[發明專利]一種香豆素類抗凝血鼠藥的拉曼快速檢測方法

在審

• 申請號: 202010296465.1
• 申請日: 2020-04-15
• 公開（公告）號: CN111337475A
• 公開（公告）日: 2020-06-26
• 發明（設計）人: 劉洪林;蔣伊帆;蘇夢可;俞婷
• 申請（專利權）人: 合肥工業大學
• 主分類號: G01N21/65
• 分類號: G01N21/65
• 代理公司: 合肥天明專利事務所(普通合伙) 34115
• 代理人: 周靜

本發明公開了一種香豆素類抗凝血鼠藥的拉曼快速檢測方法，將香豆素類抗凝血鼠藥加入到食品或血清中，混合均勻后得到待測樣品；向待測樣品中加入萃取劑，將待測物從食品或者血清中提取出來，烘干去除萃取劑得到提取物后，將提取物再次溶解在溶劑中得到復溶樣品，將復溶樣品與SERS基底混合，轉移至容器中用拉曼儀器進行檢測。本發明所用的SERS基底是碘離子修飾的銀納米溶膠，能夠實現對鼠藥分子的SERS增強。整個檢測過程可以在一個小時內完成，不需要進一步復雜的操作過程，即可實時對食品或血清中香豆素類抗凝血鼠藥的現場檢測，為香豆素類抗凝血鼠藥的檢測提供一種快速、靈敏、操作簡便的檢測方法。

技術領域

本發明屬于分析化學領域，具體涉及一種香豆素類抗凝血鼠藥的拉曼快速檢測方法。

背景技術

抗凝血滅鼠劑是目前滅鼠效果最好、使用最安全的一大類慢性滅鼠劑。這一類滅鼠劑的作用機制主要是通過抑制維生素K環氧化物還原酶阻止肝臟生產凝血酶原，破壞血液的凝固功能，中毒目標死于內出血。維生素K₁是特效的解毒劑，中毒目標注射維生素K₁后凝血機制可恢復正常?？鼓獪缡笏幤贩N主要有4-羥基香豆素類、1，3-茚滿二酮類、4-硫代色素三種；其中4-羥基香豆素類包括殺鼠靈(華法林)、殺鼠迷、鼠得克、溴鼠靈、氟鼠靈、溴敵??；1，3-茚滿二酮類包括敵鼠鈉鹽和氯敵鼠等；4-硫代色素類常用的只有噻鼠靈。隨著毒鼠強、氟乙酰胺、氟乙酸鈉等劇毒型鼠藥被禁用，該類新一代的抗凝血鼠藥逐漸推廣使用。雖然這些鼠藥有滅鼠效率高且毒性相對低的特點，但是因使用不當導致的人和牲畜誤食或投毒事件時有發生，為配合中毒病人治療以及案件偵查，發展一種在實際樣品中高效快速靈敏的檢測方法很有必要。

目前測定抗凝血鼠藥的方法主要有氣相色譜法、高效液相色譜法(HPLC)、氣質聯用法(GC/MS)、薄層色譜法、液相色譜-質譜聯用法等。這些方法樣品前處理時間長，儀器昂貴且體積大，檢測周期長，只適用于實驗室中檢測，無法實現現場實時檢測。

在過去十年中，SERS成為一種超靈敏的檢測工具，其原理是分子吸附到某些納米級貴金屬(如金、銀、銅)基底中，使吸附物質的拉曼信號呈幾何倍數的增強，可用于表征、檢測和定量各種檢測目標物以及各種生物分子。納米結構的金屬基底能以非常低的濃度甚至單分子水平獲得目標物的振動信號。其具有檢測速度快、靈敏度高、前處理簡單且儀器便于攜帶的特點。使用SERS對微量樣品和單分子快速檢測的研究越來越多，從調研的情況來看，關于利用SERS檢測抗凝血鼠藥的研究尚未報道。

發明內容

本發明的目的是提供一種香豆素類抗凝血鼠藥的拉曼快速檢測方法，以解決現有技術中測試方法樣品前處理時間長、檢測費用昂貴、檢測周期長等問題，提供一種快速、靈敏、操作簡便的檢測方案。

為實現上述目的，本發明采用的技術方案為：

一種香豆素類抗凝血鼠藥的拉曼快速檢測方法，步驟如下：

(1)、將香豆素類抗凝血鼠藥加入到食品或血清中，混合均勻后得到待測樣品；

(2)、向待測樣品中加入萃取劑，經過萃取、離心，收集上清液；

(3)、上清液經過烘干得到提取物，將提取物溶解在溶劑中得到復溶樣品；

(4)、將復溶樣品與SERS基底混合，轉移至容器中用拉曼儀器進行檢測。

步驟(1)中，所述香豆素類抗凝血鼠藥為氟鼠靈、溴鼠靈、溴敵隆、殺鼠靈、殺鼠迷、鼠得克中的一種，其中殺鼠靈、溴鼠靈、氟鼠靈、溴敵隆的化學結構式如下：