[發明專利]糖靶向修飾siRNA納米粒子的制備及應用

有效

• 申請號: 202010216451.4
• 申請日: 2020-03-24
• 公開（公告）號: CN111214461B
• 公開（公告）日: 2021-04-16
• 發明（設計）人: 師冰洋;朱飛燕;鄭蒙;劉洋
• 申請（專利權）人: 河南大學
• 主分類號: A61K47/34
• 分類號: A61K47/34;A61K47/10;A61K47/26;A61K9/51;A61K31/713;A61P25/28
• 代理公司: 北京超凡宏宇專利代理事務所(特殊普通合伙) 11463
• 代理人: 陳秋夢

1.一種糖靶向納米粒子，其特征在于，其包括靶向納米載體，所述靶向納米載體由靶向分子、第一連接化合物、第一親水性生物材料、第二連接化合物和陽離子化合物通過化學鍵依次連接；所述第一連接化合物和所述第二連接化合物均具有羧基；所述第一連接化合物同時具有馬來酰亞胺基；

所述第一親水性生物材料含有巰基和氨基，所述第一親水性生物材料為PEI、聚賴氨酸或HS-PEG-NH₂；所述靶向分子與所述第一連接化合物通過酯化反應進行接枝連接，所述第一連接化合物接枝于所述第一親水性生物材料含巰基的一端，所述第一親水性生物材料的氨基端與所述第二連接化合物的羧基端脫水縮合連接，所述陽離子化合物與所述第二連接化合物聚合連接；所述第一連接化合物為馬來酰亞胺基丙酸，所述第二連接化合物為CPADB，所述陽離子化合物為GUA；

GUA的結構式為：

，

CPADB的結構式為：

；

所述靶向分子為環己醛糖。

2.根據權利要求1所述的糖靶向納米粒子，其特征在于，所述環己醛糖為葡萄糖或半乳糖。

3.根據權利要求1所述的糖靶向納米粒子，其特征在于，所述第一親水性生物材料為HS-PEG-NH₂；

所述HS-PEG-NH₂的分子量為2000。

4.根據權利要求1所述的糖靶向納米粒子，其特征在于，所述糖靶向納米粒子還包括非靶向含氟納米載體，所述非靶向含氟納米載體與所述靶向納米載體自組裝連接，所述非靶向含氟納米載體由第二親水性生物材料、第二連接化合物、陽離子化合物和疏水嵌段通過化學鍵依次連接；

所述第二親水性生物材料為PEG-NH₂，所述第二連接化合物CPADB；

所述第二親水性生物材料遠離所述第二連接化合物的一端修飾有封閉基團；

所述封閉基團為烷氧基；

制備非靶向含氟納米載體的方法包括先將非靶向含氟納米載體中的第二親水性生物材料與第二連接化合物脫水縮合反應，再將脫水縮合反應產物、陽離子化合物和疏水嵌段共聚反應；所述疏水嵌段為FPMA；所述陽離子化合物為GUA；

FPMA的結構式如下：

；

所述脫水縮合反應產物、所述GUA和FPMA共聚反應添加摩爾比為100-110：1800-2000：1；

所述共聚反應的溫度為60-70℃；

所述共聚反應的時間為24-48h。

5.根據權利要求4所述的糖靶向納米粒子，其特征在于，所述封閉基團為甲氧基。

6.根據權利要求4所述的糖靶向納米粒子，其特征在于，所述靶向納米載體與所述非靶向含氟納米載體的摩爾比為2-5:10；

所述非靶向含氟納米載體中GUA的聚合度為16-20，FPMA的聚合度為2-6。

7.根據權利要求6所述的糖靶向納米粒子，其特征在于，所述靶向納米載體與所述非靶向含氟納米載體的摩爾比為2.5:7.5。

8.一種糖靶向修飾siRNA的納米粒子，其特征在于，其包括權利要求1-7任一項所述的糖靶向納米粒子，且所述糖靶向納米粒子中的靶向納米載體包覆于siRNA的周圍。

9.根據權利要求8所述的糖靶向修飾siRNA的納米粒子，其特征在于，所述siRNA為BACE1 siRNA或抑制Aβ聚集的siRNA；

所述BACE1 siRNA的正義鏈的核酸序列如SEQ NO.1所示，所述BACE1 siRNA的反義鏈的核酸序列如SEQ NO.2所示。

10.根據權利要求8所述的糖靶向修飾siRNA的納米粒子，其特征在于，所述糖靶向納米粒子還包括非靶向含氟納米載體，所述靶向納米載體與所述非靶向含氟納米載體的摩爾比為2-5:10；

所述非靶向含氟納米載體與所述siRNA的質量比為1.5-5:1。