[發明專利]含庚糖鏈的寡糖化合物在制備幽門螺旋桿菌疫苗中的應用

有效

• 申請號: 202010285718.5
• 申請日: 2020-04-13
• 公開（公告）號: CN111467368B
• 公開（公告）日: 2021-05-28
• 發明（設計）人: 胡靜;尹健
• 申請（專利權）人: 江南大學
• 主分類號: A61K31/785
• 分類號: A61K31/785;C07H3/06;C07H1/00;A61P31/04;A61P1/04
• 代理公司: 哈爾濱市陽光惠遠知識產權代理有限公司 23211
• 代理人: 張勇

本發明公開了含庚糖鏈的寡糖化合物在制備幽門螺旋桿菌疫苗中的應用，屬于醫藥領域。本發明通過化學合成得到的不同抗原糖鏈片段，并固定于芯片表面制備得到合成寡糖芯片，結合動物免疫實驗和合成寡糖芯片分析，利用抗血清中針對多糖產生的抗體進行檢測，探究合成寡糖與免疫原性的關系。本發明探究得到抗原中庚糖鏈為重要免疫表位，即含有α?(1→3)庚糖鏈的糖抗原片段具有優異的免疫活性，可用于制備、開發預防和治療幽門螺旋桿菌感染的疫苗。

技術領域

本發明涉及含庚糖鏈的寡糖化合物在制備幽門螺旋桿菌疫苗中的應用，屬于醫藥領域。

背景技術

幽門螺旋桿菌(Helicobacter pylori)是一種微需氧型的革蘭氏陰性致病菌，作為最廣泛的細菌病原體之一，在世界人口的感染率約為50％(J.G.Kusters et al.,ClinMicrobiol Rev,2006,19:449)。研究表明，幽門螺旋桿菌是引發胃炎、胃萎縮、消化性和十二指腸潰瘍等疾病的主要病因(B.Molnar et al.,Dig Dis,2010,28:604)。另外，由于幽門螺旋桿菌的感染與增加患胃癌的風險直接相關(L.E.Wroblewski et al.,Clin MicrobiolRev,2010,23:713；C.Prinz et al.,World J Gastroenterol,2006,12:5458)，所以在1994年，世界衛生組織(WHO)明確將其歸類為I型人類致癌因子(Lyon:IARC,1994,61:177)。研究表明，幽門螺旋桿菌的感染使患胃癌的風險增加了2-8倍(Helicobacter and CancerCollaborative Group,Gut,2001,49:347；F.Kamangar et al.,J Natl Cancer Inst,2006,98:1445)。

目前，針對幽門螺旋桿菌感染的治療主要是以鉍劑或質子泵抑制劑聯合使用抗生素的三聯或四聯療法。但是，基于抗生素(以克拉霉素為主)的治療存在許多弊端，長期使用抗生素不僅導致了細菌耐藥性的產生(G.Ayala et al.,World J gastroenterol,2014,20:1450；N.Vakil,Cancer J Gastroenterol,2003,17:30B)，而且基于抗生素的治療并不能阻止幽門螺桿菌重復感染的風險，因此迫切需要開發新的療法用于幽門螺桿菌的治療。而幽門螺桿菌疫苗被認為是控制這一全球性感染疾病最有效的方法(M.Selgrad et al.,Curr Opin Pharmacol,2008,8:593)。雖然研究人員已經對抗幽門螺旋桿菌疫苗的研發做出了許多努力，例如2009年由尿素酶B亞基和不耐熱腸毒素B亞基組成的融合蛋白疫苗在中國獲得許可(M.Zeng et al.,Lancet,2015,386:1457)，但迄今為止，尚未有針對幽門螺桿菌感染的疫苗成功上市。脂多糖(LPS)O-抗原作為幽門螺桿菌細胞表面的主要成分，被認為是極具吸引力的疫苗候選物(S.Yu et al.,Infection and Immunity,2007,75:2974；D.Ren et al.,Vaccine,2011,29:4210)。研究表明發展糖類疫苗抵抗幽門螺旋桿菌的感染是非常合理的，以糖類為基礎的綴合疫苗已經成功地用于防止系統性感染和抑制宿主定植(J.H.Passwell et al.,Infection and Immunity,2001,69:1351)。然而由于提取得到的脂多糖存在結構不夠專一，并且容易附帶結構類似雜質的特點，實驗重復性差，限制了后續的疫苗治療方面的應用。因此，開發一種結構專一且可明確化學合成，同時還能夠具有優異的抑制幽門螺旋桿菌的效果的疫苗是具有迫切需求的。

發明內容

本發明克服糖類結構的結構性能多樣性和難以預期性，基于化學合成的手段獲得表面糖抗原寡糖，通過氨基連接臂將合成寡糖固定于芯片表面制備合成寡糖芯片，通過動物免疫獲得多糖免疫的抗血清，通過合成寡糖芯片對其抗體組成和滴度進行分析，從分子水平分析其免疫表位，探究了各種表面寡糖鏈與免疫活性的構效關系。為制備、開發預防和治療幽門螺旋桿菌感染的疫苗提供合成糖抗原。