[發明專利]一種分級結構反蛋白石多孔生物支架的制備方法

有效

• 申請號: 202010344111.X
• 申請日: 2020-04-27
• 公開（公告）號: CN111410766B
• 公開（公告）日: 2021-01-01
• 發明（設計）人: 趙遠錦;邵長敏;王月桐
• 申請（專利權）人: 南京鼓樓醫院
• 主分類號: C08J9/26
• 分類號: C08J9/26;B01J19/00;B01L3/00;C08L89/00;C08L83/04
• 代理公司: 南京鐘山專利代理有限公司 32252
• 代理人: 王磊

1.一種分級結構反蛋白石多孔生物支架的制備方法，其特征在于，先利用微流控技術制備單乳液液滴模板，其中，內相為油相，外相為添加有造孔劑的水凝膠預聚溶液，并通過調節微流控內相和外相的流速，獲得不同直徑的液滴正模版，然后固化外相，去除液滴模板，初步獲得一級結構反蛋白石多孔生物支架；隨后將一級結構反蛋白石多孔生物支架浸泡到磷酸緩沖鹽溶液中，析出外相中的造孔劑，最終獲得分級結構反蛋白石多孔生物支架；所述內相為50 cs的甲基硅油，外相為甲基丙烯酸酐化明膠、造孔劑、十二烷基硫酸鈉和聚醚型表面活性劑F108的混合溶液。

2.根據權利要求1所述的分級結構反蛋白石多孔生物支架的制備方法，其特征在于，具體包括以下步驟：

S1、搭建微流控單乳液生成裝置；

S2、微流控單乳液液滴模板的制備：

配制高分子水凝膠預聚溶液作為外相，外相溶液內包括造孔劑，外相與內相互不相容；將外相溶液注入微流控單乳液生成裝置的外相通道，將內相液體注入微流控單乳液生成裝置的內相通道，并調節控制內相和外相的流速，利用兩相之間的流體剪切力生成單分散的水包油液滴，液滴以六方密堆積的方式自組裝形成有序的液滴模板；

S3、分級結構反蛋白石多孔生物支架的制備：

將S2中制備的液滴模板的外相用紫外光固化，然后用正己烷去除液滴模板，初步獲得一級結構反蛋白石多孔生物支架；將一級結構反蛋白石多孔生物支架浸入磷酸鹽緩沖溶液中去除造孔劑，最終獲得分級結構反蛋白石多孔生物支架。

3.根據權利要求1所述的分級結構反蛋白石多孔生物支架的制備方法，其特征在于，所述造孔劑為質量百分比濃度0.5-1.5%的聚氧化乙烯溶液。

4.根據權利要求2所述的分級結構反蛋白石多孔生物支架的制備方法，其特征在于，S2中，可通過調節內相和外相的流速而調整液滴模板的尺寸大小；液滴的直徑隨著內相流速的增大而增大，隨著外相流速的增大而減小，從而獲得不同孔徑的反蛋白石多孔生物支架。

5.根據權利要求2所述的分級結構反蛋白石多孔生物支架的制備方法，其特征在于，S2中，可通過調節造孔劑的濃度獲得不同大小孔徑的分級孔洞結構，造孔劑的濃度越高，分級孔洞結構的孔徑越小，孔隙率越高。

6.根據權利要求2所述的分級結構反蛋白石多孔生物支架的制備方法，其特征在于，S3中，所述的一級結構反蛋白石多孔生物支架的孔洞直徑在190 μm-280 μm范圍內。

7.根據權利要求2所述的分級結構反蛋白石多孔生物支架的制備方法，其特征在于，S3中，所述的分級結構反蛋白石多孔生物支架的孔洞直徑在6 μm-8 μm范圍內。

8.根據權利要求2所述的分級結構反蛋白石多孔生物支架的制備方法，其特征在于，S1中，所述微流控單乳液生成裝置的搭建方法為：

S1、制備內相管、外相管和觀察管：

使用微電極控制儀將一根外徑為1000 μm，內徑為580 μm的玻璃毛細管拉細，然后用砂紙手工將其打磨成內徑為120 μm的尖頭毛細管，作為微流控單乳液生成裝置的內相管；另外再取一根外徑為1000 μm，內徑為580 μm的玻璃毛細管，用砂紙將毛細管兩端打磨平滑，作為微流控單乳液生成裝置的外相管；第三根玻璃毛細管為內徑為1200 μm的方形管，砂紙打磨平滑后作為液滴生成的觀察管；將內相管、外相管和觀察管浸泡在乙醇溶液中，超聲清洗5-10 min，然后取出，用氮氣吹干或常溫晾干后即可使用；

S2、微流控單乳液生成裝置的搭建：

根據內相管與外相管的長度，將載玻片切割至匹配尺寸，然后用速干膠將方形管固定在載玻片的中間區域，待膠凝固之后將內相管和外相管嵌套入觀察管內，內相管的尖頭插入外相管中，并對齊兩者的中線，之后用速干膠固定，最后將平頭針頭底部刻出凹槽，使其能平穩的立在內相管與外相管連接處上方，并用速干膠固定與密封。