[發(fā)明專利]一種RBP4作為肌少癥治療靶點(diǎn)的檢測(cè)方法在審
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 202010409002.1 | 申請(qǐng)日: | 2020-05-14 |
| 公開(公告)號(hào): | CN111748615A | 公開(公告)日: | 2020-10-09 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 高偉;魯翔;王麗;趙璨;張康振;王玥 | 申請(qǐng)(專利權(quán))人: | 南京醫(yī)科大學(xué)附屬逸夫醫(yī)院 |
| 主分類號(hào): | C12Q1/6883 | 分類號(hào): | C12Q1/6883;G01N33/68;C12N15/11 |
| 代理公司: | 北京同輝知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11357 | 代理人: | 楊敬 |
| 地址: | 211198 江蘇*** | 國(guó)省代碼: | 江蘇;32 |
| 權(quán)利要求書: | 查看更多 | 說(shuō)明書: | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 rbp4 作為 肌少癥 治療 檢測(cè) 方法 | ||
本發(fā)明公開一種RBP4作為肌少癥治療靶點(diǎn)的檢測(cè)方法,檢測(cè)包括RBP4在肌少癥患者的腓腸肌組織中表達(dá)變化,腺病毒沉默小鼠骨骼肌RBP4表達(dá)后小鼠運(yùn)動(dòng)耐量的改變,和RBP4在小鼠C2C12成肌細(xì)胞分化過程的表達(dá)變化。本發(fā)明檢測(cè)方法通過肌少癥患者腓腸肌組織中提取蛋白樣品檢測(cè)RBP4的表達(dá)水平;利用腺病毒沉默小鼠腓腸肌RBP4基因表達(dá),測(cè)量小鼠運(yùn)動(dòng)耐量;以及從分化不同程度的C2C12成肌細(xì)胞中提取RNA檢測(cè)RBP4的表達(dá)。操作簡(jiǎn)單、快速、穩(wěn)定性好;為肌少癥患者的臨床診治提供強(qiáng)有力的理論支持,具有臨床意義和推廣價(jià)值。
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及一種檢測(cè)方法,具體是一種RBP4作為肌少癥治療靶點(diǎn)的檢測(cè)方法。
背景技術(shù)
骨骼肌是人體最有活力和可塑性的組織之一,約占總體重的40%,并包含所有身體蛋白質(zhì)的50-75%。骨骼肌萎縮發(fā)生于多種情況下,比如疾病狀態(tài)(心力衰竭、癌癥、糖尿病、敗血癥等)、去神經(jīng)性損害、禁食、老年化和藥物治療等。骨骼肌萎縮主要是由于肌肉蛋白質(zhì)過度分解所致,而蛋白質(zhì)分解通常伴隨蛋白質(zhì)合成減少,表現(xiàn)為骨骼肌質(zhì)量下降和功能障礙,從而導(dǎo)致患者生活質(zhì)量下降,引起發(fā)病率和死亡率增加。因此,尋找新的有效的肌肉因子作為肌肉萎縮治療的干預(yù)靶點(diǎn)具有重要意義。
視黃醇結(jié)合蛋白4(RBP4),是循環(huán)血液中視黃醇(維生素A醇)的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白,它主要在肝臟中合成釋放到外循環(huán),小部分來(lái)自于脂肪細(xì)胞。近年來(lái)研究表明RBP4通過炎癥途徑誘導(dǎo)胰島素抵抗和心血管疾病,參與體內(nèi)多器官的代謝調(diào)節(jié)。最近我們發(fā)現(xiàn),RBP4在肌少癥患者的腓腸肌組織中表達(dá)下降;腺病毒沉默小鼠肌肉組織中RBP4表達(dá)后,小鼠的運(yùn)動(dòng)耐量降低;進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)RBP4表達(dá)水平隨小鼠C2C12成肌細(xì)胞分化而逐漸升高。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種RBP4作為肌少癥治療靶點(diǎn)的檢測(cè)方法,通過肌少癥患者腓腸肌組織中提取蛋白樣品檢測(cè)RBP4的表達(dá)水平;利用腺病毒沉默小鼠腓腸肌RBP4基因表達(dá),測(cè)量小鼠運(yùn)動(dòng)耐量;以及從分化不同程度的C2C12成肌細(xì)胞中提取RNA檢測(cè)RBP4的表達(dá)。操作簡(jiǎn)單、快速、穩(wěn)定性好;為肌少癥患者的臨床診治提供強(qiáng)有力的理論支持,具有臨床意義和推廣價(jià)值。
本發(fā)明的目的可以通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn):
一種RBP4作為肌少癥治療靶點(diǎn)的檢測(cè)方法,檢測(cè)包括RBP4在肌少癥患者的腓腸肌組織中表達(dá)變化,腺病毒沉默小鼠骨骼肌RBP4表達(dá)后小鼠運(yùn)動(dòng)耐量的改變,和RBP4在小鼠C2C12成肌細(xì)胞分化過程的表達(dá)變化。
進(jìn)一步的,所述RBP4在肌少癥患者的腓腸肌組織中表達(dá)變化包括WesternBlot檢測(cè)試劑。
進(jìn)一步的,所述WesternBlot檢測(cè)試劑包括RBP4特異性抗體和內(nèi)參照GAPDH特異性抗體。
進(jìn)一步的,所述RBP4特異性抗體為:ab10919。
進(jìn)一步的,其特征在于,所述內(nèi)參照GAPDH特異性抗體為60004-1-Ig。
進(jìn)一步的,所述腺病毒沉默小鼠骨骼肌RBP4表達(dá)后小鼠運(yùn)動(dòng)耐量的改變包括小鼠運(yùn)動(dòng)距離和運(yùn)動(dòng)時(shí)間測(cè)量。
進(jìn)一步的,所述腺病毒沉默小鼠骨骼肌RBP4表達(dá)包括RBP4腺病毒序列。
進(jìn)一步的,所述RBP4在小鼠C2C12成肌細(xì)胞分化過程的表達(dá)變化包括實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)試劑。
進(jìn)一步的,所述實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)試劑包括RBP4的特異性引物和內(nèi)參照GAPDH的特異性引物。
所述RBP4的特異性引物包括RBP4的特異性引物正向引物和RBP4的特異性引物反向引物。
進(jìn)一步的,所述內(nèi)參照GAPDH的特異性引物包括GADH特異性引物正向引物和GAPDH特異性引物反向引物。
本發(fā)明的有益效果:
該專利技術(shù)資料僅供研究查看技術(shù)是否侵權(quán)等信息,商用須獲得專利權(quán)人授權(quán)。該專利全部權(quán)利屬于南京醫(yī)科大學(xué)附屬逸夫醫(yī)院,未經(jīng)南京醫(yī)科大學(xué)附屬逸夫醫(yī)院許可,擅自商用是侵權(quán)行為。如果您想購(gòu)買此專利、獲得商業(yè)授權(quán)和技術(shù)合作,請(qǐng)聯(lián)系【客服】
本文鏈接:http://www.szxzyx.cn/pat/books/202010409002.1/2.html,轉(zhuǎn)載請(qǐng)聲明來(lái)源鉆瓜專利網(wǎng)。
- 化學(xué)發(fā)光磁酶免疫法定量檢測(cè)RBP4試劑盒
- 豬視黃醇結(jié)合蛋白基因(RBP4)真核表達(dá)載體的構(gòu)建
- RBP4雜交瘤細(xì)胞株及其制備方法和用途
- 豬RBP4蛋白體外表達(dá)及其抗體制備
- 血清RBP4蛋白作為肝癌病人血清標(biāo)志物及其應(yīng)用
- 用于敲除RBP4基因的sgRNA、RBP4基因缺失細(xì)胞株的構(gòu)建方法及應(yīng)用
- 一種提高豬圓環(huán)病毒增殖的方法
- 一種RBP4作為肌少癥治療靶點(diǎn)的檢測(cè)方法
- RBP4蛋白或其編碼基因在調(diào)控成肌細(xì)胞分化和融合中的應(yīng)用
- 一種重組視黃醇結(jié)合蛋白4及其制備方法和應(yīng)用
- 地拉羅司在制備治療肌少癥疾病藥物中的用途
- 預(yù)防和緩解2型糖尿病患者肌少癥的蛋白組件及制備方法
- 用于治療肌少癥的機(jī)械刺激套件及自適應(yīng)囊套裝置
- 一種基于生物電阻抗法的肌少癥風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估系統(tǒng)
- 用于治療肌少癥的機(jī)械刺激套件及自適應(yīng)囊套裝置
- 診斷肌少癥的腸道菌群及其應(yīng)用
- 腸道菌群在肌少癥中的應(yīng)用
- 基于血清肌酐和胱抑素C預(yù)測(cè)肌力下降篩查肌少癥的方法
- 一種基于家用體成分儀和智能設(shè)備的肌少癥數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)
- 基于CT影像肌少癥評(píng)估的圖像處理方法和裝置





