[發(fā)明專利]一種提高斑馬魚(yú)產(chǎn)卵量的方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010402414.2
• 申請(qǐng)日: 2020-05-13
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN111642424A
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-09-11
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張斌;張亞潔;徐挺;尹大強(qiáng)
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 同濟(jì)大學(xué)
• 主分類號(hào): A01K61/10
• 分類號(hào): A01K61/10;A01K61/17
• 代理公司: 上海智信專利代理有限公司 31002
• 代理人: 吳林松

一種可提高斑馬魚(yú)產(chǎn)卵量的方法，在玻璃養(yǎng)殖缸內(nèi)加入2/3的斑馬魚(yú)系統(tǒng)養(yǎng)殖水，養(yǎng)殖缸內(nèi)放入加熱棒保證水溫恒定，養(yǎng)殖缸內(nèi)放入曝氣泵保證養(yǎng)殖缸內(nèi)溶解氧。將雌雄比例1：1或2：1的斑馬魚(yú)成魚(yú)放入孵化盒，在頂部依次放上軟濾膜和孵化盒蓋板，用皮筋綁緊，將綁緊后的孵化盒放入玻璃養(yǎng)殖缸，保證孵化盒被全部浸沒(méi)，次日亮燈后取出孵化盒按照正常程序收集魚(yú)卵。溫度恒定及溶解氧充足可維持斑馬魚(yú)成魚(yú)及胚胎孵化最適溫度和溶解氧條件，有利于提高斑馬魚(yú)產(chǎn)卵量；并保證受精后的魚(yú)卵同樣生長(zhǎng)在最適宜的溫度條件下，有助于提高胚胎的孵化率及孵化后幼魚(yú)的存活率；同時(shí)可使用多個(gè)孵化盒進(jìn)行操作，適用于魚(yú)卵量大的科研實(shí)驗(yàn)工作。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于魚(yú)類孵育技術(shù)領(lǐng)域，涉及提高斑馬魚(yú)產(chǎn)卵量的方法。

背景技術(shù)

斑馬魚(yú)身體延長(zhǎng)而略呈紡錘形，原產(chǎn)印度和孟加拉，是一種常見(jiàn)的熱帶魚(yú)品種。斑馬魚(yú)屬卵生魚(yú)類，4月齡即進(jìn)入性成熟期。喜歡在水域底部產(chǎn)卵，并會(huì)自食其卵。成魚(yú)每隔幾天可產(chǎn)卵一次，卵子體外受精，體外發(fā)育。胚胎發(fā)育同步且速度快，胚體透明。斑馬魚(yú)由于個(gè)體小，養(yǎng)殖花費(fèi)少，繁殖周期短，產(chǎn)卵量大，可大規(guī)模繁育等優(yōu)點(diǎn)，成為最受關(guān)注的模式動(dòng)物之一。

斑馬魚(yú)與人類基因組相似度高達(dá)87％，其生物學(xué)研究基礎(chǔ)充分，且對(duì)環(huán)境變化和化合物干擾非常敏感。斑馬魚(yú)與人類具備相似的信號(hào)通路，且已有研究表明成年斑馬魚(yú)的各器官和組織在解剖學(xué)、生理學(xué)以及分子水平上與人類相似。此外，斑馬魚(yú)胚胎具有光學(xué)透明性，在顯微鏡下可清楚地觀察到胚胎的每個(gè)發(fā)育階段。作為國(guó)際通用的三種實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)用魚(yú)之一，斑馬魚(yú)的基因數(shù)據(jù)和胚胎發(fā)育模型數(shù)據(jù)十分豐富，在突變篩選時(shí)可鑒別表型特征。斑馬魚(yú)被廣泛地應(yīng)用于遺傳和發(fā)育毒理學(xué)、環(huán)境毒理學(xué)、病理毒理學(xué)、藥物毒理學(xué)等毒理學(xué)領(lǐng)域的研究中。

科研用斑馬魚(yú)一般孵育溫度為28攝氏度左右，以保證成魚(yú)、胚胎及幼魚(yú)的正常生長(zhǎng)和發(fā)育。傳統(tǒng)的產(chǎn)卵方法如果僅使用申請(qǐng)?zhí)枮?01320164937.3或201910552545.6等專利公布的斑馬魚(yú)孵化盒類似裝置，無(wú)法控制孵化盒內(nèi)的水溫和溶解氧，因此會(huì)對(duì)斑馬魚(yú)的產(chǎn)卵率、胚胎孵化率有影響。可見(jiàn)，提供一種水溫及溶解氧可控制，容易操作、斑馬魚(yú)產(chǎn)卵量高、胚胎死亡率低的繁殖方法尤為重要。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題是克服目前產(chǎn)卵方法無(wú)法對(duì)水溫及溶解氧控制的不足，提供一種通過(guò)控制水溫及溶解氧提高斑馬魚(yú)產(chǎn)卵量并降低胚胎死亡率且容易操作的繁殖方法。

為解決上述技術(shù)問(wèn)題，提供了一種改進(jìn)的提高斑馬魚(yú)產(chǎn)卵量的方法，包括以下步驟：

S1、將養(yǎng)殖缸中加入2/3的斑馬魚(yú)系統(tǒng)養(yǎng)殖水，液面高于放入的全部孵化盒即可；優(yōu)選地，將玻璃養(yǎng)殖缸中加入2/3的斑馬魚(yú)系統(tǒng)養(yǎng)殖水；

S2、使得養(yǎng)殖水的水溫恒定于28.5±1℃；

S3、使得養(yǎng)殖缸內(nèi)溶解氧充足；

S4、在晚上將雌雄比例1︰1或2︰1的健康斑馬魚(yú)成魚(yú)放入含隔板的孵化盒內(nèi)兩側(cè)；

S5、在孵化盒頂部依次放上軟濾膜和孵化盒蓋板，并用皮筋將孵化盒綁緊；

S6、將綁緊后的孵化盒置于養(yǎng)殖缸內(nèi)，確保孵化盒被浸沒(méi)；

S7、經(jīng)歷黑暗時(shí)間次日亮燈后取出孵化盒；

S8、將皮筋解開(kāi)，取下蓋板和軟濾膜，抽出擋板；

S9、45-75分鐘后按照正常程序收集魚(yú)卵。

在步驟S1中，在養(yǎng)殖缸內(nèi)加入水的時(shí)間為當(dāng)天放魚(yú)前3-5小時(shí)；pH范圍為7.0-7.4。

在步驟S2中，在養(yǎng)殖缸內(nèi)放入加熱棒加熱養(yǎng)殖水，并保持開(kāi)啟狀態(tài)以加熱維持水溫；作為優(yōu)選，所述水溫恒定于28攝氏度。

在步驟S3中，在養(yǎng)殖缸內(nèi)放入曝氣泵，并保持開(kāi)啟狀態(tài)以使得養(yǎng)殖缸內(nèi)溶解氧充足；優(yōu)選地，溶解氧不低于6mg/L；