[發明專利]一種有機垃圾熱解方法在審
| 申請號： | 202010324871.4 | 申請日： | 2020-04-23 |
| 公開（公告）號： | CN111423256A | 公開（公告）日： | 2020-07-17 |
| 發明（設計）人： | 鄭立榮;王建剛;張波 | 申請（專利權）人： | 上海國璨環境科技有限公司 |
| 主分類號： | C05F17/20 | 分類號： | C05F17/20;C05F17/00 |
| 代理公司： | 杭州橙知果專利代理事務所(特殊普通合伙) 33261 | 代理人： | 余成鵬 |
| 地址： | 201508 上海市金山區山*** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 有機 垃圾 方法 | ||
1.一種有機垃圾熱解方法，其特征在于，包括在堆肥進入高溫階段時添加經改造的轉基因細菌作為外源菌制劑。
2.根據權利要求1所述方法，其特征在于，所述經改造的轉基因細菌包括：
(a)具有SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列；
(b)在(a)中的核苷酸序列經過取代和/或缺失和/或添加一個或多個核苷酸且編碼與(a)相同的氨基酸序列的核苷酸序列；
(c)具有與SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列95％以上同源性且能夠在宿主細胞中表達并使宿主細胞具有嗜熱特性的核苷酸序列。
3.一種表達盒，其特征在于，所述表達盒包括在有效連接的調控序列調控下的權利要求2所述核苷酸序列。
4.一種重組載體，其特征在于，所述重組載體包括權利要求2所述核苷酸序列或權利要求3所述表達盒。
5.根據權利要求1所述方法，其特征在于，所述方法包括構建熱泉樣品嗜熱基因文庫，優選地，應用大腸桿菌表達系統構建熱泉樣品耐高溫基因文庫。
6.根據權利要求5所述方法，其特征在于，分別在不同環境溫度下培養插入外源基因的大腸桿菌，用常見通用引物和古菌特異性引物測序鑒定插入片段長度及具體序列，將所得到的序列去除載體后，獲得耐高溫相關基因，之后隨機插入芽孢桿菌對芽孢桿菌進行基因改造。
7.根據權利要求6所述方法，其特征在于，將重組克隆載體分別用熱激方法轉化枯草芽孢桿菌感受態細胞，挑取白色菌落，培養后提取質粒，經酶切鑒定后，對陽性克隆進行測序驗證，結果表明重組克隆載體中分別對應的插入權利要求2所述核苷酸序列。
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