[發明專利]一種角膜微口袋手術實驗中微丸的制備方法及應用在審
| 申請號: | 202010418577.X | 申請日: | 2020-05-18 |
| 公開(公告)號: | CN111518746A | 公開(公告)日: | 2020-08-11 |
| 發明(設計)人: | 毛仁芳 | 申請(專利權)人: | 南通大學 |
| 主分類號: | C12N5/071 | 分類號: | C12N5/071 |
| 代理公司: | 北京科家知識產權代理事務所(普通合伙) 11427 | 代理人: | 徐思波 |
| 地址: | 226019 *** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
| 權利要求書: | 查看更多 | 說明書: | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 角膜 口袋 手術 實驗 中微丸 制備 方法 應用 | ||
1.一種角膜微口袋手術實驗中微丸的制備方法,其特征在于,包括以下過程:
(1)、生長因子的配置和Matrigel的分裝過程
(1-1)、VEGF的配置:VEGFA粉末溶解于無菌水中,儲存濃度為100ug/ml,置于-80℃保存;
(1-2)、Heparin的配置Heparin用無菌水溶解,儲存濃度為25ku/ml,置于-20℃保存;
(1-3)、將Matrigel在冰盒上操作分裝,1ml/管,置于-80℃冰箱保存;
(2)、Matrigel的準備過程
(2-1)、根據實驗需要,將Matrigel從-80℃冰箱取出放置到4℃過夜,使其充分溶解為液態;
(2-2)、第二天,將Matrigel 與DMEM進行1:1混合均勻,然后,將VEGFA和Heparin加入到混合物中,充分混勻;
(2-3)、VEGFA用量為100ng/微丸,Heparin的濃度為30U/ml;
(3)、 微丸的制作過程
(3-1)、準備好無菌10cm dish放入無菌操作臺上,調節10ul移液器至8ul,吸取Matrigel 配置好的混合液8ul,滴在無菌培養皿中,形成一個圓滴;然后將皿蓋蓋好放入,做好標識,放置37度培養箱孵育1-2小時;
(3-2)、孵育后,放置到-20℃過夜,待手術時用無菌刀片刮下微丸。
2.根據權利要求1所述的一種角膜微口袋手術實驗中微丸的制備方法,其特征在于,所述步驟(3)所制作的微丸可保存在-20°C冰箱中3個月,待使用時將10cm dish中的微丸刮下即可。
3.根據權利要求1所述的一種角膜微口袋手術實驗中微丸的制備方法,其特征在于,所述步驟(2)中的混合物始終保持在冰上,且無菌操作。
4.角膜微口袋手術實驗中微丸在血管生成和淋巴管生成研究中的應用,其特征在于,在小鼠實驗研究中,小鼠麻醉狀態下,在解剖顯微鏡下,將微丸植入到角膜中,植入后的第5-7天,用裂隙燈顯微鏡進行拍照觀察血管生成情況,可觀察到小鼠角膜的血管生成情況。
該專利技術資料僅供研究查看技術是否侵權等信息,商用須獲得專利權人授權。該專利全部權利屬于南通大學,未經南通大學許可,擅自商用是侵權行為。如果您想購買此專利、獲得商業授權和技術合作,請聯系【客服】
本文鏈接:http://www.szxzyx.cn/pat/books/202010418577.X/1.html,轉載請聲明來源鉆瓜專利網。
- 上一篇:一種中藥切片設備
- 下一篇:一種具有自動填料和自動調節風量大小功能的鍋爐





