[發(fā)明專利]水牛乳β-酪蛋白抗氧化物的制備方法有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 202010330302.0 | 申請(qǐng)日： | 2020-04-24 |
| 公開(kāi)（公告）號(hào)： | CN111440234B | 公開(kāi)（公告）日： | 2021-07-13 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 任大喜;陳晨;劉建新;李珊珊;步婷婷;李玲;宋小玲 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 浙江大學(xué) |
| 主分類號(hào)： | C07K14/47 | 分類號(hào)： | C07K14/47;C07K1/34;C07K1/14;C12P21/06 |
| 代理公司： | 杭州中成專利事務(wù)所有限公司 33212 | 代理人： | 金祺 |
| 地址： | 310058 浙江*** | 國(guó)省代碼： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 水牛 蛋白 氧化物 制備 方法 | ||
本發(fā)明公開(kāi)了一種水牛乳β?酪蛋白抗氧化物的制備方法，包括以下步驟：水牛乳脫脂，加熱、調(diào)節(jié)pH值后加入氯化鈣溶液，所得沉淀進(jìn)行清洗；清洗后沉淀加超純水溶解、冷卻、調(diào)節(jié)pH值、離心，所得的上清液加熱、調(diào)節(jié)pH值、離心，得到β?CN沉淀；β?CN沉淀透析脫鹽、凍干；得β?CN蛋白粉。將β?CN蛋白粉利用堿性蛋白酶進(jìn)行酶解，得水牛乳β?酪蛋白抗氧化物。該水牛乳β?酪蛋白抗氧化物具有較強(qiáng)的抗氧化能力。
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明屬于新型抗氧化肽的分離純化及相關(guān)產(chǎn)品開(kāi)發(fā)，具體涉及一種水牛乳β-酪蛋白抗氧化物的制備方法。
背景技術(shù)
生物活性肽是對(duì)身體功能或狀況產(chǎn)生積極影響并最終影響健康的特定蛋白質(zhì)片段。酶解法是制備生物活性肽的常用方法之一，其原理是通過(guò)切割蛋白質(zhì)特定位點(diǎn)來(lái)釋放具有活性的多肽片段。機(jī)體內(nèi)小肽比游離氨基酸吸收地更多，代謝速率更快，許多肽甚至還具有蛋白質(zhì)或其組成氨基酸所沒(méi)有的新特性。已有大量研究表明乳源性活性肽可以在人體中發(fā)揮抗高血壓、抗氧化、抗血栓、降低膽固醇、抗菌和免疫調(diào)節(jié)等作用[1]。其中抗氧化活性肽是被研究的較廣泛的一個(gè)方向，由于某些化學(xué)合成類抗氧化劑(丁基羥基甲苯和丁基羥基茴香醚等)對(duì)人體健康有害，因此尋求有效、無(wú)毒的天然抗氧化劑(如抗氧化肽)便得到了社會(huì)的廣泛認(rèn)可。
水牛是世界上最主要的反芻動(dòng)物之一，資源豐富。與傳統(tǒng)荷斯坦牛乳相比，水牛乳富含蛋白質(zhì)、脂肪、乳糖、礦物質(zhì)和共軛亞油酸，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值更高。酪蛋白是牛乳蛋白質(zhì)的主要成分，占總蛋白的80％左右，在酪蛋白中，β-CN又是最主要蛋白之一，占35％左右[2]。對(duì)牛乳源活性肽的制備和結(jié)構(gòu)研究已經(jīng)比較成熟，但關(guān)于水牛乳蛋白源活性肽的研究還較少。水牛乳源生物活性肽的研究可以為功能性乳制品的開(kāi)發(fā)提供理論依據(jù)和技術(shù)支撐，還可以增加我國(guó)水牛資源的開(kāi)發(fā)與利用，促進(jìn)奶水牛業(yè)的發(fā)展和水牛乳加工技術(shù)的轉(zhuǎn)型升級(jí)。
參考文獻(xiàn)：
[1]Korhonen H.Milk-derived bioactive peptides:From science toapplications[J].Journal of Functional Foods.2009,1(2):177-187；
[2]王強(qiáng).水牛CSN1S1多態(tài)性對(duì)泌乳品質(zhì)及馬蘇里拉干酪品質(zhì)的影響研究[D].東北農(nóng)業(yè)大學(xué),2015。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種水牛乳β-酪蛋白抗氧化物的制備方法，即，提供了一種具有抗氧化活性的水牛乳β-酪蛋白(β-CN)的制備方法，從而實(shí)現(xiàn)從水牛乳β-CN中釋放出具備抗氧化的活性肽。
為了解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明提供一種水牛乳β-酪蛋白抗氧化物的制備方法，包括依次進(jìn)行以下步驟：
S1、水牛乳β-CN的制備：
S1.1、將水牛乳于(4±1)℃離心，從而除去上層的脂肪，得脫脂乳：
S1.2、將脫脂乳加熱到(30±2)℃，先調(diào)節(jié)pH值至(11.0±0.2)，再加入0.5M氯化鈣溶液，接著調(diào)節(jié)pH值至(7.0±0.2)，離心(從而除去上清液)，得沉淀；
每100g的脫脂乳配用(15±2)ml的0.5M氯化鈣溶液；
S1.3、溶解--調(diào)節(jié)pH值--離心：將沉淀用超純水溶解，調(diào)節(jié)pH值至(7.0±0.2)后離心；
再重復(fù)上述溶解--調(diào)節(jié)pH值--離心1～3次(即，共2～4次)，得清洗后沉淀；
說(shuō)明：超純水的用量只需要使得沉淀能溶解即可；
S1.4、將清洗后沉淀加超純水溶解，冷卻到2～4℃，調(diào)節(jié)pH值至(4.5±0.2)，離心，得到上清液；
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