[發明專利]評估肝內膽管癌預后的分子標志物、試劑盒及方法

有效

• 申請號: 202010291989.1
• 申請日: 2020-04-14
• 公開（公告）號: CN111458508B
• 公開（公告）日: 2023-05-23
• 發明（設計）人: 王紅陽;陳磊;邱辛瑤
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍海軍軍醫大學第三附屬醫院
• 主分類號: G01N33/574
• 分類號: G01N33/574;G01N33/573;G01N33/577
• 代理公司: 上海劍秋知識產權代理有限公司 31382
• 代理人: 施建婷;楊飛

本發明公開了一種評估肝內膽管癌預后的分子標志物、試劑盒及方法。評估肝內膽管癌預后的分子標志物為肝內膽管癌組織中的ALKBH5蛋白，該蛋白的表達量與肝內膽管癌的預后良好成正相關。評估肝內膽管癌預后的試劑盒含有ALKBH5蛋白表達量的檢測相關試劑。評估肝內膽管癌預后的方法包括以下步驟：1)檢測肝內膽管癌組織切片中ALKBH5蛋白的表達量；2)與預先設定的ALKBH5蛋白表達量閾值做比較，高于閾值評定為患者預后良好，否則評定為患者預后不佳。

技術領域

本發明屬于醫學生物檢測技術領域，具體涉及一種評估肝內膽管癌預后的分子標志物、試劑盒及方法。

背景技術

肝內膽管癌(intrahepatic?cholangiocarcinoma，ICC)是一種高度惡性的膽管癌亞型，起源于肝內膽管上皮，是發病率僅次于肝細胞肝癌(hepatocellular?carcinoma，HCC)的肝臟原發惡性腫瘤，約占肝臟原發惡性腫瘤的10-15％，近年來發病率和致死率均呈上升趨勢。臨床上，手術切除是早期肝內膽管癌的唯一治療方法。但是由于肝內膽管癌癥狀十分隱匿，發現時多已晚期，錯過手術的最佳時期。并且由于手術切除復發率極高(術后第一年發病率50％)，患者預后很差。晚期或不可手術切除的膽管癌患者，標準化療方案僅限于吉西他濱和順鉑，且效果有限，總的中位生存率小于1年，目前尚無已批準的二線治療藥物，缺乏有效治療手。近年來，肝內膽管癌中分子靶向治療藥物(靶向酪氨酸激酶等)的臨床試驗沒有取得理想的結果，尋找新的治療方法以延長患者生存時間是一個亟待解決的科學難題。

在生理狀態下，RNA?m6A甲基化修飾已被證明在組織發育與干細胞自我更新和分化、晝夜節律調節、調節T細胞穩態等很多正常生物過程中發揮關鍵作用。RNA?m6A甲基化修飾異常在癌癥的發生發展中也扮演了重要角色。RNA?m6A甲基化修飾在ICC或膽管癌中的作用尚無報道。

ALKBH5(alkB?homolog?5)是第二個發現的重要的m6A去甲基化酶。已有ALKBH5參與癌癥調控的報道：ALKBH5通過維持Foxm1表達和細胞增殖程序來維持膠質母細胞瘤干細胞的致瘤性；通過減少長鏈非編碼RNA?Kcnk15-As1甲基化來抑制胰腺癌的轉移；通過促進Nanog?mRNA的m6A去甲基化增強缺氧誘導的乳腺癌干細胞表型。然而，ALKBH5在肝內膽管癌中的作用尚未闡明，ALKBH5與肝內膽管癌患者預后的關系也沒有相關研究報道。

發明內容

針對肝內膽管癌復發率高的問題，本發明旨在提供一種評估肝內膽管癌預后的分子標志物，該分子標志物也是ALKBH5的一種新的應用。

本發明人經過廣泛而深入的研究，首次發現采用免疫組化方法檢測ALKBH5蛋白在人肝內膽管癌組織中的表達量，能夠判斷肝內膽管癌患者預后。

本發明的第一方面，提供了一種評估肝內膽管癌預后的分子標志物，所述分子標志物為ALKBH5蛋白。

進一步，所述分子標志物為肝內膽管癌組織中的ALKBH5蛋白，該蛋白的表達量與肝內膽管癌的預后良好成正相關。

優選地，所述預后包括檢測、療效評估、復發監控。

本發明第二方面，提供了所述評估肝內膽管癌預后的分子標志物在制備評估肝內膽管癌預后的試劑或試劑盒中的應用。

優選地，所述試劑或試劑盒采用免疫組化方法檢測ALKBH5蛋白在肝內膽管癌組織中的表達量。

進一步，本發明提供了一種評估肝內膽管癌預后的試劑盒，所述試劑盒包括ALKBH5蛋白表達量的檢測相關試劑。

優選地，所述評估肝內膽管癌預后的試劑盒包括ALKBH5的單克隆抗體或多克隆抗體。

可選地，所述ALKBH5多克隆抗體為SIGMA公司的產品，貨號為HPA007196。

優選地，所述評估肝內膽管癌預后的試劑盒包括免疫組化試劑。