[發明專利]miRNA-sc-miR-145在魚類LC-PUFA合成的應用

有效

• 申請號: 202010287943.2
• 申請日: 2020-04-14
• 公開（公告）號: CN111455064B
• 公開（公告）日: 2022-06-28
• 發明（設計）人: 陳翠英;王樹啟;游翠紅;張媚;胡宇
• 申請（專利權）人: 汕頭大學
• 主分類號: C12Q1/6888
• 分類號: C12Q1/6888;C12N15/113
• 代理公司: 廣州三環專利商標代理有限公司 44202
• 代理人: 曹江;周增元

本發明涉及miRNA?sc?miR?145在魚類LC?PUFA合成的應用，所述魚類為黃斑藍子魚，所述miRNA?sc?miR?145的序列表如SEQ ID NO：1所示。所述miRNA?sc?miR?145的前體序列如SEQ ID NO：2所示；所述miRNA?sc?miR?145的前體序列的DNA序列如SEQ ID NO：3所示。本發明通過不同脂肪源飼料飼喂黃斑藍子魚驗證了miR?145對不同脂肪源的響應差異，得出miR?145及其前體pre?miR?145在調控長鏈多不飽和脂肪酸合成代謝中起重要作用，進一步進行了分子生物學實驗驗證，證明了本發明藍子魚miR?145及其前體pre?miR?145在LC?PUFA合成中起重要作用，藍子魚miR?145及其前體pre?miR?145的敲低表達可促進魚體內LC?PUFA的合成。本發明的miR?145可以作為藍子魚長鏈多不飽和脂肪酸合成能力相關的分子標記，在遺傳輔助育種中具有重要的實際應用價值。

技術領域

本發明屬于魚類分子標記制備技術領域，具體涉及miRNA-sc-miR-145在魚類LC-PUFA合成的應用。

背景技術

microRNA(miRNA)是一類長度為18-25個核苷酸的單鏈非編碼小RNA，它的轉錄起始于細胞核，最初轉錄形成長度約60-90個核苷酸的且具有典型莖環結構的pre-miRNA，隨后pre-miRNA被轉運出核，在細胞質中被Dicer酶作用，加工成成熟的miRNA。miRNA通過序列互補可識別特定的目的mRNA的3’非編碼區(3’UTR)，使之降解或抑制翻譯，參與基因轉錄后水平調控。

長鏈多不飽和脂肪酸(LC-PUFA)是脊椎動物維持正常生長發育的必需脂肪酸(EFA)，主要包括二十碳五烯酸(20:5n-3，EPA)，二十二碳六烯酸(22:6n-3，DHA)和花生四烯酸(20:4n-6，ARA)。一般認為，淡水魚和鮭鱒魚類具有將C₁₈多不飽和脂肪酸(C₁₈PUFA)轉化合成C_20-22LC-PUFA的能力，而海水魚類大多不具有此種能力或該能力很弱，故其配合飼料中需要添加富含LC-PUFA的魚油才能滿足機體正常生長發育對EFA的需要。隨著水產養殖業的快速發展，魚油需求的增加與供應不足的矛盾日益尖銳，迫切需要開發其它替代脂肪源，而資源豐富、價格低廉的植物油無疑成為替代的首選。但是，由于植物油缺乏LC-PUFA，其替代魚油不僅影響了水產養殖魚類的生長與健康，還明顯降低了魚體LC-PUFA的含量，很大程度上限制了植物油在配合飼料上的應用。研究魚類LC-PUFA合成代謝調控的分子機制，培育出具有LC-PUFA合成能力高的魚類新品種是提高魚體內LC-PUFA含量，減少飼料魚油使用量的一個重要途徑。

黃斑藍子魚(Siganus canaliculatus)是首個被發現具有將C₁₈PUFA轉化合成C_20-22LC-PUFA能力的海水魚類，并在該魚中克隆到了兩種脂肪酸去飽和酶(△4Fad和△6△5Fad)及兩種碳鏈延長酶(Elovl5和Elovl4)基因，從而為研究魚類LC-PUFA合成調控機制提供了較為理想的模式魚類。

發明內容

本發明提供一種與魚類LC-PUFA合成相關的miRNA-sc-miR-145及其應用，以解決現有技術存在的問題。

miRNA-sc-miR-145在魚類LC-PUFA合成的應用。

優選的，所述魚類為黃斑藍子魚。

所述miRNA-sc-miR-145的序列表如SEQ ID NO：1所示。

所述miRNA-sc-miR-145的前體序列如SEQ ID NO：2所示；所述miRNA-sc-miR-145的前體序列的DNA序列如SEQ ID NO：3所示。

miRNA-sc-miR-145在制備魚類LC-PUFA合成制劑中的應用。

優選的，所述制劑為液體注射劑。