[發(fā)明專利]一種培養(yǎng)基的基層物質(zhì)、其制備方法、培養(yǎng)基及其應(yīng)用

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• 申請?zhí)枺?/td>: 202010414203.0
• 申請日: 2020-05-15
• 公開（公告）號: CN111411070A
• 公開（公告）日: 2020-07-14
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李平;曹雪霞;石冰濤;何輝;肖凡凱
• 申請（專利權(quán)）人: 河南醫(yī)學(xué)高等專科學(xué)校
• 主分類號: C12N5/00
• 分類號: C12N5/00
• 代理公司: 北京鼎德寶專利代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 11823
• 代理人: 牟炳彥

本發(fā)明適用于細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域，提供了一種培養(yǎng)基的基層物質(zhì)、其制備方法、培養(yǎng)基及其應(yīng)用，該基層物質(zhì)的制備方法包括以下步驟：對氧載體進(jìn)行消毒殺菌和曝氧處理后，再添加水凝膠溶液進(jìn)行覆蓋處理，得到所述基層物質(zhì)；所述氧載體為全氟碳化合物、人工紅細(xì)胞和修飾的血紅蛋白溶液中的一種或多種。本發(fā)明實施例提供的基層物質(zhì)，含有氧載體以及覆蓋有水凝膠，其可以添加到培養(yǎng)基中進(jìn)行持續(xù)供氧，從而可以大大提高培養(yǎng)基對動物等細(xì)胞的培養(yǎng)效率。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種培養(yǎng)基的基層物質(zhì)、其制備方法、培養(yǎng)基及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

全氟三丁胺（PFTBA）是一種無毒的，具有高氧溶解度的全氟化合物，其對氧氣的溶解度約為水的25倍，為血液的3倍。基于此優(yōu)點，PFTBA被大量應(yīng)用于改善各種組織工程支架的早期氧供問題，用于解決對骨損傷后恢復(fù)時期體內(nèi)組織間的供氧問題，取得良好效果。但是，目前PFTBA沒有解決體外對細(xì)胞的一般培養(yǎng)問題，而且較難控制氧濃度。

另外，現(xiàn)有技術(shù)中公開有用于體外細(xì)胞培養(yǎng)的氧載體，其包括氟碳化合物、乙醇、液態(tài)烷烴和環(huán)醚等組分，其雖然可以用于體外細(xì)胞培養(yǎng)，但是其采用乙醇作為溶劑，會對細(xì)胞培養(yǎng)造成傷害，而且，該氧載體用于體外細(xì)胞培養(yǎng)還存在培養(yǎng)效率較為低下等問題。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明實施例的目的在于提供一種培養(yǎng)基的基層物質(zhì)的制備方法，旨在解決背景技術(shù)中提出的問題。

本發(fā)明實施例是這樣實現(xiàn)的，一種培養(yǎng)基的基層物質(zhì)的制備方法，包括以下步驟：

對氧載體進(jìn)行消毒殺菌和曝氧處理后，再添加水凝膠溶液進(jìn)行覆蓋處理，得到所述基層物質(zhì)；所述氧載體為全氟碳化合物、人工紅細(xì)胞和修飾的血紅蛋白溶液中的一種或多種。

作為本發(fā)明實施例的一個優(yōu)選方案，所述水凝膠溶液包括所有能形成水凝膠的材料，具體的，其中的水凝膠包括但不限于瓊脂糖、膠原蛋白、藻酸鹽、透明質(zhì)酸、甲基丙烯酸酯明膠、聚乙二醇和纖維素中的一種或多種。

作為本發(fā)明實施例的另一個優(yōu)選方案，所述水凝膠溶液中的水凝膠的質(zhì)量濃度為2%~5%。

作為本發(fā)明實施例的另一個優(yōu)選方案，所述全氟碳化合物包括但不限于全氟十氫萘、全氟三丁胺、全氟三丙胺、全氟-N-(4-甲基環(huán)己基)哌啶和全氟溴烷中的一種或多種。

作為本發(fā)明實施例的另一個優(yōu)選方案，所述修飾的血紅蛋白溶液為有機物交聯(lián)修飾的血紅蛋白溶液；所述有機物包括但不限于棉子糖、聚乙二醇、辛二酸二琥珀酰亞胺酯和戊二醛中的一種。

作為本發(fā)明實施例的另一個優(yōu)選方案，所述步驟中，曝氧處理的氣體為氧氣和二氧化碳的混合氣體，曝氧處理的氣壓為0.08~0.12MPa。

作為本發(fā)明實施例的另一個優(yōu)選方案，所述氧氣和二氧化碳的體積比為(93~97):(3~7)。

本發(fā)明實施例的另一目的在于一種采用上述制備方法制得的基層物質(zhì)。

本發(fā)明實施例的另一目的在于一種培養(yǎng)基，其包括上述的基層物質(zhì)。

本發(fā)明實施例的另一目的在于一種上述培養(yǎng)基在動物細(xì)胞培養(yǎng)中的應(yīng)用。

本發(fā)明實施例提供的一種培養(yǎng)基的基層物質(zhì)，含有氧載體以及覆蓋有水凝膠，其可以添加到培養(yǎng)基中進(jìn)行持續(xù)供氧，從而可以大大提高培養(yǎng)基對動物等細(xì)胞的培養(yǎng)效率。

附圖說明

圖1為氧載體培養(yǎng)組和對照組的細(xì)胞活力對比結(jié)果圖。

圖2為氧載體培養(yǎng)組和對照組的軟瓊脂糖克隆形成實驗對比圖。

具體實施方式