[發明專利]一種用于修復土壤污染的環保生物菌劑的制備方法

在審

• 申請號: 202010411367.8
• 申請日: 2019-09-26
• 公開（公告）號: CN111704906A
• 公開（公告）日: 2020-09-25
• 發明（設計）人: 吳昊
• 申請（專利權）人: 吳昊
• 主分類號: C09K17/14
• 分類號: C09K17/14;C09K101/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種用于修復土壤污染的環保生物菌劑的制備方法，其特征在于：包括以下制備步驟：

（1）將膽固醇與吡啶按質量比1:25混合與燒杯中，并向燒杯中加入膽固醇質量0.8倍的丁二酸酐，于溫度為60℃，轉速為300r/min的條件下攪拌反應6h后，將燒杯內物料于溫度為80℃，轉速為120r/min，壓力為600kPa的條件下旋蒸濃縮5h，得粗產品，將粗產品于質量分數為18%乙醇溶液中重結晶，得膽固醇-丁二酸酯，將膽固醇-丁二酸酯與三氯甲烷按質量比1:80混合于燒瓶中，并向燒瓶中加入膽固醇-丁二酸酯質量2倍的氯化亞砜溶液，于溫度為70℃，轉速為300r/min的條件下攪拌反應4h后，將燒瓶內物料于溫度為80℃，轉速為120r/min，壓力為600kPa的條件下旋蒸濃縮4h，得膽固醇-丁二酰氯混合液，將膽固醇-丁二酰氯混合液與葡聚糖按質量比1:3混合于三口燒瓶中，并向三口燒瓶中加入膽固醇-丁二酰氯質量200倍的二甲基亞砜和膽固醇-丁二酰氯質量5倍的乙二胺，向三口燒瓶中以30mL/min的速率通入氮氣，于溫度為80℃，轉速為280r/min的條件下拌反應6h后，將三口燒瓶內物料于水中透析4h；

（2）將步驟（1）透析所得物質與聚乳酸按質量比1：1混合，并向步驟（1）透析所得物質與聚乳酸的混合物中加入聚乳酸質量5倍的二甲基亞砜，于溫度為60℃，轉速為300r/min的條件下攪拌反應6h后，得聚乳酸混合物，將聚乳酸混合物于水中透析4h后，得透析產物，將透析產物與質量分數為6%的氯化釓溶液按質量比1：10混合，于室溫條件下透析4h后，過濾，得改性聚乳酸，將改性聚乳酸與質量分數為5%的1-乙基-（3-二甲基氨基丙基）碳二亞胺鹽酸鹽溶液按質量比1：8混合，并向改性聚乳酸與1-乙基-（3-二甲基氨基丙基）碳二亞胺鹽酸鹽溶液的混合物中加入改性聚乳酸質量0.3倍的N-羥基琥珀酰亞胺，于室溫條件下混合浸泡6h后，過濾，得濾餅，將濾餅于溫度為60℃的條件下干燥3h；

（3）將殼聚糖與質量分數為2%的檸檬酸溶液按質量比1：15混合，并向殼聚糖與檸檬酸溶液的混合物中加入殼聚糖質量0.4倍的瓊脂糖，于溫度為45℃，轉速為300r/min的條件下攪拌溶解50min后，得殼聚糖混合溶液，將殼聚糖混合溶液與步驟（2）所得物質按質量比8：1混合，于溫度為38℃，轉速為400r/min的條件下攪拌反應4h后，冷凍干燥，得坯料，將坯料與細菌培養液按質量比1：8混合于培養皿中，并向培養皿中加入坯料質量0.2倍的木醋桿菌和坯料質量0.02倍的木霉，于室溫條件下混合培養3天后，過濾，得濾渣，將濾渣于溫度為32℃的條件下干燥24h；

（4）對步驟（3）所得物質進行指標分析。

2.根據權利要求1所述的一種用于修復土壤污染的環保生物菌劑的制備方法，其特征在于：步驟（3）所述細菌培養液為將葡萄糖與水按質量比1:30混合，并加入葡萄糖質量0.2倍的蛋白胨，葡萄糖質量0.3倍的酵母粉，葡萄糖質量0.2倍的磷酸二氫鈉和葡萄糖質量0.03倍的檸檬酸，攪拌混合，得細菌培養液。