[發明專利]一種續斷藥材加工及含量測定方法、化合物及確認方法

有效

• 申請號: 202010310788.1
• 申請日: 2020-04-20
• 公開（公告）號: CN111297923B
• 公開（公告）日: 2022-03-15
• 發明（設計）人: 周濤;楊昌貴;肖承鴻;龔安慧;江維克
• 申請（專利權）人: 貴州中醫藥大學
• 主分類號: A61K36/185
• 分類號: A61K36/185;G01N30/88;C07J63/00;C07H1/08;C07H17/04;C07D307/46;A61K125/00
• 代理公司: 貴陽貴知知識產權代理事務所(普通合伙) 52115
• 代理人: 曾香蘭;蔣琳琳

1.一種用于續斷藥材的含量測定方法，其特征在于，所述含量測定方法用于測定使用以下加工方法而得的續斷藥材，具體方法為：采挖當天用水沖洗干凈，凈制除雜，60℃烘至含水量40％后，于25℃發汗5d，60℃烘干；

所述續斷藥材含量測定方法是利用HPLC法同時測定續斷中8個化合物含量，包括以下步驟：對照品溶液的制備、供試品溶液的制備、色譜條件的設定及測定方法；

對照品溶液制備包括以下步驟：取各對照品適量，精密稱定，用甲醇溶解，制成1.0520mg/mL川續斷皂苷VI、1.0160mg/mL續斷苷A、0.9700mg/mL續斷苷B、1.2060mg/mL當藥苷、1.1090mg/mL馬錢甘酸、1.0800mg/mL林生續斷苷I、1.0060mg/mL馬錢子苷及1.0240mg/mL5-羥甲基-2-呋喃甲醛各對照品儲備液；取各對照品儲備液適量，精密量取，加甲醇稀釋，制成0.1052mg/mL川續斷皂苷VI、0.0508mg/mL續斷苷A、0.0369mg/mL續斷苷B、0.0603mg/mL當藥苷、0.0554mg/mL馬錢甘酸、0.0540mg/mL林生續斷苷I、0.0503mg/mL馬錢子苷及0.0512mg/mL 5-羥甲基-2-呋喃甲醛的對照品混合溶液，搖勻，用0.45μm的微孔濾膜濾過，即得檢測用混合對照品溶液；

供試品溶液的制備包括以下步驟：取續斷樣品細粉0.4～0.6g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入20～40％乙醇25mL，密塞，稱定重量，浸泡20～40min后，在溫度為35℃、功率為250W、頻率為40KHz的條件下超聲處理20～40min，放冷，再稱定重量，用提取溶劑補足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續濾液5mL，置25mL容量瓶中，用提取溶劑稀釋至刻度，搖勻，用0.45μm的微孔濾膜濾過，即得供試品溶液；

色譜條件的設定及測定方法具體為：色譜條件：以C18為色譜柱，以乙腈為流動相A，0.1％磷酸為流動相B進行梯度洗脫；所述梯度洗脫具體為：0～5min，10％A，90％B；5～12min，10％～13.3％A，90％～86.7％B；12～23min，13.3％A,86.7％B；23～45min，13.3％～37％A，86.7％～63％B；45～55min，37％A，63％B；55～65min，37％～10％A，63％～90％B；65～70min，10％A，90％B；柱溫30℃；流速1.0mL/min；進樣體積20μL；檢測波長：川續斷皂苷VI為212nm，續斷苷A、續斷苷B為230nm，當藥苷、馬前苷酸、林生續斷苷I為237nm，馬錢子苷為246nm，5-羥甲基-2-呋喃甲醛為284nm；測定方法：精密吸取混合對照品溶液和續斷供試品溶液各20μL，注入液相色譜儀，以外標法計算續斷中川續斷皂苷VI、續斷苷A、續斷苷B、當藥苷、馬錢甘酸、林生續斷苷I、馬錢子苷、5-羥甲基-2-呋喃甲醛的含量。

2.根據權利要求1所述的含量測定方法，其特征在于，所述供試品溶液的制備包括以下步驟：取續斷樣品細粉0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入20％乙醇25mL，密塞，稱定重量，浸泡30min后，在溫度為35℃、功率為250W、頻率為40KHz的條件下超聲處理30min，放冷，再稱定重量，用提取溶劑補足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續濾液5mL，置25mL容量瓶中，用提取溶劑稀釋至刻度，搖勻，用0.45μm的微孔濾膜濾過，即得供試品溶液。