[發明專利]泛素連接酶RNF38作為鼻咽癌標志物的應用

在審

• 申請號: 202010320398.2
• 申請日: 2020-04-22
• 公開（公告）號: CN111308076A
• 公開（公告）日: 2020-06-19
• 發明（設計）人: 林城;潘建基;宗井鳳;郭巧娟;林少俊;李梅芳;林娜;林燦陽
• 申請（專利權）人: 福建省腫瘤醫院（福建省腫瘤研究所;福建省癌癥防治中心）
• 主分類號: G01N33/574
• 分類號: G01N33/574
• 代理公司: 福州元創專利商標代理有限公司 35100
• 代理人: 饒文君;蔡學俊

本發明提供泛素連接酶RNF38作為鼻咽癌標志物的應用，屬于生物監測領域。本申請通過基礎實驗證明RNF38與鼻咽癌轉移顯著相關，并通過免疫組化的方法檢測RNF38的表達，方法簡單、便利，成本低，可行性及重復性高，在一定程度上預測鼻咽癌患者的轉移，從而篩選鼻咽癌高轉移的人群，輔助鼻咽癌的臨床診療。

技術領域

本發明屬于檢測領域，具體涉及泛素連接酶RNF38作為鼻咽癌標志物的應用，通過檢測鼻咽癌組織中RNF38的表達輔助鼻咽癌患者的預后預測和臨床診療。

背景技術

鼻咽癌是我國南方最常見的惡性腫瘤之一，目前鼻咽癌的5年生存率可高達80%以上。然而，超過 70%的患者就診時即為中晚期，患者生存時間短，預后差。因此，尋找潛在的預測鼻咽癌轉移的靶點，篩選鼻咽癌的高危人群，對于輔助鼻咽癌患者的診療有重要的意義。目前臨床主要根據TNM分期來預測鼻咽癌遠處轉移。然而，TNM分期的最大問題是只有考慮腫瘤的侵犯范圍，而沒有考慮腫瘤的生物學行為和腫瘤的異質性，單純依靠TNM分期不能準確的區分患者的轉移風險，可導致治療不足或者治療過度。泛素化修飾與腫瘤的發生發展密切相關，泛素化修飾異常是致癌的重要因素。泛素-蛋白酶體系統，包括泛素激活酶、泛素結合酶和泛素連接酶等，介導真核生物體內80%~85%的蛋白質降解。其中，泛素連接酶是介導泛素化修飾的泛素-蛋白酶體系統中含量最豐富的一類，可以直接決定蛋白質的活性及定位，參與腫瘤的各種生物學行為，是目前腫瘤研究的熱點。RNF38是泛素連接酶之一，既往研究發現細胞和小鼠實驗顯示 RNF38促進胃癌、非小細胞肺癌細胞的增殖；RNF38促進肝癌細胞和非小細胞肺癌細胞轉移；同時，RNF38表達和腫瘤患者的預后顯著相關。因此提示，RNF38與腫瘤的發生發展密切相關，可為預測鼻咽癌預后、臨床診療及研發靶向藥物提供新的理論依據，具有重要的意義。

發明內容

本發明的目的在于提供泛素連接酶RNF38作為鼻咽癌標志物的應用。

為實現上述目的，本發明采用如下技術方案：

泛素連接酶RNF38在制備檢測鼻咽癌試劑中的應用。

泛素連接酶RNF38在制備鼻咽癌輔助診斷及預后預測試劑中的應用。

通過收集病理確診鼻咽癌患者和健康人的鼻咽石蠟包塊，經過免疫組織化學方法檢測RNF38的表達，分析RNF38在鼻咽癌組織與正常鼻咽組織的表達規律；同時，結合患者的臨床和預后信息，分析RNF38與鼻咽癌患者預后的相關性。 構建RNF38過表達的穩轉細胞株及RNF38沉默的穩轉細胞株，通過劃痕實驗、細胞侵襲和細胞遷移實驗，在細胞水平探討RNF38對鼻咽癌細胞轉移能力的影響；構建裸鼠尾靜脈轉移模型，探討RNF38對于鼻咽癌細胞在裸鼠體內轉移能力的影響。

本發明的優點在于：

泛素連接酶RNF38在鼻咽癌中臨床意義目前尚未明確，本申請通過基礎實驗證明RNF38與鼻咽癌轉移顯著相關，并通過免疫組化的方法檢測RNF38的表達，方法簡單、便利，成本低，可行性及重復性高，在一定程度上預測鼻咽癌患者的轉移，從而篩選鼻咽癌高轉移的人群，輔助鼻咽癌的臨床診療。

附圖說明

圖1為免疫組化中RNF38表達情況。

圖2為RNF38表達水平對鼻咽癌預后的影響。

圖3為RNF38的體內外劃痕實驗結果。

圖4為RNF38的侵襲和轉移實驗結果。

圖5為RNF38的裸鼠尾靜脈轉移結果。

具體實施方式

實施例1

一、實驗方法

1. 病人組織及資料收集