[發明專利]雞傳染性法氏囊病病毒新型變異株反向遺傳疫苗株及其應用

在審

• 申請號: 202010312138.0
• 申請日: 2020-04-20
• 公開（公告）號: CN111647568A
• 公開（公告）日: 2020-09-11
• 發明（設計）人: 祁小樂;王笑梅;高玉龍;高立;李凱;劉長軍;潘青;張艷萍;崔紅玉
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院哈爾濱獸醫研究所(中國動物衛生與流行病學中心哈爾濱分中心)
• 主分類號: C12N7/01
• 分類號: C12N7/01;A61K39/12;A61P31/14;C12R1/93
• 代理公司: 北京科龍寰宇知識產權代理有限責任公司 11139
• 代理人: 馬鑫

本發明公開了一種雞傳染性法氏囊病病毒新型變異株反向遺傳疫苗株及其應用。所述的雞傳染性法氏囊病病毒新型變異株反向遺傳疫苗株，命名為rGtVarVP2，該疫苗株保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏號為CGMCC No.19383，保藏時間為2020年3月12日。rGtVarVP2是一株以弱毒株Gt為骨架，其主要保護性抗原基因VP2被新型變異株SHG19相應區段替換的重組IBDV，且SHG19的VP2被引入了雙點突變Q253H/A284T。雙點突變Q253H/A284T的引入使原本不能夠適應體外細胞系的重組毒株能夠在DF1細胞上增殖。將重組病毒rGtVarVP2在DF1細胞上擴繁，然后制備成IBDV新型變異株反向遺傳疫苗(rGtVarVP2株)，動物試驗表明，IBDV新型變異株反向遺傳疫苗(rGtVarVP2株)安全、有效。

技術領域

本發明涉及一種雞傳染性法氏囊病病毒疫苗株及其應用，特別涉及一種雞傳染性法氏囊病病毒新型變異株反向遺傳疫苗株及其應用。本發明屬于獸藥技術領域。

背景技術

傳染性法氏囊病(infectious bursal disease，IBD)是雞的一種重要的免疫抑制病，其病原是傳染性法氏囊病病毒(IBDV)。IBDV對養禽業的危害分直接危害和間接危害。直接危害：摧毀中樞免疫器官法氏囊，且能直接致死。間接危害：IBDV感染耐過的雞免疫力低下，造成禽流感、新城疫等其它重要疫病的疫苗免疫失敗，且易造成繼發感染，影響雞群生產性能，造成嚴重經濟損失。總之，IBD嚴重影響養禽業的健康發展，其防控形勢十分嚴峻。

IBDV有兩個血清型：血清I型和血清II型。血清I型對雞致病，血清II型對雞不致病。在過去的60多年里，血清I型IBDV主要發生過兩次較大的變異，相繼出現了經典毒、變異株和超強毒。上世紀90年代以來，以急性、高致死率為主要特征的IBDV超強毒(Veryvirulent IBDV,vvIBDV)席卷全球，給養禽業造成了巨大損失。經近30年的努力，基于飼養管理水平的提高和疫苗的廣泛使用等因素，vvIBDV感染正逐漸被控制。然而，近年來IBD出現了新變化，非典型IBD在我國部分雞場相繼被發現，無明顯外觀癥狀，但中樞免疫器官法氏囊卻嚴重萎縮，導致嚴重免疫抑制和生產性能下降，嚴重威脅養禽業健康發展。2017年以來，本實驗室率先鑒定了該疫情的病原是IBDV新型變異株，在黑龍江、遼寧、河北、北京、山東、江蘇、安徽、廣西、山西、云南、浙江、福建、湖北等主要養禽地區均檢測到了IBDV新型變異株的流行，該疫情正在不斷蔓延擴大(范林進等，2019；Fan et al,2019,2020；Xu et al,2019)。

我們前期研究發現，IBDV新型變異株不僅造成中樞免疫器官損傷和免疫抑制進而顯著影響生產性能。更重要的是，由于抗原性與vvIBDV有顯著差異，IBDV新型變異株發生了免疫逃匿，導致有些針對vvIBDV的疫苗對其保護效果不理想，造成了IBDV新型變異株在免疫雞群廣泛流行。因此研制針對IBDV新型變異株的疫苗十分必要而迫切。

發明內容

針對IBDV新型變異株防控尚無疫苗可用的迫切問題，本發明提出了一種IBDV新型變異株反向遺傳疫苗株(rGtVarVP2株)，該疫苗株對IBDV新型變異株攻擊能產生高效的保護。

為了達到上述目的，本發明采用了以下技術手段：