[發明專利]一種豬痢疾霧化疫苗及其制備方法

在審

• 申請號: 202010411769.8
• 申請日: 2020-05-15
• 公開（公告）號: CN111544582A
• 公開（公告）日: 2020-08-18
• 發明（設計）人: 倪博;袁朗
• 申請（專利權）人: 江蘇省農業科學院
• 主分類號: A61K39/02
• 分類號: A61K39/02;A61K9/12;A61K39/39;A61P31/04
• 代理公司: 蕪湖眾匯知識產權代理事務所(普通合伙) 34128
• 代理人: 曹宏筠

1.一種豬痢疾霧化疫苗，包括：豬痢疾短螺旋體的至少兩種基因多樣性菌株的細菌的組合物，其特征在于：所述基因多樣性是通過不同克隆復合體篩選來自豬痢疾短螺旋體的至少兩種基因多樣性菌株而獲得的，且其中至少一個菌株屬于克隆復合體I或克隆復合體Ⅱ或克隆復合體Ⅲ。

2.根據權利要求1所述一種豬痢疾霧化疫苗，其特征在于：所述細菌的組合物為滅活細菌，且細菌的組合物的濃度為108至109總細菌數/mL。

3.根據權利要求1所述一種豬痢疾霧化疫苗，其特征在于：所述基因多樣性菌株在總檢測菌株的比例為至少1％。

4.根據權利要求1所述一種豬痢疾霧化疫苗，其特征在于：所述基因多樣性菌株的細菌的組合物內含有佐劑，且佐劑為鋁鹽和礦物油，所述佐劑與基因多樣性菌株的細菌的組合物的比例為9：1。

5.根據權利要求1所述一種豬痢疾霧化疫苗，其特征在于：所述基因多樣性菌株的細菌的組合物中至少有一個菌株屬于克隆復合體I或克隆復合體Ⅱ或克隆復合體Ⅲ。

6.根據權利要求1所述一種豬痢疾霧化疫苗的制備方法，其特征在于：所述制備方法包括以下步驟：

步驟1：豬痢疾短螺旋體的采集：將健康易感染的家豬接種豬痢疾短螺旋體，無菌采集接種后24～72h瀕死或剛死亡的且具有典型病理變化的腸道組織經檢驗合格后，保存作為生產用；

步驟2：基因多樣性菌株的細菌的組合物懸浮液的制備：取生產用無菌條件下稱量采毒的肝臟組織，加適量的pH7.2磷酸鹽緩沖液或生理鹽水進行搗碎或研磨、過濾后得組織懸液，按組織懸液總量的0.1％～0.5％加入甲醛溶液，充分混合后裝入無菌容器中，密封后置37℃環境下滅活48h,得到基因多樣性菌株的細菌的組合物懸浮液；

步驟3：豬痢疾霧化疫苗的配制：在步驟2所得的基因多樣性菌株的細菌的組合物懸浮液中添加佐劑，佐劑成分為鋁鹽和礦物油，按照佐劑與基因多樣性菌株的細菌的組合物的比例為9：1進行配苗，將基因多樣性菌株的細菌的組合物懸浮液與佐劑進行充分攪拌混合，既得豬痢疾疫苗溶液。

步驟4：取步驟3所得的豬痢疾疫苗溶液，將該溶液加入醫用下呼吸道沉積型噴霧器中，將噴霧器連接空氣壓縮泵，調節壓力為0.2MPa后進行噴霧，制備豬痢疾霧化疫苗。

7.根據權利要求6所述一種豬痢疾霧化疫苗的制備方法，其特征在于：所述步驟4所得豬痢疾霧化疫苗通過腸胃外進行給藥，豬在斷奶后2周進行疫苗接種且豬在首次疫苗接種后兩周進行再次疫苗接種。

8.根據權利要求6所述一種豬痢疾霧化疫苗的制備方法，其特征在于：所述豬痢疾霧化疫苗向豬給藥的每劑總細菌數在10⁸至10⁹個細菌之間。

9.根據權利要求6所述一種豬痢疾霧化疫苗的制備方法，其特征在于：所述步驟2中，使用甲醛溶液對收獲的細胞培養物進行滅活處理；并對滅活后的基因多樣性菌株的細菌的組合物懸浮液進行滅活檢驗：滅活液接種細胞后無細胞病變。