[發明專利]一種發酵冬蟲夏菌粉片的藥效評價方法

在審

• 申請號: 202010247029.5
• 申請日: 2020-03-31
• 公開（公告）號: CN111413476A
• 公開（公告）日: 2020-07-14
• 發明（設計）人: 李鐘
• 申請（專利權）人: 四川大學華西第四醫院
• 主分類號: G01N33/15
• 分類號: G01N33/15
• 代理公司: 北京國坤專利代理事務所(普通合伙) 11491
• 代理人: 趙紅霞

本發明公開了一種發酵冬蟲夏菌粉片的藥效評價方法，具體涉及中成藥的體外藥效評價領域，包括以下步驟：步驟一，在可密封的容器內部加入稀鹽酸溶液100ml，并調節稀鹽酸溶液的pH值至2?3；步驟二，取發酵冬蟲夏菌粉片20g，研磨成細粉，將粉末狀的發酵冬蟲夏菌粉片置于廣口燒瓶內，加入50ml的乙醚后攪拌均勻，過濾去溶液中的浮渣和雜質，待乙醚揮發后，將廣口燒瓶內的細粉倒出留作備用；步驟三，將步驟二中經處理后的發酵冬蟲夏菌粉片細粉倒入至步驟一中經過稀釋的稀鹽酸溶液內。本發明通過獲取發酵冬蟲夏菌粉片的藥效析出物，可以判斷發酵冬蟲夏菌粉片是否具有藥效有效溶出的效果，從而推斷并評價發酵冬蟲夏菌粉片的藥效，適合于產業中應用。

技術領域

本發明涉及中成藥的體外藥效評價領域，更具體地說，本發明涉及一種發酵冬蟲夏菌粉片的藥效評價方法。

背景技術

冬蟲夏草是一種蟲菌共生體，是冬蟲夏草真菌感染蝙蝠蛾幼蟲，以其體內的有機質作為營養能源來進行寄生生活，經過不斷生長發育和分化后，最終菌絲體扭結并形成子座伸出寄主外殼，從而形成的一種特殊的蟲菌共生的生物體。是一種傳統的名貴滋補中藥材，有調節免疫系統功能，抗腫瘤、抗疲勞等多種功效。

發酵冬蟲夏草菌粉，即蝙蝠蛾被毛孢菌粉，是從青海新鮮冬蟲夏草中分離得到的麥角菌科真菌冬蟲夏草的無性世代——蝙蝠蛾被毛孢菌種，經液體發酵培養所得菌絲體的干燥粉末。

但發酵冬蟲夏菌粉制劑的活性成份復雜，不能也無法采用化學藥物的溶出試驗進行對比，而開展臨床試驗再驗證藥效又將耗費大量的人力物力及時間。因此非常急迫的需要有一種既方便又能客觀的反映體外藥效一致性的方法。

發明內容

為了克服現有技術的上述缺陷，本發明的實施例提供一種發酵冬蟲夏菌粉片的藥效評價方法，通過采用稀鹽酸模擬人體中的胃酸，將發酵冬蟲夏菌粉片經過乙醚過濾后，置于與胃酸pH值相近的稀鹽酸溶液中進行浸泡，模擬發酵冬蟲夏菌粉片在胃酸中的環境，使發酵冬蟲夏菌粉片的有效成分析出，然后在低壓的環境下，對含有發酵冬蟲夏菌粉片的稀鹽酸溶液進行加熱，使溶液中的水分得以在較低的溫度下完成蒸發，同時鹽酸在加熱的過程中揮發，獲取發酵冬蟲夏菌粉片的藥效析出物，可以判斷發酵冬蟲夏菌粉片是否具有藥效有效溶出的效果，從而推斷并評價發酵冬蟲夏菌粉片的藥效，適合于產業中應用。

為實現上述目的，本發明提供如下技術方案：一種發酵冬蟲夏菌粉片的藥效評價方法，具體包括以下步驟：

步驟一，在可密封的容器內部加入稀鹽酸溶液100ml，并調節稀鹽酸溶液的pH值至2-3；

步驟二，取發酵冬蟲夏菌粉片20g，研磨成細粉，將粉末狀的發酵冬蟲夏菌粉片置于廣口燒瓶內，加入50ml的乙醚后攪拌均勻，過濾去溶液中的浮渣和雜質，待乙醚揮發后，將廣口燒瓶內的細粉倒出留作備用；

步驟三，將步驟二中經處理后的發酵冬蟲夏菌粉片細粉倒入至步驟一中經過稀釋的稀鹽酸溶液內，然后攪拌均勻，并將容器密封，置于室內常溫下放置1-5小時后，留作備用；

步驟四，將裝有發酵冬蟲夏菌粉片和稀鹽酸溶液混合物的容器打開，置于低壓環境下，對容器進行加熱使其內部溶液升溫至70攝氏度，待容器內的稀鹽酸和水份蒸發后，獲取發酵冬蟲夏菌粉片析出物；

步驟五，將發酵冬蟲夏菌粉片析出物取出，選取消毒后的玻璃容器，將發酵冬蟲夏菌粉片析出物添加至玻璃容器內部，并向玻璃容器添加與發酵冬蟲夏菌粉片析出物質量比為2:1的去離子水，攪拌均勻后，獲取析出物溶液，將析出物溶液進行液相檢測，獲取析出物中的蟲草指標含量。

在一個優選地實施方式中，所述步驟二中，發酵冬蟲夏菌粉片細粉的顆粒目數為200-300目。

在一個優選地實施方式中，所述步驟四中，低壓環境的大氣壓強具體為311.57百帕。

在一個優選地實施方式中，所述步驟五中，蟲草指標包括蟲草素含量、蟲草多糖含量和蟲草酸含量。