[發明專利]一種篩選殺滅南方根結線蟲植物的方法

有效

• 申請號: 202010410445.2
• 申請日: 2020-05-15
• 公開（公告）號: CN111579720B
• 公開（公告）日: 2022-07-26
• 發明（設計）人: 何玉池;羅祥波;劉香麗;陶宇;黃寶生;張亞春;陳思
• 申請（專利權）人: 湖北大學
• 主分類號: G01N33/00
• 分類號: G01N33/00
• 代理公司: 武漢河山金堂專利事務所(普通合伙) 42212
• 代理人: 胡清堂

本發明涉及植物源農藥技術領域，具體涉及一種篩選殺滅南方根結線蟲植物的方法，該方法采用燕麥真滑刃線蟲替代南方根結線蟲作為試驗材料，可以達到預測殺線植物對南方根結線蟲的殺滅效果。燕麥真滑刃線蟲在生長周期和培養要求上遠遠比南方根結線蟲的要求低，更利于殺線植物的進一步篩選，加快線蟲生物防治的試驗進程。

技術領域

本發明涉及植物源農藥技術領域，具體涉及一種篩選殺滅南方根結線蟲植物的方法。

背景技術

植物寄生線蟲(Plant-parasitic nematodes)是一類專性植物寄生病原線蟲，對農業經濟作物的生產造成巨大的經濟損失，每年由植物寄生線蟲在世界范圍內造成的經濟損失約1500億美元。根結線蟲被認為是危害最嚴重的植物病原線蟲，能夠在包括小麥、番茄、黃瓜等在內的3000多種植物體內寄生，其破壞寄主細胞的正常代謝功能而產生病變，導致作物減產10％-20％，嚴重時可達30％-40％，甚至絕產。

隨著人類環保意識的提高，生物防治成為線蟲防治的主導方式，許多植物提取物對植物線蟲的殺線蟲潛力已得到廣泛評價，其中菊科植物和豆科植物中具有殺線活性的種類居多。雖然目前已報道有300多種殺線蟲植物，但自然界植物資源極為豐富，我國有植物3萬余種，資源豐富，可作為植物源農藥用的植物很多?！吨袊卸局参铩芬粫腥胗卸局参?300多種，其中許多種類具有殺蟲活性，因此充分調查和挖掘出更多更有效的新殺線蟲植物種類將成為未來發展的方向。

在常規的篩選殺線植物試驗過程中，需要采用南方根結線蟲，其原因為：南方根結線蟲是農業生產上危害最嚴重、破壞性最強的根結線蟲，據統計，有51％的受害作物的根結線蟲種類是南方根結線蟲，是四種根結線蟲中分布比例最高的。但是南方根結線蟲存在以下問題：①南方根結線蟲生長周期長，②南方根結線蟲只能寄生在植物根部繁殖，且生長環境較為苛刻，易受外界環境影響，試驗操作流程比較繁瑣，③南方根結線蟲二齡幼蟲在體外活動性較弱，遇到逆境時蟲體常呈現假死狀態，待適應逆境后，假死狀態的線蟲會恢復常態。導致殺線植物的篩選過程進展緩慢。

發明內容

有鑒于此，本發明提供了一種篩選殺滅南方根結線蟲植物的方法，該方法采用食真菌類線蟲燕麥真滑刃線蟲代替南方根結線蟲對供試植物進行初篩，加速了試驗進程，可在較短時間內篩選出更多殺線植物。

為了實現上述目的，本發明的技術方案具體如下：

一種篩選殺滅南方根結線蟲植物的方法，采用燕麥真滑刃線蟲替代南方根結線蟲作為供試蟲體，具體包括以下步驟：

S1、將殺線蟲植物清洗干凈，烘干，粉碎過篩，加入溶劑提取，用紗布過濾得到植物提取液，將其稀釋成一系列濃度。

S2、將孵化好的二齡燕麥真滑刃線蟲與蒸餾水混合均勻，定量注入細胞培養板中，再將步驟S1制備的系列植物提取液也等量注入有線蟲的孔中，以等量蒸餾水做空白對照；置于26℃，光照周期為16:8，濕度為70％，恒溫培養，觀察記錄線蟲存活數，并計算校正死亡率；

S3、根據步驟S2的結果預判確定植物提取液對南方根結線蟲的殺蟲效果；

所述校正死亡率計算公式為：

進一步地，在上述技術方案中，步驟S1所述提取溶劑為蒸餾水。

進一步地，在上述技術方案中，所述植物提取物的制備方法為：稱取植物粉末，加入適量蒸餾水，放置搖床12-24h，轉速180-200r/min，溫度32-38℃，過濾即得。