[發(fā)明專利]用于鑒別中國馬鹿和赤鹿的SNP標(biāo)記及檢測引物對、試劑盒和應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010415488.X
• 申請日: 2020-05-16
• 公開（公告）號: CN111378767B
• 公開（公告）日: 2023-09-12
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 邢秀梅;朱燕敏;王天驕;劉華淼;董依萌
• 申請（專利權(quán)）人: 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院特產(chǎn)研究所
• 主分類號: C12Q1/6888
• 分類號: C12Q1/6888;C12N15/11
• 代理公司: 北京中濟(jì)緯天專利代理有限公司 11429
• 代理人: 劉楊

本發(fā)明提供一種用于鑒別中國馬鹿和赤鹿的SNP標(biāo)記及檢測引物對、試劑盒和應(yīng)用。本發(fā)明提供了準(zhǔn)確鑒別中國馬鹿和赤鹿的5個特異性SNP位點(diǎn)，及一對鑒別引物，并建立了準(zhǔn)確可靠的檢測方法。本發(fā)明方法具有很好的特異性、穩(wěn)定性和高靈敏度，檢測限為0.25ng/ul。本發(fā)明首次將分子標(biāo)記的技術(shù)應(yīng)用于鑒別中國馬鹿和赤鹿，有效避免了因外觀形態(tài)難以區(qū)分造成的經(jīng)濟(jì)損失。用本發(fā)明方法檢測了市場上100個鹿茸及副產(chǎn)品，準(zhǔn)確率為100％。本發(fā)明簡化了鑒別程序，操作簡單，易于掌握，推廣性強(qiáng)。彌補(bǔ)了本領(lǐng)域目前尚無精準(zhǔn)鑒別中國馬鹿與赤鹿產(chǎn)品的檢測技術(shù)的不足，實(shí)現(xiàn)對中國馬鹿與赤鹿產(chǎn)品的精準(zhǔn)鑒別。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及用于鑒別中國馬鹿和赤鹿的SNP標(biāo)記及檢測引物、試劑盒和應(yīng)用，屬于分子生物學(xué)檢測技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

馬鹿(Cervus?elaphus)屬偶蹄目、鹿科、鹿屬，全世界有22個亞種，主要分為東部馬鹿和西部馬鹿兩大類群。中國分布8個亞種(西藏亞種、東北亞種、阿拉善亞種、阿爾泰亞種、四川亞種、天山亞種、塔里木亞種、甘肅亞種)。目前我國在亞種基礎(chǔ)上已培育了3個培育品種(塔河馬鹿、清原馬鹿、天山馬鹿)、1個地方品種(東北馬鹿)、5個飼養(yǎng)種群(天山種群、阿爾泰種群、甘肅種群、阿拉善種群和青海種群)。

鹿茸等產(chǎn)品應(yīng)用于人類的醫(yī)療保健已有兩千多年的歷史。鹿肉細(xì)嫩，味道鮮美，具有高蛋白、低脂肪、易消化的特點(diǎn)，且有一定的食用價值。中國歷代本草和現(xiàn)代藥典都記載梅花鹿和馬鹿為地道鹿產(chǎn)品，其它鹿種產(chǎn)品視為替代品、習(xí)用品，甚至偽品。隨著需求的日益增加，市場出現(xiàn)的鹿產(chǎn)品多種多樣，良莠不齊，經(jīng)常出現(xiàn)以馴鹿、赤鹿產(chǎn)品被當(dāng)作梅花鹿、馬鹿產(chǎn)品出售，以次充好，甚至有出現(xiàn)其他非鹿科動物(如牛、豬、羊等)產(chǎn)品以假亂真，被當(dāng)作鹿產(chǎn)品來銷售。嚴(yán)重擾亂了鹿茸及副產(chǎn)品的市場秩序，進(jìn)而阻礙了鹿產(chǎn)業(yè)的深度健康發(fā)展。市場上出現(xiàn)鹿茸及副產(chǎn)品的替代品原因眾多，其中最主要的是新西蘭每年近千噸赤鹿產(chǎn)品涌入中國市場，以假亂真，以次充好的現(xiàn)象嚴(yán)重，從而使得消費(fèi)者遭受經(jīng)濟(jì)損失，阻礙我國養(yǎng)鹿業(yè)健康發(fā)展。

目前對鹿產(chǎn)品鑒別的方法大致可分為四類：性狀鑒別、顯微鑒別、理化鑒別和分子鑒別。性狀鑒別和顯微鑒別最為簡單方便，但其準(zhǔn)確性也最低。理化鑒別方法較之性狀鑒別和顯微鑒別，準(zhǔn)確性較高，主要有光譜鑒別、免疫學(xué)方法、醋酸纖維素膜電泳等。分子鑒別方法是目前研究的熱點(diǎn)，具有準(zhǔn)確性高、反應(yīng)靈敏、操作簡單等優(yōu)點(diǎn)，且分子標(biāo)記不受環(huán)境因素影響，因而被廣泛應(yīng)用于動物產(chǎn)品鑒別及種源鑒定。

但是，目前我們?nèi)狈τ行цb別赤鹿和中國馬鹿產(chǎn)品的檢測技術(shù)，赤鹿和中國馬鹿產(chǎn)品的精準(zhǔn)鑒別依然是本領(lǐng)域的難題。因此，急需開展中國馬鹿和赤鹿亞種間精準(zhǔn)鑒別的研究工作，實(shí)現(xiàn)鹿產(chǎn)品溯源，保護(hù)我國馬鹿資源。

發(fā)明內(nèi)容

針對上述現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供用于鑒別中國馬鹿和赤鹿的SNP標(biāo)記及檢測引物、試劑盒和應(yīng)用。本發(fā)明獲得了可以用于精準(zhǔn)鑒別中國馬鹿與赤鹿產(chǎn)品的SNP標(biāo)記、鑒定方法和鑒定試劑盒，實(shí)現(xiàn)了馬鹿茸及副產(chǎn)品的精準(zhǔn)鑒別，為馬鹿產(chǎn)品精準(zhǔn)檢測標(biāo)準(zhǔn)的制定提供直接依據(jù)。

本發(fā)明提供一種用于鑒別中國馬鹿和赤鹿的SNP標(biāo)記，所述SNP標(biāo)記包括5個SNP標(biāo)記位點(diǎn)：S-1、S-2、S-3、S-4、S-5；位點(diǎn)信息如表1所示：

表1、本發(fā)明用于鑒別中國馬鹿和赤鹿的SNP標(biāo)記位點(diǎn)