[發(fā)明專利]一種栓皮櫟菌根化苗木的培育方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 202010217523.7 | 申請日： | 2020-03-25 |
| 公開（公告）號： | CN111386952A | 公開（公告）日： | 2020-07-10 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 熊歡;高曉磊;鄒鋒;張麗仔;袁德義;黃建;朱景樂;魏松坡 | 申請（專利權(quán)）人： | 中南林業(yè)科技大學 |
| 主分類號： | A01G17/00 | 分類號： | A01G17/00;A01G18/10;C12N1/14;C12R1/645 |
| 代理公司： | 長沙智路知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 43244 | 代理人： | 曲超 |
| 地址： | 410000 湖南省*** | 國省代碼： | 湖南;43 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 栓皮櫟 菌根 苗木 培育 方法 | ||
1.一種栓皮櫟菌根化苗木的培育方法，其特征在于，包括以下步驟：
1)育苗：于3～4月將篩選消毒后的栓皮櫟種子播入已消毒的育苗基質(zhì)中，培育20～40天，得到栓皮櫟幼苗；
2)施肥：將所得栓皮櫟幼苗栽種于殺菌后的培養(yǎng)基質(zhì)中，待栓皮櫟幼苗的主根系長8～10cm，側(cè)根發(fā)達后，將生物菌肥施于栓皮櫟幼苗根系附近；所述生物菌肥為馬勃子實體經(jīng)分離、純化、培養(yǎng)得到的生物活性菌肥；
3)苗木管理：定期澆水除草，保持培養(yǎng)基質(zhì)含水量30％～45％，培養(yǎng)溫室溫度保持在25℃～28℃，空氣相對濕度60％～70％，空氣流通，施肥后3～5個月，選擇菌根發(fā)育良好的栓皮櫟苗木進行大田定植。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的栓皮櫟菌根化苗木的培育方法，其特征在于，步驟1)中，所述篩選消毒具體為對栓皮櫟種子進行水選除去空癟、病蟲害的種子，用0.5％多菌靈溶液浸泡消毒10～15分鐘；所述育苗基質(zhì)為黃心土和泥炭按體積比2～3：1混合得到，所述育苗基質(zhì)的消毒同樣采用多菌靈進行殺菌消毒處理。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的栓皮櫟菌根化苗木的培育方法，其特征在于，步驟2)中，所述培養(yǎng)基質(zhì)為黃心土和草炭按體積比2～3：1混合得到，所述培養(yǎng)基質(zhì)的pH為5.5～5.7，所述培養(yǎng)基質(zhì)的殺菌處理為經(jīng)太陽曝曬殺菌5～10天。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的栓皮櫟菌根化苗木的培育方法，其特征在于，步驟2)中，每株栓皮櫟幼苗施用10～15g生物菌肥。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的栓皮櫟菌根化苗木的培育方法，其特征在于，步驟2)中，所述生物菌肥的制備方法具體為：
S1、采集馬勃子實體，經(jīng)消毒、解剖得到馬勃組織塊；
S2、將所得馬勃子組織塊接種至MMN培養(yǎng)基，培養(yǎng)皿用封口膜密封后，置于24～26℃溫度下避光培養(yǎng)20～30天，獲得純化菌絲；
S3、將所得純化菌絲接種在新的MMN培養(yǎng)基中，置于24～26℃溫度下培養(yǎng)至菌絲長滿平板，獲得活化菌絲；
S4、挑選所得活化菌絲，接種至裝有MMN培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中，在搖床中振蕩培養(yǎng)，振蕩培養(yǎng)溫度為25℃±0.5℃，轉(zhuǎn)速為160～180r/min，暗培養(yǎng)20～30天，獲得液體菌劑；
S5、將所得液體菌劑接種至滅菌后的固體培養(yǎng)基，在溫度為25℃±0.5℃下，暗培養(yǎng)30～45天，獲得固體菌劑，即生物活性菌肥，其中，所述固體培養(yǎng)基成分為草炭和蛭石按體積比2～3：1混合得到。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的栓皮櫟菌根化苗木的培育方法，其特征在于，步驟S1中，所述消毒為用70％酒精消毒；所述解剖具體為用解剖刀將馬勃子實體縱向切開，挑取黃豆粒大小的組織塊。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的栓皮櫟菌根化苗木的培育方法，其特征在于，步驟S2至步驟S4中，所述MMN培養(yǎng)基pH為5.5～5.7，包含以下組分：(NH4)2HPO4 0.25g/L，KH2PO40.5g/L,NaCl0.025g/L,MgSO4·7H2O 0.15g/L,CaCl2 0.05g/L,Thiamine HCl 0.1mg/L,FeCl3·6H2O0.02g/L,Malt Extract 3g/L,Glucose 10g/L。
8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的栓皮櫟菌根化苗木的培育方法，其特征在于，步驟S4中，每100ml MMN培養(yǎng)基接種3～6個由所述活化菌絲組成的直徑為0.2～0.6cm的菌塊。
9.根據(jù)權(quán)利要求5所述的栓皮櫟菌根化苗木的培育方法，其特征在于，步驟S5中，按照液體菌劑與固體培養(yǎng)基的體積質(zhì)量比為1ml：20～30g的比例接種液體菌劑。
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