[發明專利]一種從腌漬腸衣鹽水中提取肝素鈉的方法在審
| 申請號: | 202010280454.4 | 申請日: | 2020-04-10 |
| 公開(公告)號: | CN111363065A | 公開(公告)日: | 2020-07-03 |
| 發明(設計)人: | 方秋華;魏海濤;李金行;向亞林;余細紅;張炳順;陳曉虹;劉初亮;劉鑠佳;劉佳華 | 申請(專利權)人: | 揭陽市潤達腸衣有限公司;廣東百試特生物技術研究院有限公司 |
| 主分類號: | C08B37/10 | 分類號: | C08B37/10 |
| 代理公司: | 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102 | 代理人: | 孫鳳俠 |
| 地址: | 522000 廣東省揭陽*** | 國省代碼: | 廣東;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 腌漬 腸衣 鹽水 提取 肝素鈉 方法 | ||
1.一種從腌漬腸衣鹽水中提取肝素鈉的方法,其特征在于,包括以下步驟:
S1、酶解:調節腌漬腸衣鹽水的含鹽量和pH,在40~45℃溫度下加入復合酶酶解3~4h,酶滅活、過濾,得濾液;
S2、樹脂吸附、洗脫:調節步驟S1所得濾液pH,加入FPA98 Cl型離子交換樹脂攪拌吸附3~4h,過篩,收集的樹脂用3~4%鹽水洗滌1~2遍,瀝干,用12~14%鹽水和15~16%鹽水依次洗脫,合并,得洗脫液;
S3、膜分離:將步驟S2所得洗脫液在不斷攪拌的情況下用聚丙烯腈膜或聚砜酰胺膜進行膜分離,當截留體積占步驟S2所得洗脫液總體積15~20%時,停止抽濾,得截留液;
S4、沉淀劑除蛋白:于步驟S3所得截留液中加入蛋白沉淀劑,所述蛋白沉淀劑與截留液的重量體積比為1:(2000~3000)(g/ml),充分攪拌、沉淀,過濾,得濾液;
S5、醇沉:于步驟S4所得濾液中加入體積比為1:(1.5~2.0)的95%乙醇,攪拌均勻,沉淀8h或以上,收集沉淀物,真空干燥,即得;
其中,所述復合酶為由胰蛋白酶和堿性蛋白酶按重量比1:(1~5)組成。
2.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,步驟S1中,所述復合酶的添加量為0.05~0.2%。
3.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,步驟S1中,所述含鹽量調節為3~4%。
4.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,步驟S1中,所述pH調節為8.0~8.8。
5.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,步驟S2中,所述pH調節前,濾液需降溫至58~62℃,pH調節為8.2~8.5。
6.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,步驟S2中,所述12~14%鹽水的體積為樹脂體積的3~4倍。
7.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,步驟S2中,所述15~16%鹽水的體積為樹脂體積的1~2倍。
8.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,步驟S3中,所述聚丙烯腈膜或聚砜酰胺膜的截留分子量為2000~4000。
9.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,步驟S4中,所述蛋白沉淀劑為YNB 9921型。
10.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,所述方法制備得到的肝素鈉效價大于100U/mg。
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