[發明專利]一種多功能微流控芯片及其制備和應用

有效

• 申請號: 202010325822.2
• 申請日: 2020-04-23
• 公開（公告）號: CN111545257B
• 公開（公告）日: 2021-11-12
• 發明（設計）人: 尚云輝;張冠斌;安爽;梁冬;范紅;趙藺
• 申請（專利權）人: 成都博奧獨立醫學實驗室有限公司;四川綿陽四0四醫院
• 主分類號: B01L3/00
• 分類號: B01L3/00;G01N21/64;G01N21/03
• 代理公司: 成都九鼎天元知識產權代理有限公司 51214
• 代理人: 杜康黎

本發明提供一種多功能微流控芯片的制備方法，屬于微流控生物芯片技術領域。所述多功能微流控芯片的制備方法為選擇一個設置有n個反應池的微流控芯片，其正面的部分孔位已完成樣品檢測用引物的點制及蓋片封裝，在其背面反應池選擇m個孔位，并在選擇的孔位內點制熒光納米混合液，將點制好的芯片晾干，并進行表面覆膜，得到多功能微流控芯片，其中，nm≥1。本發明多功能微流控芯片為集樣品檢測和儀器監測為一體的芯片，在使用本發明多功能微流控芯片進行樣品檢測時，即收集反應熒光值的過程中，可實時監測檢測儀器的整體運行情況，包括儀器電機運行的平穩性，儀器光學系統是否存在光衰減或熱干擾，進而實現對儀器的監測，保證樣品檢測結果的有效性。

技術領域

本發明屬于微流控生物芯片檢測技術領域，具體為一種多功能微流控芯片及其制備和應用。

背景技術

隨著基因擴增反應與分析技術在檢測方面的不斷成熟，結合微流控生物芯片技術、恒溫擴增反應與分析技術和共聚焦掃描檢測技術方面研究成果的恒溫擴增核酸分析儀在臨床診斷中逐漸普及，該儀器實現了細菌感染病原學的快速診斷，解決傳統細菌培養檢測法存在的缺陷，對于疾病的診斷、防控有著重要意義。

恒溫擴增核酸分析儀作為一款集成光源、光路及信號采集系的精密儀器，對檢測的靈敏度要求極高。使用時間延長產生的光源衰減，運輸期間的光路漂移，使用過程中的PMT抖動等微小變化，都可能對結果的判讀產生影響，因此采用合適的方法在樣品檢測的同時監測儀器的熒光波動情況是非常必要的。

目前，儀器的監測方法主要是采用熒光納米材料制作的校準芯片或者有機熒光染料制作的校準芯片進行校準。該校準芯片被定期用于恒溫擴增儀器的熒光信號校準，但在兩個校準間隔期內或在儀器使用過程中，可能會出現因PMT抖動帶來的熒光波動，從而導致樣品檢測結果異常。

另外，目前用于樣品檢測的微流控芯片因加工工藝的問題導致部分芯片機械定位豁口偏移，在原料檢、過程檢、成品檢驗過程中采用抽檢的方式，不能很好的將問題芯片挑出，最終導致用戶在使用芯片進行檢測樣品時，儀器檢測的數據與孔位印制的信息不匹配，造成無法判讀或判讀失誤的現象。

發明內容

為解決現有技術存在的上述問題，本發明的目的在于提供一種多功能微流控芯片及其制備和應用，本發明微流控芯片可以同時進行樣品檢測和儀器監測，以實現在樣品檢測的同時監測儀器的運行情況。

本發明目的通過以下技術方案來實現：

一種多功能微流控芯片的制備方法，所述多功能微流控芯片的制備方法為選擇一個設置有n個反應池的微流控芯片，其正面的部分孔位已完成樣品檢測用引物的點制及蓋片封裝，在其背面反應池選擇m個孔位，并在選擇的孔位內點制熒光納米混合液，將點制好的芯片晾干，并進行表面覆膜，得到多功能微流控芯片，其中，nm≥1。

進一步，所述m個孔位應為芯片正面反應池內未印制樣品檢測用引物的孔位。

進一步，所述晾干為自然晾干20-30min，晾干后肉眼觀察熒光納米混合液形成的樣品點呈乳白色且無裂痕為合格片。

一種多功能微流控芯片，采用上述所述的制備方法制備得到。

一種多功能微流控芯片的應用，所述多功能微流控芯片在同時實現樣品檢測和儀器監測中的應用。

進一步，所述多功能微流控芯片同時實現樣品檢測和儀器監測，包括以下步驟：

1）將多功能微流控芯片置于標準儀器上，用校準軟件進行掃描，收集已點制熒光納米混合液孔位反應池的熒光值，并記錄為標準熒光值；

2）將待測樣品與擴增試劑混合后加入上述多功能芯片上，離心，置于檢測儀器上，用樣品檢測軟件進行掃描；

3）收集已點制熒光納米混合液孔位反應池的熒光值，并記錄為反應熒光值，將已點制熒光納米混合液孔位反應池的反應熒光值和標準熒光值進行比較，進而實現對儀器的監測；