[發明專利]ACE2-Fc融合蛋白及其用途

在審

• 申請號: 202010218534.7
• 申請日: 2020-03-25
• 公開（公告）號: CN113444710A
• 公開（公告）日: 2021-09-28
• 發明（設計）人: 李仁柯;劉源;劉辰;姜軍娜;徐艷玲
• 申請（專利權）人: 上海英脈德醫療科技有限公司
• 主分類號: C12N9/48
• 分類號: C12N9/48;C12N15/62;A61K38/48;A61P31/14;A61P11/00
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司 31100
• 代理人: 韋東

1.一種融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白含ACE2部分和Fc段；其中，所述ACE2部分選自：ACE2蛋白胞外域或其突變體，和所述胞外域的含ACE2蛋白PD結構域的片段或其突變體；所述Fc段選自IgG1、IgG2和IgG4的Fc段或其突變體，且所述IgG1的Fc段無ADCC活性。

2.如權利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述ACE2蛋白胞外域或其含ACE2蛋白PD結構域的片段為野生型胞外域或其含ACE2蛋白PD結構域的片段；所述胞外域或片段的突變體為無酶活的胞外域或其含ACE2蛋白PD結構域的片段，或者為糖基化位點發生部分或全部突變的胞外域或其含ACE2蛋白PD結構域的片段，或者為無酶活、且糖基化位點發生部分或全部突變的胞外域或其含ACE2蛋白PD結構域的片段，或者為具有酶活、但糖基化位點發生部分或全部突變的胞外域或其含ACE2蛋白PD結構域的片段。

3.如權利要求2所述的融合蛋白，其特征在于，所述無酶活的胞外域或其片段為374位和/或378位發生了突變的胞外域或其片段；優選為發生了H374N和/或H378N的胞外域或其片段。

4.如權利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述胞外域的突變體與野生型ACE2蛋白胞外域的序列同一性為80％以上，優選85％以上，更優選90％以上，更優選95％以上，更優選97％以上，更優選99％以上；所述片段的突變體與野生型ACE2蛋白PD結構域的序列同一性為80％以上，優選85％以上，更優選90％以上，更優選95％以上，更優選97％以上，更優選99％以上。

5.如權利要求1或2所述的融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白為含兩個ACE2部分的二價形式，或含四個ACE2部分的四價形式。

6.如權利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白具有減弱的ACE2酶活。

7.如權利要求5所述的融合蛋白，其特征在于，所述二價形式的融合蛋白中，一個ACE2部分為野生型ACE2胞外域或其含ACE2蛋白PD結構域的片段，另一個ACE2部分為無酶活的突變型ACE2蛋白胞外域或其含ACE2蛋白PD結構域的片段，或

所述二價形式的融合蛋白中，兩個ACE2部分均為野生型ACE2胞外域或其含ACE2蛋白PD結構域的片段，或者兩個ACE2部分均為無酶活的突變型ACE2蛋白胞外域或其含ACE2蛋白PD結構域的片段，或

所述二價形式的融合蛋白中，至少一個ACE2部分為無酶活、且糖基化位點發生部分或全部突變的胞外域或其含ACE2蛋白PD結構域的片段，或至少一個ACE2部分為具有酶活、但糖基化位點發生部分或全部突變的胞外域或其含ACE2蛋白PD結構域的片段。

8.如權利要求5所述的融合蛋白，其特征在于，所述四價形式的融合蛋白中，至少一個ACE2部分為野生型ACE2胞外域或其含ACE2蛋白PD結構域的片段，或至少一個ACE2部分為無酶活的ACE2胞外域或其含ACE2蛋白PD結構域的片段；任選地，至少一個ACE2部分的部分或全部糖基化位點發生突變。

9.如權利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述ACE2部分通過接頭肽連接到Fc段；優選地，所述接頭為含有G和S的接頭。

10.如權利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述IgG1 Fc包含N297A糖基化位點突變，所述IgG4 Fc具有S228P突變和任選的N297A突變，或

IgG Fc的兩條鏈分別具有形成杵的突變和形成臼的突變，優選地，形成杵的突變是T366位點的突變，形成臼的突變是選自T366、L368和Y407中一個或多個位點的突變。

11.權利要求1-10中任一項所述的融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白由酵母表達得到。