[發明專利]雙功能抗原引導的西地那非和他達拉非的抗體陣列檢測卡

在審

• 申請號: 202010310896.9
• 申請日: 2020-04-20
• 公開（公告）號: CN111562384A
• 公開（公告）日: 2020-08-21
• 發明（設計）人: 郭杰標
• 申請（專利權）人: 韶關學院
• 主分類號: G01N33/58
• 分類號: G01N33/58;G01N33/558
• 代理公司: 廣州駿思知識產權代理有限公司 44425
• 代理人: 程毅;楊金保

本發明涉及一種雙功能抗原引導的西地那非和他達拉非的抗體陣列檢測卡，包括襯板、以及依次粘附于襯板上且相鄰之間部分疊置的雙功能抗原釋放墊、通用熒光探針釋放墊、層析膜和吸水墊；所述雙功能抗原釋放墊包含由卵清白蛋白分別和西地那非、他達拉非偶聯而成的檢測抗原的基礎上偶聯特定標記物；所述通用熒光探針釋放墊包含標記有抗特定標記物抗體的通用熒光探針；所述層析膜設有檢測線A、檢測線B和質控線，分別固定抗西地那非、抗他達拉非抗體和抗特定標記物抗體。本發明可以用一種通用熒光探針解決所有檢測試劑的生產，降低了成本和提高質量控制可靠性；又增加了檢測的信號強度和穩定性，提高了檢測靈敏度和定量精密度。

技術領域

本發明涉及食品藥品安全檢測領域，尤其涉及雙功能抗原引導的西地那非和他達拉非的抗體陣列檢測卡。

背景技術

西地那非和他達拉非的俗名分別為“偉哥”和“超級偉哥”，都屬于磷酸二酯酶-5(PDE-5)抑制劑藥物，是風行全球的治療陽痿和壯陽藥物。由于這兩種效果明顯且仿制價格低廉，不法廠家在壯陽保健食品(以保健酒為主)中違法添加西地那非和他達拉非，以增強療效牟取不正當利益。這兩種PDE-5抑制劑藥物屬于處方藥，會引起一系列副作用，如頭痛、面部潮紅、消化不良、視力模糊和肌肉酸痛。美國FDA官方網頁發布的藥物不良反應信息顯示，服用PDE-5抑制劑藥物可能導致失明，還會導致聽力突然下降甚至失聰。因此，世界各國對PDE-5抑制劑藥物都嚴格按照處方藥管理，在沒有醫生指導下服用違法添加的該類藥品是危險的。其次，PDE-5抑制劑藥物與硝酸酯藥物的相互作用會導致嚴重的低血壓。硝酸酯藥物廣泛應用于糖尿病、高血壓,高血脂和冠心病的治療，患有這些疾病而又伴隨陽痿癥狀的病人，往往求助于天然壯陽藥品。如果這些病人服用了硝酸酯藥物的同時，在不知情的情況下，有服用了含違法的PDE-5抑制劑藥物的中成藥(保健品)，將會導致可怕的后果。患者不知情而長期服用含西地那非和他達拉非的保健食品，其危害性是非常嚴重的，必須加強對違法添加西地那非和他達拉非產品的監督檢查。

目前，檢測違法添加西地那非和他達拉非的確證方法是高效液相色譜、液-質聯用檢測。但是這些方法設備投入大、運行費用高，樣品預處理復雜，不能夠現場進行檢測，難以大規模對違法添加現象展開篩查。現有西地那非和他達拉非的快速檢測方法主要是化學檢測方法和薄層色譜檢測方法，檢測的靈敏度和抗干擾能力有提高的需要。

另外，由于免疫學檢測方法靈敏、特異、快速和廉價，在食品安全檢測領域也被廣泛應用。目前報道的針對小分子化合物的熒光免疫檢測方法，都是將量子點微球標記于檢測抗體上制備熒光探針，與檢測線上固定的檢測抗原形成免疫復合物，產生檢測信號。但該方法存在以下缺點：1、檢測不同的目標物質，需分別采用相應的檢測抗體連接量子點微球制備熒光探針，工作量大、良品率低、質量不穩定；2、檢測抗體通過化學反應制備熒光探針，可能影響抗體的結構和免疫親和力；3、缺乏信號放大機制，檢測信號強度偏弱、靈敏度較低。

已有的專利技術利用“三文治免疫復合物”原理進行檢測食品添加物，即利用針對“檢測抗原載體蛋白”的抗體，作為“通用抗體”的結合位點介導“通用探針”識別“檢測抗原”，形成三文治免疫復合物產生檢測信號，從而實現檢測目的。但是“檢測抗原載體蛋白”的免疫原性不穩定，蛋白質構象發生輕微的變化，都會導致“通用抗體”與“檢測抗原”親和力的下降，弱化“三文治免疫復合物”的形成，影響檢測信號的產生。

發明內容

基于上述檢測方法的缺點，本發明的目的是提供一種雙功能抗原引導的西地那非和他達拉非的抗體陣列檢測卡。

本發明采用的技術方案如下：