[發明專利]木犀草素作為抑制赭曲霉毒素A腎毒性的食物營養素的應用

在審

• 申請號: 202010364823.8
• 申請日: 2020-04-30
• 公開（公告）號: CN111567725A
• 公開（公告）日: 2020-08-25
• 發明（設計）人: 劉曼;程超;田俊;李學志;滑佳麗;黃潔;李永新;楊坤龍
• 申請（專利權）人: 江蘇師范大學
• 主分類號: A23L5/20
• 分類號: A23L5/20;A61K31/352;A61P13/12;A61P39/06;G01N21/31;G01N15/14;G01N21/64;G01N1/30;G01N1/34
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

木犀草素作為抑制赭曲霉毒素A腎毒性的食物營養素的應用。LUT通過恢復細胞活力和阻止LDH釋放而發揮其預防作用。它通過減少ROS積累，改善線粒體膜電位降低，使抗氧化酶活性恢復到對照水平，從而減輕OTA誘導的氧化應激和脂質過氧化。通過細胞免疫熒光實驗、報告基因質粒轉染實驗和熒光定量PCR反應分析和評價Nrf2和HIF?1α在此過程中的調控作用。結果表明，LUT激活了Nrf2途徑，提高了細胞對抗OTA所致氧化性損傷的防御能力。此外，LUT還通過調節HIF?1α通路，啟動血管生成和上皮修復過程，從而促進細胞進行損傷后修復。本發明揭示了LUT作為黃酮類膳食補充劑在抑制OTA以及其它真菌毒素方面具有較好的應用潛力，可開發為抑制OTA腎毒性的食物營養素，從而拓展LUT的用途。

技術領域

本發明涉及生物醫藥，具體涉及木犀草素作為抑制赭曲霉毒素A腎毒性的食物營養素的應用。

背景技術

赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)這一真菌毒素污染物，具有嚴重的腎毒性，是國際社會普遍關注的食品安全問題。木犀草素(luteolin,LUT)作為一種廣泛存在于天然植物或食品中的營養素，因其顯著的抗氧化能力，越來越受到科學家的關注。

發明內容

發明人經過大量實驗研究發現食物營養素LUT通過中和ROS累積發揮抑制OTA所致腎細胞毒性的作用。LUT激活Nrf2通路增加了細胞抗氧化損傷的能力；同時LUT還通過調控HIF-1α通路從而啟動損傷后的修復過程。OTA誘導ROS累積在0-24h內呈現先上升后下降再上升的過程，且在1h和24h存在2個峰值。表明LUT可開發為抑制OTA腎毒性的食物營養素。

與現有技術相比，本發明的有益效果：LUT作為黃酮類膳食補充劑在抑制OTA以及其它真菌毒素方面具有較好的應用潛力，可開發為作為抑制OTA腎毒性的食物營養素，從而拓展LUT的用途。

附圖說明

圖1木犀草素(LUT)對赭曲霉毒素A(OTA)所致腎細胞毒性的抑制作用實驗；

圖2木犀草素(LUT)對赭曲霉毒素A(OTA)所致細胞膜的完整性(A-F)和細胞上清乳酸脫氫酶(LDH)滲漏(G)的影響實驗；

圖3赭曲霉毒素A(OTA)所致ROS累積的時間關系圖，OTA濃度為50μM，作用時間為(A)0h，(B)1h，(C)3h，(D)6h，(E)12h，(F)24h；

圖4木犀草素(LUT)對赭曲霉毒素A(OTA)所致ROS累積的抑制作用實驗，(a)0.1％DMSO，(b)50μM OTA，(c)50μM OTA+100μM LUT，(d)100μM LUT。作用時間分別為(A)1h和(B)24h；

圖5木犀草素(LUT)抑制赭曲霉毒素A(OTA)所致的線粒體膜電位下降，(A)0.1％DMSO組，(B)50μM OTA組，(C)50μM OTA+100μM LUT組，(D)100μM LUT組，作用時間為24h；左列代表線粒體膜電位較高，JC-1形成聚合物，呈紅色熒光；中間列代表線粒體膜電位較低，JC-1為單體，呈綠色熒光；右列為左中列重疊后得到；

圖6木犀草素(LUT)對赭曲霉毒素A(OTA)所致(A-D)Nrf2核轉位和(E)ARE抑制的保護作用實驗，實驗分為4組，(A)為0.1％DMSO組，(B)50μM OTA組，(C)50μM OTA+100μM LUT組，(D)100μM LUT組，作用時間為24h。細胞用Nrf2一抗孵育后用熒光二抗孵育，細胞核用DAPI染色，然后置于熒光顯微鏡下觀察拍照。(E)采用lipofectamine 8000轉染p-ARE質粒24h后進行藥物孵育，24h后依據熒光素酶報告基因檢測試劑盒進行檢測，ARE激活用RLU表示；