[發明專利]一種免疫組化檢測用載玻片

在審

• 申請號: 202010318770.6
• 申請日: 2020-04-21
• 公開（公告）號: CN111504739A
• 公開（公告）日: 2020-08-07
• 發明（設計）人: 季天海;任林琇;林清源
• 申請（專利權）人: 上海交通大學醫學院附屬第九人民醫院;廈門醫聯體病理診斷中心有限公司;上海醫之本科技有限公司
• 主分類號: G01N1/28
• 分類號: G01N1/28;G01N1/30;G02B21/34
• 代理公司: 上海光華專利事務所(普通合伙) 31219
• 代理人: 朱凌嬌;許亦琳

本發明提供一種免疫組化檢測用載玻片，所述載玻片至少包括：載玻片基底，所述載玻片基底至少部分覆蓋有粘附層；所述載玻片設有檢測區、對照區和標簽區，所述對照區設有陽性組織芯片，所述陽性組織芯片包括若干種陽性對照組織，所述檢測區和對照區覆蓋有粘附層，所述陽性組織芯片位于粘附層的上方。所述陽性組織芯片中可包含新型冠狀病毒抗原陽性的COVID?19組織。本申請能夠保證每張切片都有對應的陽性對照組織，制片流程不但符合15189的質量管理體系，同時縮短時間、簡化流程，提高效率，統一標準。防脫片，保證了前期陽性對照組織的粘附力強，保證在后期染色過程中不掉片，同時保證陽性對照的抗原存留時間，保證抗原時效性，防止陽性對照芯片降解。

技術領域

本發明涉及醫療檢測領域，具體涉及是一種免疫組化檢測用載玻片。

背景技術

2019年底疫情爆發，臨床對新冠病毒檢測提出了很高要求。目前通行做法是采集患者血液，采用PCR、酶標ELASA法和分子探針這三種方法進行檢測。每種方法都有它的優點和缺陷，PCR法使用較多，但該方法需要進行數十次指數級的循環擴增，時間較長且容易產生假陽性；酶標ELASA法測定的是抗體，但樣本經提取后導致檢測靈敏度偏低，容易產生假陰性；分子探針法則需要大量的時間來純化樣品，過程繁瑣。因此臨床檢測要真正做到靈敏度高，特異性強、檢測時間短應是很難，究其原因除了實驗本身特點外，就是上述三種方法都需要關鍵的一步，即把病毒的DNA/RNA或抗體從血液樣品中分離出來，但正因為這“分離”的步驟勢必會導致血液中原本效價就很低的病毒，部分或大部分在過程中丟失，而且病毒提取量還取決于試劑盒的優劣與方法科學與否。

那么最好的樣本采集部位是哪里呢？毫無疑問是肺部，包括肺泡灌洗液，咽拭子，痰涂片等；那么最合適的樣本處理方法又是什么呢？不經過提取，在原位檢測。因此我們擬用咽拭子采集的細胞制作成組織蠟塊，不經過提取方法最大限度避免抗原丟失，通過免疫組化方法在原位檢測新冠病毒抗體。

為了盡可能避免免疫組化假陰性與假陽性的結果產生，中華醫學會質量控制管理體系要求以及《三級醫院評審標準(2011年版)實施細則》中明確規定：免疫組化染色必須設立陽性對照，以確保染色結果穩定、可靠。而我們目前免疫組化陽性對照的通用方法是，找到已知含有IgG/IGM抗體(新冠病毒相關)的生物組織作為陽性對照，將5um厚度的該陽性對照組織以及待檢測組織切片同時撈取在同一張載玻片上，并通過烤片等一系列步驟，以防止組織脫落或酶降解，再將載有該陽性對照組織與待檢測組織的載玻片置于同一條件下進行免疫組織化學反應，最后進行比對和判讀。這種做法既繁瑣又耗時還無統一質控標準，而且目前很多醫院特別是三甲醫院工作量很大，很難保證將每張切片都做到陽性對照，這樣就不可避免的產生不確定結果。

發明內容

鑒于以上所述現有技術的缺點，本發明的目的在于提供一種免疫組化檢測用載玻片。該載玻片該載玻片為自帶有陽性對照組織的芯片載玻片，可以確保同時涵蓋人類各種疾病所需要的陽性對照組織，以解決上述臨床工作中遇到的實際問題。

本發明第一方面提供一種免疫組化檢測用載玻片，所述載玻片至少包括：載玻片基底，所述載玻片基底至少部分覆蓋有粘附層；所述載玻片設有檢測區、對照區和標簽區，所述對照區設有陽性組織芯片，所述陽性組織芯片包括若干種陽性對照組織，所述檢測區和對照區覆蓋有粘附層，所述陽性組織芯片位于粘附層的上方。

本發明第二方面提供前述免疫組化檢測用載玻片在免疫組化檢測中的應用。

本發明第三方面提供前述免疫組化檢測用載玻片的制備方法，至少包括如下步驟：

1)在載玻片基底表面至少部分覆蓋粘附物質；

2)將陽性組織芯片平鋪于對照區；

3)在陽性組織芯片表面覆蓋防降解物質。

如上所述，本發明的免疫組化檢測用載玻片，具有以下有益效果：