[發明專利]一種金耳子實體直接再生培養法

在審

• 申請號: 202010250904.5
• 申請日: 2020-04-01
• 公開（公告）號: CN111328627A
• 公開（公告）日: 2020-06-26
• 發明（設計）人: 李榮春;楊林雷
• 申請（專利權）人: 云南菌視界生物科技有限公司
• 主分類號: A01G18/00
• 分類號: A01G18/00
• 代理公司: 中原信達知識產權代理有限責任公司 11219
• 代理人: 楊青;穆德駿

本發明屬于食用菌栽培領域，具體涉及一種金耳子實體直接再生培養法，以金耳子實體組織塊單獨培養，或與外源毛韌革菌一起培養，從而將小的金耳子實體組織塊直接生長成大的金耳子實體。該培養法可提高金耳菌種制作的成功率，以及金耳栽培袋的接種成功率，縮短培養周期，有利于金耳的現代化、工廠化栽培。

技術領域

本發明屬于食用菌栽培領域，具體涉及一種金耳子實體直接再生培養法。

背景技術

現有腐生性食用菌栽培都是由子實體或菌絲體培養形成菌絲體的純培養物(固體或液體菌種)，再用菌絲體的純培養物(固體或液體菌種)轉接到培養料上培養菌絲體，然后誘導菌絲體形成子實體原基，最后培養形成子實體(產品)。木腐菌以香菇^[1,2,3,4]、金針菇^[5,6,7]為代表；草腐菌以雙孢蘑菇^[8]、草菇^[9,10,11]為代表，具體工藝如圖1所示。

現有寄生菌(銀耳和金耳)培養工藝為：混合菌種接種或兩種純菌種混合后接種，先培養出混合菌絲體，再誘導原基產生，最后發育為子實體(蘑菇)。例如，銀耳^{[12,13,14,15,16]}的培養工藝可參見圖2，而金耳^{[17,18,19,20,21,22,23]}的培養工藝參見圖3。

可見，現有的食用菌培養方法都需經歷菌種轉接到培養料上培養菌絲體，然后誘導菌絲體形成子實體原基，再培養子實體原基逐漸長成小子實體，最后培養形成子實體(產品)的過程。

然而，現有金耳培養工藝中轉接時以寄主和寄生菌的混合培養物進行接種，或以兩者的分別培養物混合后進行接種，接種到菌種培養基或栽培袋后，兩者的混合物首先需要萌發菌絲，以菌絲的形式生長到一定的生理成熟度后通過誘導產生金耳原基(混合菌絲培養之目的是形成金耳子實體原基，而原基是必要步驟)，然后再經過出菇管理獲得金耳子實體。金耳子實體培養的關鍵在于純金耳菌絲與毛韌革菌菌絲之間的合適配比，只有兩者配比合適時才能培養出金耳子實體，反之則不能獲得金耳子實體。現行的培養工藝中純金耳菌絲與毛韌革菌菌絲兩者以混合物的形式轉接到培養基后兩者需重新建立寄生關系，此過程的機制目前并未研究清楚，所以經常出現兩者配比不合適的情況，在制作菌種時導致出現無效菌種和菌種狀態不一致，在接種栽培袋時導致出現不出菇的菌包(25％)和出菇不整齊(子實體一潮菇成熟度一致率40％)，且培養周期長達70～80天。此外，現有金耳子實體培養技術不適用于現代化、工廠化出菇的需求。

發明概述

本發明提出一種金耳子實體直接再生培養法，用于提高金耳菌種制作的成功率(即，再生率)，以及金耳栽培袋的接種成功率，縮短培養周期，并且適應金耳現代化、工廠化栽培的工藝要求。

發明人在進行金耳基礎生物學研究時發現，在適宜配方的培養基中金耳子實體組織塊不按照“組織脫分化形成菌絲，然后菌絲再分化形成子實體”的過程發育，可以直接再生長大為新的子實體，其原理為：金耳子實體是異質型子實體，由金耳和毛韌革菌兩種菌組成的復合體(即金耳子實體自身同時含兩個物種)，純金耳菌絲的生長要依靠毛韌革菌為其提供營養。由于毛韌革菌菌絲有較強的活力和較強的分解培養基的能力，在金耳子實體組織塊接種到適宜配方的培養基后，其中的毛韌革菌菌絲能快速萌發生長，分解利用培養基內的養分，使金耳組織塊的營養供應途徑在其脫分化之前快速重建，從而使小塊的金耳子實體組織在不進行脫分化、再分化的情況下直接恢復生長的能力。即小塊金耳子實體中的毛韌革菌和金耳菌的菌絲細胞都可以直接進行細胞分裂、生長，并再生為新的完整的大的金耳子實體。一個1克的金耳子實體小塊可以直接生長成為300克、甚至400克大的完整的子實體(蘑菇)，從而實現栽培的目的。

基于上述發現和原理，發明人發明了一種金耳子實體直接再生培養法(如圖4所示)，其特點是在整個培養過程中，金耳培養物始終以部分或完整的金耳子實體的形態存在，不發生脫分化為菌絲的過程。