[發(fā)明專利]一種抑制原癌基因c-myc表達(dá)的反義RNA MYC-AS1及其應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010415735.6
• 申請(qǐng)日: 2020-05-16
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN111534517A
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-08-14
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 崔恒宓;胡序明;豆春峰;陳緒靖
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 揚(yáng)州大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N15/113
• 分類號(hào): C12N15/113;C12N15/11;C12N15/85;A61K31/7088;A61P35/00
• 代理公司: 揚(yáng)州蘇中專利事務(wù)所(普通合伙) 32222
• 代理人: 許必元

本發(fā)明涉及表觀遺傳學(xué)、腫瘤學(xué)和新型抗腫瘤藥物研究領(lǐng)域，提供了一種抑制原癌基因c?myc表達(dá)的反義RNA MYC?AS1及其應(yīng)用。該RNA來(lái)源于人8號(hào)染色體基因組中原癌基因c?myc衍生的反義長(zhǎng)鏈非編碼RNA，采用RACE和PCR克隆技術(shù)鑒定后，將其命名為MYC?AS1，其cDNA 具有SEQ ID NO：1 所示的核苷酸序列。本發(fā)明通過(guò)構(gòu)建MYC?AS1過(guò)表達(dá)載體質(zhì)粒，體外實(shí)驗(yàn)顯示MYC?AS1可以抑制原癌基因c?myc表達(dá)和腫瘤細(xì)胞增殖。本研究發(fā)明不僅提供了抑制原癌基因c?myc的新手段，也為抗腫瘤藥物的研究提供了新思路。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種抑制原癌基因c-myc表達(dá)的反義RNA MYC-AS1及其應(yīng)用,屬于表觀遺傳學(xué)、腫瘤學(xué)和新型抗腫瘤藥物研究領(lǐng)域。

背景技術(shù)

腫瘤的發(fā)生歸因于多種內(nèi)在因素，如遺傳突變，表觀遺傳變異以及代謝異常等。普遍認(rèn)為，主要有兩類基因與腫瘤的發(fā)生密切相關(guān)，即癌基因和抑癌基因。正常細(xì)胞中，癌基因和抑癌基因表達(dá)保持一定的平衡比例。遺傳和表觀遺傳突變均能引起癌基因和抑癌基因表達(dá)異常，促使正常細(xì)胞轉(zhuǎn)化成癌細(xì)胞。

雖然已知遺傳突變與癌癥發(fā)生有關(guān)，但越來(lái)越多的證據(jù)表明，表觀遺傳異常也與癌癥的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。抑癌基因表觀遺傳沉默的分子機(jī)制已被充分闡明。癌基因在癌細(xì)胞中的異常激活，除了報(bào)道與遺傳突變有關(guān)外，至今未有關(guān)于表觀遺傳機(jī)制的報(bào)道。抑癌基因表觀遺傳沉默的發(fā)現(xiàn)，導(dǎo)致表觀遺傳藥物引入臨床治療。如5-氮-2’-脫氧胞苷(5-Aza-2’-deoxycytidine，AZA)及其類似物5-阿扎胞苷(5-Azacytidine)作為DNA甲基化抑制劑用于白血病的臨床治療以及一些實(shí)體腫瘤的臨床治療研究。然而DNA甲基化抑制劑的應(yīng)用也引起了一些困惑。由于該表觀遺傳藥物的非特異性，AZA在激活抑癌基因的同時(shí)，是否也會(huì)激活癌基因或癌相關(guān)基因。因此，進(jìn)一步揭示表觀遺傳藥物DNA甲基化抑制劑抑癌機(jī)制是癌癥研究的另一個(gè)重要科學(xué)問(wèn)題。

對(duì)反義RNA的研究中，我們意外發(fā)現(xiàn)不僅抑癌基因存在反義RNA，許多癌基因也存在反義RNA。在癌細(xì)胞中，這些反義RNA處于沉默(Silencing)狀態(tài)，DNA甲基化抑制劑AZA可明顯激活這些反義RNA表達(dá)，且反義RNA與對(duì)應(yīng)的正義癌基因呈顯著負(fù)相關(guān)關(guān)系。因此，癌細(xì)胞中的一些癌基因可能受其反義RNA的調(diào)控，這些癌基因的激活可能歸因于它們反義RNA的表觀遺傳沉默，致使癌基因去抑制(Derepression)，從而導(dǎo)致癌基因的激活。這種全新的癌基因的致癌表觀遺傳學(xué)機(jī)制，對(duì)基礎(chǔ)研究和臨床醫(yī)學(xué)研究均具重大意義。癌基因衍生的反義RNA在抑制腫瘤細(xì)胞增殖中的作用及其表觀遺傳學(xué)機(jī)制將逐漸被闡明，有望成為新型的抗腫瘤藥物。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種能抑制原癌基因c-myc表達(dá)的反義RNA序列以及作為新型抗腫瘤藥物的應(yīng)用前景，具體為一種抑制原癌基因c-myc表達(dá)的反義RNA MYC-AS1及其應(yīng)用。

本發(fā)明的目的是這樣實(shí)現(xiàn)的，一種抑制原癌基因c-myc表達(dá)的反義RNA MYC-AS1，其特征在于,MYC-AS1的cDNA具有SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列；

SEQ ID NO：1為：