[發(fā)明專利]L-蘇氨酸醛縮酶突變體R318V及其應(yīng)用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 202010324333.5 | 申請日： | 2020-04-22 |
| 公開（公告）號： | CN111849952B | 公開（公告）日： | 2022-09-20 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 王伯初;趙文艷;潘銀平;楊碧玲;祝連彩;戚娜 | 申請（專利權(quán)）人： | 重慶大學(xué) |
| 主分類號： | C12N9/88 | 分類號： | C12N9/88;C12N15/60;C12N15/70;C12N1/21;C12P13/04;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京海虹嘉誠知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11129 | 代理人： | 呂小琴 |
| 地址： | 400040 重慶市沙坪壩*** | 國省代碼： | 重慶;50 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 蘇氨酸 醛縮酶 突變體 r318v 及其 應(yīng)用 | ||
1.一種L-蘇氨酸醛縮酶突變體，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示，是氨基酸序列為SEQ ID NO:1的L-蘇氨酸醛縮酶的第318位氨基酸由Arg變?yōu)閂al所得。
2.編碼權(quán)利要求1所述的L-蘇氨酸醛縮酶突變體的基因。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的基因，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示。
4.包含權(quán)利要求2所述基因的表達(dá)盒、載體或重組菌。
5.權(quán)利要求1所述的L-蘇氨酸醛縮酶突變體的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：合成所述L-蘇氨酸醛縮酶突變體的編碼基因，構(gòu)建表達(dá)載體，轉(zhuǎn)化蛋白表達(dá)宿主菌，誘導(dǎo)蛋白表達(dá)并純化。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于：所述L-蘇氨酸醛縮酶突變體的編碼基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示。
7.一種催化劑，其特征在于，其有效成分包含權(quán)利要求1所述的L-蘇氨酸醛縮酶突變體。
8.權(quán)利要求1所述的L-蘇氨酸醛縮酶突變體或權(quán)利要求7所述的催化劑在醛醇縮合反應(yīng)中的應(yīng)用。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其特征在于，使用權(quán)利要求1所述的L-蘇氨酸醛縮酶突變體或權(quán)利要求7所述的催化劑，以3,4-二羥基苯甲醛為底物、甘氨酸為輔底物、5-磷酸吡哆醛為輔酶進(jìn)行催化反應(yīng)，合成屈昔多巴。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的應(yīng)用，其特征在于，所述催化反應(yīng)在15-37℃、pH 6.0-11.0條件下進(jìn)行。
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