[發明專利]防治植物病蟲害的協同促根抗病菌的篩選方法和菌劑

有效

• 申請號: 202010248813.8
• 申請日: 2020-04-01
• 公開（公告）號: CN111423984B
• 公開（公告）日: 2022-05-13
• 發明（設計）人: 田永強;剌世凱;高麗紅;張旭;李紅
• 申請（專利權）人: 中國農業大學
• 主分類號: C12N1/02
• 分類號: C12N1/02;C12N1/20;A01N63/27;A01P5/00;C12R1/38
• 代理公司: 北京眾合誠成知識產權代理有限公司 11246
• 代理人: 黃家俊

本發明公開了屬于生物防治技術領域的一種防治植物病蟲害的協同促根抗病菌的篩選方法和菌劑，步驟如下：在健康土壤中加入特異活性碳源，得到馴化土壤；在其中種植植物，采用活體生物刺激法處理植物，使植物患病；采集患病植物的根系病害部位與未患病植物的相同部位的微生物，進行菌群檢測，篩選出現富集的微生物菌群；采集患病植物的根系病害部位，制備成接種液，篩選出富集的微生物菌群，得到協同促根抗病菌種。本發明的篩選方法，顯著提高了篩選概率，兼顧了微生物間的協同作用及微生物與作物根系的親和性，很大程度上保證了植株對生防菌的適應能力，更加有效且生態環保。

技術領域

本發明屬于生物防治技術領域，具體涉及一種防治植物病蟲害的協同促根抗病菌的篩選方法和菌劑。

背景技術

目前植物根結線蟲病害的防治主要采用化學藥劑防治(如棉隆和威百畝)和物理防治(如高溫悶棚和大水漫灌)的方法。但是，化學藥劑本身具有環境污染性和人體毒害性，長期施用不僅會提高根結線蟲自身的抗性而降低藥劑藥效，而且容易對非靶目標(如無害土壤微生物和動物)造成毒害。此外，物理防治不僅會破壞土壤理化性狀(如破壞土壤團聚體結構、造成養分失衡)，而且對有益微生物群落和作物生長不利。因此，通過生物措施抑制土壤中根結線蟲的繁殖和阻控作物根結線蟲病害的發生是亟待解決的重要問題之一。

已有一些研究表明，土壤中存在潛在的對植食性線蟲具有拮抗作用的微生物，可以預防植物病害，有望成為化學制劑的環境友好型代替品。但是，現有篩選可以提高作物根系耐根結線蟲的微生物多集中在單一菌株上，往往忽略了微生物間的協同作用，且忽略了微生物與作物根系的親和性。

以根結線蟲為例，目前，大多數篩選抗根結線蟲生防菌的方法主要利用廣譜性培養基進行大量篩選驗證，不僅工作量大，而且篩選概率小；相關篩選方法的定向選擇性差，而且具有明顯盲目性。

發明內容

針對上述問題，本發明提出了一種防治植物病蟲害的協同促根抗病菌的篩選方法，包括步驟如下：

1)在健康土壤中加入特異活性碳源，得到馴化土壤；

2)在馴化土壤中種植植物，采用活體生物刺激法處理植物，使植物患病；

3)采集患病植物的根系病害部位與未患病植物的相同部位的微生物，進行菌群檢測，篩選出患病植物相對于未患病植物出現富集的微生物菌群；

4)采集患病植物的根系病害部位，制備成接種液，進一步篩選出步驟3)中確定的所述富集的微生物菌群，得到協同促根抗病菌種。

所述特異活性碳源：健康土壤的質量比為6:94-100；

所述特異活性碳源包括蚯蚓糞、檸條粉和棕櫚果串生物炭；進一步的，所述蚯蚓糞：檸條粉：棕櫚果串生物炭的質量比為(1-2):(0.5-1.5):(1-2)。

所述活體生物刺激法包括：用病原體侵染植物體一段時間；

進一步的，所述活體生物刺激法包括：在植物第二片真葉完全展開后接種病原體，然后進行培養；所述培養時間至少為病原體的一個生長周期；

所述病原體為害蟲、細菌或病毒；進一步的，所述病原體為根結線蟲；例如，南方根結線蟲；所述植物為黃瓜。

一種防治南方根結線蟲的協同促根抗病菌劑，所述菌劑包括以下菌種：

Pseudomonas oleovorans subsp.Lubricantis、Pseudomonaschloritidismutans、Pseudomonas plecoglossicida、Pseudomonas chengduensis和Pseudomonas taiwanensis DSM 21245。