[發明專利]一種蘆根多糖及其制備方法和用途

有效

• 申請號: 202010279849.2
• 申請日: 2020-04-10
• 公開（公告）號: CN111320708B
• 公開（公告）日: 2021-08-31
• 發明（設計）人: 劉克海;周睿美;崔明曉;王玉
• 申請（專利權）人: 上海海洋大學
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00;A61P29/00;A61P35/00;A23L33/125
• 代理公司: 上海伯瑞杰知識產權代理有限公司 31227
• 代理人: 周一新

本發明公開了一種蘆根多糖及其制備方法和用途，屬于天然高分子領域。蘆根多糖PRP?2具有如下式所示的由糖殘基通過α?L?Fucp?(1→，→2,3)?α?L?Fucp?(1→，→2)?β?D?Galp?(1→依次連接的單元結構：其平均相對分子量為20332Da，主要由半乳糖、巖藻糖和鼠李糖的單糖組成，可通過蘆根經水提醇沉為粗多糖后經陰離子交換柱和凝膠色譜柱層析分離純化得到。本發明的蘆根多糖PRP?2可以保護RAW246.7巨噬細胞免受LPS誘導的細胞毒性損傷并抑制其NO的分泌，具有天然抗炎活性，可用于制備食品或藥品用天然抗炎成分，特別是用于抗腫瘤藥物。

技術領域

本發明涉及天然高分子領域，具體地說，是一種具有抗炎作用的蘆根多糖及其制備方法和用途。

背景技術

蘆根，別稱蘆茅根、葦根、蘆頭、蘆柴根，生于江河湖澤、池塘溝渠沿岸和低濕地，是歷版中國藥典和眾多醫藥古籍收錄的常用中藥品種，蘆根全年均可采挖，除去芽、須根及膜狀葉，鮮用或曬干。蘆根歸肺經、胃經，其功能為清熱生津、除煩、止嘔、利尿，可用于熱病煩渴、胃熱嘔吐、肺熱咳嗽、肺癰吐膿、熱淋澀痛，可內服，煎湯或鮮品搗汁，也可外用，取適量煎湯洗。

蘆根在中國各地均有分布，其化學成分較復雜，其中多糖成分比例較大，此外還含有蛋白質、脂肪、天冬酰胺、黃酮類、蒽醌類、酚類、甾體類和小分子酚酸等多種成分。研究表明，蘆根多糖具有多種生物活性，例如降血脂活性、抗氧化活性、抗菌活性、保肝和體外抗腫瘤活性等，目前國內外對于純化的蘆根多糖及其結構鑒定和抗炎活性尚未報道。

發明內容

針對現有技術中的不足，本發明從蘆根中分離出多糖，通過測定其平均相對分子量，并分析單糖組成、糖苷鍵的種類及連接順序確定其具有天然的生物抗炎活性，具體技術方案如下所述：

本發明提供了一種具有生物抗炎活性的蘆根多糖PRP-2，具有如式Ⅰ所示的由三種糖殘基通過α-L-Fucp-(1→，→2, 3)-α-L-Fucp-(1→，→2)-β-D-Galp-(1→依次連接的單元結構：

（式Ⅰ）

式Ⅰ中，n＞1，且為整數。

根據本發明所述蘆根多糖PRP-2的一些實施方式，其平均相對分子量為20332Da。

根據本發明所述蘆根多糖PRP-2的一些實施方式，其由包含但不限于半乳糖、巖藻糖和鼠李糖的單糖組成，且半乳糖、巖藻糖和鼠李糖的摩爾比為39.50:41.15:1。

本發明還提供上述任一蘆根多糖PRP-2的制備方法，包括將蘆根經過粗多糖提取和分離純化處理的步驟；其中，

所述粗多糖提取過程包括將所述蘆根經過

（a）除雜、清洗和細碎；和

（b）水提醇沉后去除沉淀中蛋白質，得到蘆根粗多糖的分步驟；

所述分離純化處理過程包括將所述蘆根粗多糖經過

（c）陰離子交換柱層析，合并洗脫液后經濃縮、透析和冷凍干燥得到蘆根多糖PRP-1；和

（d）凝膠色譜柱層析，合并洗脫液后經濃縮、透析和冷凍干燥得到蘆根純多糖PRP-2的分步驟。

根據本發明所述蘆根多糖PRP-2的制備方法的一些實施方式，通過Sevag法去除沉淀中蛋白質。

根據本發明所述蘆根多糖PRP-2的制備方法的一些實施方式，采用DEAE-52纖維素離子交換柱，并依次經濃度為0、0.1mol/L、0.3mol/L和0.5mol/L的NaCl溶液進行梯度洗脫。