[發明專利]用于雜交瘤細胞的連續培養裝置及培養方法

在審

• 申請號: 202010350337.0
• 申請日: 2020-04-28
• 公開（公告）號: CN111592985A
• 公開（公告）日: 2020-08-28
• 發明（設計）人: 周雷鳴;周偉偉;孫靜靜;程雷顯;陳超;趙巧輝;李桂林;付光宇
• 申請（專利權）人: 鄭州伊美諾生物技術有限公司
• 主分類號: C12M3/00
• 分類號: C12M3/00;C12M1/26;C12M1/12;C12M1/04
• 代理公司: 鄭州異開專利事務所(普通合伙) 41114
• 代理人: 劉一曉

1.一種用于雜交瘤細胞的連續培養裝置，包括中空纖維柱，所述中空纖維柱包括設置有殼程進口和殼程出口的殼體，所述殼體內并排設置有多根中空纖維絲，所述中空纖維絲的一端均與管程進口相連通，中空纖維絲的另一端均與管程出口相連通，其特征在于：還包括

內循環部，其包括與所述管程進口相連的第一管路，所述第一管路上設置有循環泵，第一管路伸入循環槽內，且第一管路的進口端靠近所述循環槽底板設置，循環槽內還設置有與所述管程出口相連的第二管路、以及帶有第一空氣過濾器的第一放空管；

供應部，其包括供應槽，所述供應槽內設置有與施壓設備相連的施壓管，所述施壓管上設置有第二空氣過濾器，供應槽內還設置有與所述殼程進口相連的供液管，所述供液管上設置有第一開關閥，供液管的入口端靠近供應槽的底板設置；

獲取部，其包括收集槽，所述收集槽內設置有與所述殼程出口相連的收集管，所述收集管上設置有第二開關閥，收集槽內還設置有與抽取設備相連的抽壓管、以及帶有第三空氣過濾器的第二放空管，所述抽壓管的進口端靠近收集槽的底板設置。

2.一種基于權利要求1所述的用于雜交瘤細胞的連續培養裝置的細胞培養方法，其特征在于：包括如下步驟：

第一步，高壓滅菌后，在超凈工作臺上向循環槽和供應槽中注入無菌培養基，并通過施壓設備將供應槽內的無菌培養基壓入到中空纖維柱的殼程中，然后關閉第一、二開關閥，之后，啟動循環泵使循環槽內的無菌培養基在中空纖維柱的管程中循環流動，接著，將中空纖維柱以傾斜姿態放至二氧化碳培養箱中并使其持續運行，上述中空纖維柱由管程進口向管程出口方向向上傾斜20-30°；

第二步，復蘇雜交瘤細胞并進行放大培養，離心棄掉上清后，再使用新鮮培養基稀釋細胞；然后關閉循環泵，打開第一、二開關閥，在超凈工作臺上將稀釋后的細胞加入供應槽中，再通過施壓設備將其壓入到中空纖維柱的殼程中，之后，向供應槽內加入新鮮培養基備用，同時關閉第一、二開關閥、打開循環泵進行細胞培養；

第三步，細胞培養7-8天時，當看到中空纖維柱管程進口端出現成團細胞時，關閉循環泵，打開第一、二開關閥，通過施壓設備將供應槽內的培養基壓入到中空纖維柱的殼程內對成團細胞內含有的單克隆抗體上清進行置換，置換出的單克隆抗體上清進入收集槽后，關閉第一、二開關閥，然后通過抽取設備抽取單克隆抗體上清進行后續試驗；

第四步，從第一次抽取單克隆抗體上清后，每天進行第三步的抽取操作，直到達到實驗需求量的單克隆抗體為止；在此期間，每隔七天對循環槽和供應槽內的培養基進行一次更換。