[發明專利]一種抗血小板聚集的蘆薈提取物及其在PRP制備中的應用

在審

• 申請號: 202010370565.4
• 申請日: 2020-05-06
• 公開（公告）號: CN111529711A
• 公開（公告）日: 2020-08-14
• 發明（設計）人: 吳金蕓;雷登;黃春蘭
• 申請（專利權）人: 湖南科諾康美生命科技有限公司
• 主分類號: A61K47/46
• 分類號: A61K47/46;A61K47/12;A61K35/16;A61K36/896;A61K36/886;A61K31/194;A61P9/00;A61P31/04;A61P7/04;A61P29/00;A61P17/02
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一種抗血小板聚集的蘆薈提取物及其在PRP制備中的應用，包括以下步驟：蘆薈提取物的制備、抗ADP誘導的血小板聚集的檢測、PRP的制備與激活。本發明的蘆薈提取物對ADP誘導的血小板聚集有顯著的抑制作用，與枸櫞酸鈉合用抗凝劑制備得到PRP濃度更高，活性更強，激活后PRP可用于傷口修復等相關臨床應用。

技術領域

本發明屬于生物醫藥技術領域，涉及一種抗血小板聚集的蘆薈多糖及其在 PRP制備中的應用。

背景技術

富血小板血漿(platelet rich plasma，PRP)來自于自體全血或者臍血，其相對于全血/臍血含有更高倍數濃度的血小板，因制備簡便快速、風險較小及生物功能顯著等優點，被廣泛用于組織修復再生、傷口感染治療和機體功能重建等方面。PRP通過釋放大量機體所需的生長因子和細胞因子，同時參與了血小板凝固和纖維蛋白產生的止血和免疫應答進程。因此PRP發揮臨床治療作用主要是由于其分泌的蛋白分子和細胞因子等成分。而目前尚無統一標準來規范PRP的制備，不同制備技術獲得的PRP所含的血小板濃度和組分也不同。

常用的PRP制備方法是二次離心法，是將血液注入含抗凝劑的試管內，第一次離心分為3層，最低層為紅細胞，中間層為含富血小板的黃衣層，最上層為貧血小板血漿，用移液器吸取最上層血漿及中間層后注入另一個不含抗凝膠的試管中，再次離心重新分為三層，最低層為少量紅細胞，棄用3/4上層血漿后用剩余血漿復溶中間黃衣層得到富血小板血漿。

最常用的抗凝劑有肝素鈉、枸櫞酸鈉、EDTA鹽、草酸鹽等，然而這些抗凝劑或多或少具有明顯的缺點，如鈉離子存在易導致血漿電解質混亂、肝素誘導血小板減少癥及骨質疏松癥、枸櫞酸鈉導致Ca²+離子失衡等，特別用于大量人體輸入時產生的副作用更加明顯，因此研發篩選新的天然抗凝劑具有重要的實際價值。

蘆薈提取物有開發成新型抗凝劑的潛力，蘆薈具有抗衰老、促進愈合、強心活血、消炎殺菌等多種藥理作用，其成分復雜，含有多糖、黃酮、蒽醌類、異檸檬酸鈣多種生物活性物質，在制備PRP過程中，血液運輸、血小板富集等過程所需時間較長，很難保證血小板不被激活，血液不被細菌污染，因此具有多種生物活性的蘆薈提取物是比較符合PRP制備過程中抗凝劑選擇要求。

本研究研究了蘆薈提取物抗血小板聚集、凝血的作用效果，評價了其作為抗凝劑制備得到的PRP中血小板的含量和活性，有望開發出用于傷口愈合效果更好的PRP制劑。

發明內容

為了克服現有技術的不足，本發明提供了一種抗血小板聚集的蘆薈提取物及其在PRP制備中的應用，蘆薈提取物具有顯著的抗血小板凝集作用，作為抗凝劑制備得到PRP制劑與枸櫞酸鈉相比，其細胞因子含量及活性更高，具有更好的治療效果。

為實現上述目的，本發明提供如下技術方案：一種抗血小板聚集的蘆薈提取物及其在PRP制備中的應用，包括以下步驟：其中，蘆薈提取物的制備方法包括以下步驟：取蘆薈粉末，按10:1體積加入水，100℃回流提取，過濾后，濃縮凍干得蘆薈提取物。

本發明所提供的蘆薈提取物，經測試具有明顯抑制凝血酶、ADP、膠原、花生四烯酸誘導的血小板聚集的作用，且呈現劑量依賴性。

所述的抗血小板聚集的蘆薈提取物可應用于制備抗血小板聚集及治療心血管疾病藥物。

所述的抗血小板聚集的蘆薈提取物可應用于制備抗血小板聚集及治療心血管疾病藥物中，該蘆薈提取物為活性組分，可制備成其他制劑如注射劑、片劑、丸劑等。

所述的抗血小板聚集的蘆薈提取物可應用于制備PRP中，與枸緣酸鈉聯用作為抗凝劑復合物可降低制備過程中血小板的過早激活及防止細菌污染。

所述的抗血小板聚集的蘆薈提取物與枸緣酸鈉聯用作為抗凝劑復合物制備的得到PRP后，經CaCl₂和凝血酶激活后，可應用于止血、抗炎、促進傷口愈合、改善血供等領域。

附圖說明