的蛋白質(zhì)、adnectin和親和多聚體(avimer)。