[發明專利]促進神經再生的活性多肽在材料表面共價接枝的方法及其應用

在審

• 申請號: 202010300230.5
• 申請日: 2020-04-16
• 公開（公告）號: CN111420119A
• 公開（公告）日: 2020-07-17
• 發明（設計）人: 張魯中;楊宇民;李貴才
• 申請（專利權）人: 南通大學
• 主分類號: A61L27/20
• 分類號: A61L27/20;A61L27/22;A61L27/54
• 代理公司: 南京瑞弘專利商標事務所(普通合伙) 32249
• 代理人: 許潔

1.一種促進神經再生的活性多肽在材料表面共價接枝的方法，為促進神經再生的多肽共價接枝到生物材料表面的體系，包括改性天然生物材料支架，促進神經再生多肽及多肽共價連接到生物材料支架，其特征在于：所述方法為通過硫醇-烯反應的多肽多肽接枝方法，具體操作如下：

步驟一、天然生物材料支架的制備：將生物相容性的天然多糖或蛋白質溶解，冷凍干燥，經酸堿或乙醇變性處理得到天然生物材料支架；

步驟二、甲基丙烯酰基改性的生物材料的制備：天然生物材料支架的羥基與3-(甲基丙烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷發生反應得到甲基丙烯?；男缘纳锊牧?；

步驟三、生物活性多肽的合成：首先通過計算機模擬篩選出一系列多肽，多肽的合成按照多肽固相合成的方法制備：以2-氯三苯甲基氯樹脂和Fmoc保護的氨基酸為起始原料，使用HBTU進行氨基酸之間酰胺鍵的縮合，最后經三氟乙酸從樹脂上切下多肽并除去保護基，經高效液相色譜純化得到這些生物活性多肽；

步驟四、多肽改性的生物材料的制備：將含生物活性多肽的水溶液加入甲基丙烯酰基改性的生物材料的溶液中，多肽中的巰基就會與生物材料表面的甲基丙烯?；l生硫醇-烯反應，得到定量高效制備的多肽改性的生物材料。

2.根據權利要求1所述的促進神經再生的活性多肽在材料表面共價接枝的方法，其特征在于：所述的天然多糖是殼聚糖或海藻酸；所述的蛋白質是絲素蛋白或膠原；所述的酸堿或有機醇是鹽酸，硫酸，氫氧化鈉，氫氧化鉀或乙醇。

3.根據權利要求2所述的促進神經再生的活性多肽在材料表面共價接枝的方法，其特征在于：所述的殼聚糖溶解在乙酸的水溶液中，冷凍干燥，經氫氧化鈉或氫氧化鉀處理，與3-(甲基丙烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷反應得到甲基丙烯酰基改性的殼聚糖。

4.根據權利要求2所述的促進神經再生的活性多肽在材料表面共價接枝的方法，其特征在于：所述的海藻酸溶解在氫氧化鈉的水溶液中，冷凍干燥，經鹽酸或硫酸處理，與3-(甲基丙烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷反應得到甲基丙烯?；男缘暮Ｔ逅?。

5.根據權利要求2所述的促進神經再生的活性多肽在材料表面共價接枝的方法，其特征在于：所述的膠原溶解在乙酸的水溶液中，冷凍干燥，經弱碳酸氫鈉水溶液中和，與3-(甲基丙烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷反應得到甲基丙烯酰基改性的膠原。

6.根據權利要求2所述的促進神經再生的活性多肽在材料表面共價接枝的方法，其特征在于：所述的絲素蛋白溶解在溴化鋰或氯化鈣/乙醇的水溶液中，冷凍干燥，經弱碳酸氫鈉水溶液中和，與3-(甲基丙烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷反應得到甲基丙烯?；男缘慕z素蛋白。

7.根據權利要求1所述的促進神經再生的活性多肽在材料表面共價接枝的方法，其特征在于：所述的3-(甲基丙烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷的濃度為0.001％-50％甲醇或乙醇溶液中的一種或兩種。

8.根據權利要求1所述的促進神經再生的活性多肽在材料表面共價接枝的方法，其特征在于：所述的生物活性多肽是具有促進神經再生的多肽CRSYIG，CRSYIG-Biotin，CGQRKDP，CGQRKDP-Biotin，CFKIDKK，CFKIDKK-Biotin中的一種或多種。

9.根據權利要求1所述的促進神經再生的活性多肽在材料表面共價接枝的方法，其特征在于：所述的生物活性多肽的水溶液可以是水溶液、磷酸鹽緩沖溶液、細胞培養液或生理鹽水中的一種或多種。

10.一種根據權利要求1所述的促進神經再生的活性多肽在材料表面共價接枝的方法的應用，其特征在于：本發明制備的多肽修飾的方法可以用于心腦血管，骨組織工程，神經組織工程以及皮膚組織工程的領域。